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结核菌H37Ra免疫小鼠后机体抗结核细胞免疫功能的研究 被引量:6
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作者 陶昆 卢贤瑜 +1 位作者 陈思静 夏长胜 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1195-1197,共3页
目的探讨小鼠皮内接种H37Ra后,细菌在体内的定植及机体能否产生针对结核菌的免疫力。方法用H37Ra皮内免疫小鼠后15、30、60 d,检测结核菌在小鼠体内脏器的定植;免疫后第30、60天,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞受PPD刺激后的增殖转化刺激指数... 目的探讨小鼠皮内接种H37Ra后,细菌在体内的定植及机体能否产生针对结核菌的免疫力。方法用H37Ra皮内免疫小鼠后15、30、60 d,检测结核菌在小鼠体内脏器的定植;免疫后第30、60天,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞受PPD刺激后的增殖转化刺激指数、ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞受PPD刺激后IL-2、sIL-2R的表达量。结果小鼠脾、肺脏中有结核菌定植,并至少存活60 d;脾淋巴细胞30、60 d的刺激指数分别为(2.81±0.63)、(2.16±0.52),与BCG皮内接种组无显著性差异,与未免疫组有显著性差异(P<0.05);脾淋巴细胞IL-2、sIL-2R表达量分别为(126.88±8.11)、(91.26±7.29)pg/m l和(138.58±7.67)、(127.09±5.47)pg/m l,与BCG皮内接种组、未免疫组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论H37Ra免疫小鼠后能诱导机体产生特异性的抗结核免疫力,且免疫效果略优于BCG。 展开更多
关键词 H37RA 定植 细胞免疫
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有机硒增强BCG细胞免疫效果的初步探讨 被引量:3
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作者 李惠 卢贤瑜 +1 位作者 王利娴 阳强 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第7期682-685,共4页
目的:探讨酵母硒(Yeast-based selenium,Se)对卡介苗(BCG)免疫效果的影响。方法:将小鼠分为4组:A组BCG皮内接种+喂硒、B组BCG皮内接种、C组单纯喂硒、D组对照组(control)。于接种4周、8周后取单个脾淋巴细胞,通过检测淋巴细胞增殖指数(S... 目的:探讨酵母硒(Yeast-based selenium,Se)对卡介苗(BCG)免疫效果的影响。方法:将小鼠分为4组:A组BCG皮内接种+喂硒、B组BCG皮内接种、C组单纯喂硒、D组对照组(control)。于接种4周、8周后取单个脾淋巴细胞,通过检测淋巴细胞增殖指数(Stimulation idex,SI)、IL-2、IFN-γ、细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤活力及淋巴细胞颗粒酶B及穿孔素的表达量来评价机体抗结核的细胞免疫能力。结果:6项指标A与B组均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);A组的SI、IL-2、IFN-γ、CTL杀伤活力,免疫4周后分别为2.61±0.24、(172.56±9.34)pg/ml、(131.89±3.32)pg/ml、(43.91±3.21)%(8周值分别为2.32±0.31、(138.04±9.67)pg/ml、(129.17±2.41)pg/ml、(39.92±6.45)%,均显著高于B组(4周值:(1.62±0.14)、(134.06±9.60)pg/ml、(105.89±4.62)pg/ml、(30.46±7.97)%;8周值:1.61±0.19、(101.42±7.76)pg/ml、(102.00±5.41)pg/ml、(28.14±5.70)%),P<0.05。结论:BCG与硒酵母有免疫协同作用,能诱导机体产生较强的抗结核的细胞免疫应答反应。 展开更多
关键词 BCG 有机硒 细胞免疫
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结核杆菌H37Ra免疫小鼠后脾淋巴细胞的杀伤活性及免疫机制的研究
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作者 王利娴 卢贤瑜 +1 位作者 李惠 阳强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期164-167,共4页
目的探讨结核杆菌H37Ra免疫小鼠后,产生特异性的脾淋巴细胞杀伤活性及其免疫机制。方法(1)分别以结核杆菌H37Ra、BCG和PBS免疫小鼠后第30天及第60天,分离各组小鼠脾淋巴细胞作为效应细胞,以表达Ag85B分泌蛋白的Sp2/0细胞为靶细胞,用MTT... 目的探讨结核杆菌H37Ra免疫小鼠后,产生特异性的脾淋巴细胞杀伤活性及其免疫机制。方法(1)分别以结核杆菌H37Ra、BCG和PBS免疫小鼠后第30天及第60天,分离各组小鼠脾淋巴细胞作为效应细胞,以表达Ag85B分泌蛋白的Sp2/0细胞为靶细胞,用MTT比色法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的杀伤率;(2)在免疫后第60天,小鼠脾淋巴细胞经PPD刺激后,以RT-PCR法检测穿孔素mRNA及颗粒酶BmRNA的表达。结果(1)结核杆菌H37Ra组脾淋巴细胞的杀伤率明显高于PBS对照组(P<0.05),略高于BCG组;(2)H37Ra组和BCG组穿孔素、颗粒酶mRNA的表达量均显著高于PBS组(P<0.05),H37Ra组穿孔素mRNA的表达量显著高于BCG组(P<0.05),但颗粒酶BmRNA的表达量两组无差异。结论结核杆菌H37Ra免疫小鼠后,能增强脾淋巴细胞的杀伤活性,其机制可能与增加穿孔素、颗粒酶B的表达有关。 展开更多
关键词 结核杆菌H37Ra Ag85B蛋白 小鼠淋巴细胞 穿孔素 颗粒酶B
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Ag85B DNA/H37Ra序贯免疫效果的探讨
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作者 王锦彤 卢贤瑜 冉柏林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第6期584-587,共4页
目的:初步探讨含结核分枝杆菌Ag85B成熟蛋白的DNA(pTB30m)和结核菌H37Ra序贯免疫小鼠产生的特异性免疫应答。方法:重组质粒pTB30m用碱裂解法制备后进行质量鉴定。用pTB30m肌注初次免疫小鼠2周后,H37Ra皮内加强免疫作为DNA-85B/H37Ra组,... 目的:初步探讨含结核分枝杆菌Ag85B成熟蛋白的DNA(pTB30m)和结核菌H37Ra序贯免疫小鼠产生的特异性免疫应答。方法:重组质粒pTB30m用碱裂解法制备后进行质量鉴定。用pTB30m肌注初次免疫小鼠2周后,H37Ra皮内加强免疫作为DNA-85B/H37Ra组,同时设定DNA-85B/BCG组、H37Ra组、BCG组及未免疫组。免疫4周或8周后,用ELISA法检测小鼠血清中抗PPD IgG抗体的水平和MTT法检测其脾淋巴细胞的刺激指数(SI)。结果:酶切鉴定pTB30m所含外源基因片段大小正确,并且纯度较高。DNA-85B/H37Ra组小鼠血清中抗PPD IgG水平、脾淋巴细胞的SI均显著高于未免疫组(P<0.05);其抗PPD IgG水平稍高于DNA-85B/BCG组、H37Ra组及BCG组,但它们之间无显著性差异(P>0.05);其脾淋巴细胞的SI显著高于H37Ra、BCG组(P<0.05),而与DNA-85B/BCG组比较,仅在4周有显著性差异。在DNA-85B/H37Ra组内,SI在4周显著高于8周(P<0.05),而血清中抗PPD IgG水平8周均显著高于4周(P<0.05)。结论:DNA-85B/H37Ra序贯免疫策略可以诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫,初步证明其免疫效果略优于BCG。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 序贯免疫策略 初免-加强免疫接种策略 抗原Ag85B H37RA
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结核菌H37Ra皮内接种对小鼠巨噬细胞的激活效应 被引量:3
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作者 陶昆 卢贤瑜 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期232-235,共4页
目的探讨小鼠皮内接种结核菌H37Ra后,腹腔MΦ是否被免疫激活以及激活后氮氧化物的产生、抗结核细胞因子的表达,从而了解H37Ra的免疫应答过程及对MΦ的抗菌免疫作用。方法用H37Ra、BCG皮内免疫小鼠后第30、60天,分别采用Griess法、化学法... 目的探讨小鼠皮内接种结核菌H37Ra后,腹腔MΦ是否被免疫激活以及激活后氮氧化物的产生、抗结核细胞因子的表达,从而了解H37Ra的免疫应答过程及对MΦ的抗菌免疫作用。方法用H37Ra、BCG皮内免疫小鼠后第30、60天,分别采用Griess法、化学法、ELISA法检测小鼠腹腔MΦ在受到、未受到IFN-γ刺激后NO、H2O2的产生以及IL-12、TNF-α的表达水平。结果①H37Ra免疫小鼠后能显著诱导MΦ分泌表达IL-12、TNF-α,与BCG皮内接种组、未免疫组比较,其差异均有统计学意义(P<0.05);也能诱导MΦ产生NO、H2O2,与未免疫组比较具有统计学意义(P<0.05),与BCG皮内接种组比较,无明显差异;②IFN-γ对巨噬细胞氮氧化物的产生、细胞因子的表达具增强效应。结论H37Ra皮内接种小鼠后能诱导巨噬细胞活化并产生较强的激活效应,且该效应略优于BCG。 展开更多
关键词 H37RA 巨噬细胞 氮氧化物 细胞因子
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携带结核杆菌Ag85B靶细胞的构建、鉴定及应用 被引量:1
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作者 李惠 王利娴 +1 位作者 卢贤瑜 阳强 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期214-217,共4页
目的构建表达结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B的靶细胞以便评定结核疫苗的特异性细胞毒(CTL)作用。方法将携带有Ag85B基因的重组质粒pTB30s转入小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0),用RT-PCR及免疫组化染色法鉴定阳性克隆细胞胞内的Ag85B基因转录和蛋白表... 目的构建表达结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B的靶细胞以便评定结核疫苗的特异性细胞毒(CTL)作用。方法将携带有Ag85B基因的重组质粒pTB30s转入小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0),用RT-PCR及免疫组化染色法鉴定阳性克隆细胞胞内的Ag85B基因转录和蛋白表达水平;同时,用接种过BCG,pTB30s或生理盐水(NS)小鼠脾脏单个核细胞作为效应细胞,G418高压筛选的阳性克隆细胞为靶细胞,用MTT法检测各组CTL杀伤活性。结果RT-PCR以及免疫组化结果显示,阳性细胞能稳定表达Ag85B。CTL杀伤实验:BCG、pTB30s及NS对照组杀伤率分别为28.14%、45.18%和5.13%。结论含有Ag85B靶细胞构建成功及应用,为研究结核疫苗的免疫效果提供了较好的研究手段。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 AG85B 特异性CTL杀伤活性
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