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1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞诱导分化的实验研究
被引量:
5
1
作者
卢方安
卢娟
+2 位作者
朱志芬
于龙顺
潘龙瑞
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期814-817,共4页
目的观察1,25-二羟维生素D3对胃腺癌MGC-803细胞的诱导分化作用。方法1,25-二羟维生素D3(10-6、10-5、10-4mmol.L-1)作用于MGC-803细胞后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力、平板克隆试验测定细胞集落形成率、流式细胞仪测定...
目的观察1,25-二羟维生素D3对胃腺癌MGC-803细胞的诱导分化作用。方法1,25-二羟维生素D3(10-6、10-5、10-4mmol.L-1)作用于MGC-803细胞后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力、平板克隆试验测定细胞集落形成率、流式细胞仪测定细胞周期、TRAP-银染法测定端粒酶活性。结果1,25-二羟维生素D3作用24、48、72和96h后胃腺癌细胞生长均明显受抑制,48h后细胞周期出现向G0/G1期移行的特征性动力学改变,端粒酶活性明显受到抑制。细胞集落形成率明显下降(P<0.05)。结论1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞有诱导分化作用。
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关键词
1
25-二羟维生素D
胃腺癌细胞
诱导分化
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职称材料
骨髓基质干细胞的分离纯化及培养
被引量:
5
2
作者
阮绪芝
陈霞萍
+1 位作者
严世荣
王卫民
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2004年第2期25-27,共3页
目的 建立骨髓基质干细胞(MSCs)良好的分离纯化和培养方法。方法 将小鼠骨髓基质干细胞自股骨中分离,应用贴壁选择法结合细胞克隆挑选法进行分离纯化,应用细胞生长因子(EGF和PDGF-BB)刺激法进行MSCs的体外培养和传代,倒置显微镜下观...
目的 建立骨髓基质干细胞(MSCs)良好的分离纯化和培养方法。方法 将小鼠骨髓基质干细胞自股骨中分离,应用贴壁选择法结合细胞克隆挑选法进行分离纯化,应用细胞生长因子(EGF和PDGF-BB)刺激法进行MSCs的体外培养和传代,倒置显微镜下观察分离培养的细胞并照像记录。结果,培养获得了纯化的呈梭形成纤维样细胞的骨髓基质干细胞。在生长因子EGF和PDGF-BB的共同作用下,传代MSCs生长旺盛,形态均一。结论 该方法是简便高效的骨髓基质干细胞的分离纯化和培养方法。
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关键词
小鼠
骨髓基质干细胞
细胞培养
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职称材料
EBV-DNA酶全基因扩增克隆和鉴定
被引量:
7
3
作者
朱振宇
严世荣
+2 位作者
黄迪
陈尚武
马涧泉
《中山医科大学学报》
CSCD
1995年第4期5-8,共4页
根据Bear的EB病毒(EBV)基因全序列,设计包括EBV特异性DNA酶全基因的一对引物,在引物上设计有一个SalⅠ切点,以便于克隆。选用蛋白酶K裂解的Raji细胞DNA为模板,扩增出一条1460bp的特异条带,纯比...
根据Bear的EB病毒(EBV)基因全序列,设计包括EBV特异性DNA酶全基因的一对引物,在引物上设计有一个SalⅠ切点,以便于克隆。选用蛋白酶K裂解的Raji细胞DNA为模板,扩增出一条1460bp的特异条带,纯比后经TaqⅠ酶切形成1198bp和262bp的两个片段,证实该扩增片段即为EBV特异性DNA酶的全基因片段。以JM103为宿主菌,以高效表达质粒PBV221为载体,按常规方法作酶切、连接、转化,最后在含氨中青霉素的培养基上挑取单菌落扩大培养,用快速法少量制备质粒DNA。根据质粒电泳结果粗筛,再行BamHⅠ酶切初步鉴定,确定质粒大小为5117(1451+3666)bp的菌落为阳性克隆。先后用BamHⅠ和TaqⅠ消化阳性重组体,以形成1200bp和3917bp两片段的确定为正向连接重组体。
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关键词
聚合酶链反应
克隆
分子
DNA酶基因
EB病毒
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职称材料
pET28a-TAT-LacZ重组子的构建
被引量:
3
4
作者
严世荣
龚坚
+1 位作者
严洁
邱云城
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第2期141-144,共4页
为了构建高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,观察表达的融合蛋白TAT-β-Gal能否穿过生物膜,使用人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a组氨酸编码区后再连接lacZ基因,组成pET28a-TAT-LacZ重组表达子,转化大肠杆菌,利用组氨酸亲...
为了构建高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,观察表达的融合蛋白TAT-β-Gal能否穿过生物膜,使用人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a组氨酸编码区后再连接lacZ基因,组成pET28a-TAT-LacZ重组表达子,转化大肠杆菌,利用组氨酸亲和层析柱纯化TAT-β-Gal融合蛋白,将融合蛋白加入培养的平滑肌细胞。得到高度纯化的、有活性的TAT-β-Gal融合蛋白,TAT-β-Gal在短时间内进入体外培养平滑肌细胞,成功地构建了高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,并在体外培养的细胞中证实TAT-β-Gal融合蛋白穿透生物膜的能力,为肽类、生物大分子药物进入组织细胞内发挥治疗作用提供了理论基础。
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关键词
pET28a质粒
TAT蛋白转导区
TAT-β-Gal融合蛋白
平滑肌细胞
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职称材料
人内皮抑素在大肠杆菌中的高效表达及活性研究
被引量:
1
5
作者
张革
柯细松
+3 位作者
丁爱玲
银巍
杨琨
朱振宇
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第11期1370-1373,共4页
目的 :表达人内皮抑素蛋白 ,制备多克隆抗体 ,检测其生物学活性。方法 :采用PCR法扩增人内皮抑素基因 ,构建pGEX -ES融合表达载体 ,IPTG(异丙基硫代 - β-D半乳糖苷 )诱导表达。初步纯化的内皮抑素包含体蛋白制备兔多克隆抗体 ,Western ...
目的 :表达人内皮抑素蛋白 ,制备多克隆抗体 ,检测其生物学活性。方法 :采用PCR法扩增人内皮抑素基因 ,构建pGEX -ES融合表达载体 ,IPTG(异丙基硫代 - β-D半乳糖苷 )诱导表达。初步纯化的内皮抑素包含体蛋白制备兔多克隆抗体 ,Western -blot检测其在小鼠肝、肾等的表达。亲和纯化的内皮抑素蛋白用内皮细胞抑制实验检测其生物学活性。结果 :诱导表达的人内皮抑素蛋白经凝血酶酶切后 ,分子量约为 2 0kD ,具有抑制内皮细胞生长的活性。制备的多克隆抗体检测出内皮抑素在小鼠肝、肾等组织的表达。结论
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关键词
内皮抑素
大肠杆菌
抗体
生物学活性
PCR法
实体瘤
单克隆抗体
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职称材料
黑木耳抗动脉粥样硬化的实验研究
被引量:
6
6
作者
肖瑛
黄永章
+1 位作者
熊秀敏
孙鹏飞
《同济医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1990年第5期328-331,共4页
本文观察黑木耳对实验性动脉粥样硬化(AS)家兔AS病变及有关生化指标的影响。实验结果,黑木耳有降低血浆胆固醇(TC)、过氧化脂质(LPO)、血栓素A_2(TXA_2)的含量,提高前列环素/血栓素A_2(PGI_2/TXA_2)比值,减轻AS病变的作用。表明黑木耳...
本文观察黑木耳对实验性动脉粥样硬化(AS)家兔AS病变及有关生化指标的影响。实验结果,黑木耳有降低血浆胆固醇(TC)、过氧化脂质(LPO)、血栓素A_2(TXA_2)的含量,提高前列环素/血栓素A_2(PGI_2/TXA_2)比值,减轻AS病变的作用。表明黑木耳具有抗AS作用。其机理可能是通过降血TC,保护动脉内膜,抑制血小板聚集,并由此抑制TXA_2合成;血TC降低亦可减少脂质过氧化,从而使环氧化酶、TXA_2合成酶活性降低,TXA_2合成减少。黑木耳通过以上途径维系PGI_2/TXA_2平衡,保护血管完整性的内环境相对稳定,对抗动脉粥样硬化的发生。
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关键词
黑木耳
动脉粥样硬化
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职称材料
题名
1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞诱导分化的实验研究
被引量:
5
1
作者
卢方安
卢娟
朱志芬
于龙顺
潘龙瑞
机构
郧阳医学院生物化学教研室
郧阳
医学院
药理学
教研室
郧阳
医学院
卫生所
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期814-817,共4页
基金
湖北省科技攻关资助项目(No2001AA301C40)
湖北省教育厅科研资助项目(No2000A43008)
文摘
目的观察1,25-二羟维生素D3对胃腺癌MGC-803细胞的诱导分化作用。方法1,25-二羟维生素D3(10-6、10-5、10-4mmol.L-1)作用于MGC-803细胞后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力、平板克隆试验测定细胞集落形成率、流式细胞仪测定细胞周期、TRAP-银染法测定端粒酶活性。结果1,25-二羟维生素D3作用24、48、72和96h后胃腺癌细胞生长均明显受抑制,48h后细胞周期出现向G0/G1期移行的特征性动力学改变,端粒酶活性明显受到抑制。细胞集落形成率明显下降(P<0.05)。结论1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞有诱导分化作用。
关键词
1
25-二羟维生素D
胃腺癌细胞
诱导分化
Keywords
1,25-( OH)2D3
gastric carcinoma cell
induced differentiation
分类号
R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R329.28 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
骨髓基质干细胞的分离纯化及培养
被引量:
5
2
作者
阮绪芝
陈霞萍
严世荣
王卫民
机构
郧阳
医学院
生物
学
教研室
郧阳
医学院
附属太和医院生命科学研究所
郧阳医学院生物化学教研室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2004年第2期25-27,共3页
文摘
目的 建立骨髓基质干细胞(MSCs)良好的分离纯化和培养方法。方法 将小鼠骨髓基质干细胞自股骨中分离,应用贴壁选择法结合细胞克隆挑选法进行分离纯化,应用细胞生长因子(EGF和PDGF-BB)刺激法进行MSCs的体外培养和传代,倒置显微镜下观察分离培养的细胞并照像记录。结果,培养获得了纯化的呈梭形成纤维样细胞的骨髓基质干细胞。在生长因子EGF和PDGF-BB的共同作用下,传代MSCs生长旺盛,形态均一。结论 该方法是简便高效的骨髓基质干细胞的分离纯化和培养方法。
关键词
小鼠
骨髓基质干细胞
细胞培养
Keywords
murine
bone marrow stromal
stem cells
cell culture.
分类号
R331.2 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
EBV-DNA酶全基因扩增克隆和鉴定
被引量:
7
3
作者
朱振宇
严世荣
黄迪
陈尚武
马涧泉
机构
中山医科大学
生物
化学
教研室
湖北
郧阳医学院生物化学教研室
中山医科大学肿瘤所生化室
出处
《中山医科大学学报》
CSCD
1995年第4期5-8,共4页
基金
国家教委博士点基金
文摘
根据Bear的EB病毒(EBV)基因全序列,设计包括EBV特异性DNA酶全基因的一对引物,在引物上设计有一个SalⅠ切点,以便于克隆。选用蛋白酶K裂解的Raji细胞DNA为模板,扩增出一条1460bp的特异条带,纯比后经TaqⅠ酶切形成1198bp和262bp的两个片段,证实该扩增片段即为EBV特异性DNA酶的全基因片段。以JM103为宿主菌,以高效表达质粒PBV221为载体,按常规方法作酶切、连接、转化,最后在含氨中青霉素的培养基上挑取单菌落扩大培养,用快速法少量制备质粒DNA。根据质粒电泳结果粗筛,再行BamHⅠ酶切初步鉴定,确定质粒大小为5117(1451+3666)bp的菌落为阳性克隆。先后用BamHⅠ和TaqⅠ消化阳性重组体,以形成1200bp和3917bp两片段的确定为正向连接重组体。
关键词
聚合酶链反应
克隆
分子
DNA酶基因
EB病毒
分类号
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
pET28a-TAT-LacZ重组子的构建
被引量:
3
4
作者
严世荣
龚坚
严洁
邱云城
机构
郧阳
医学院
附属十堰市人民医院检验部
郧阳医学院生物化学教研室
郧阳
医学院
附属太和医院神经内科
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第2期141-144,共4页
基金
湖北省教育厅青年基金(2000A43006)资助
文摘
为了构建高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,观察表达的融合蛋白TAT-β-Gal能否穿过生物膜,使用人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a组氨酸编码区后再连接lacZ基因,组成pET28a-TAT-LacZ重组表达子,转化大肠杆菌,利用组氨酸亲和层析柱纯化TAT-β-Gal融合蛋白,将融合蛋白加入培养的平滑肌细胞。得到高度纯化的、有活性的TAT-β-Gal融合蛋白,TAT-β-Gal在短时间内进入体外培养平滑肌细胞,成功地构建了高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,并在体外培养的细胞中证实TAT-β-Gal融合蛋白穿透生物膜的能力,为肽类、生物大分子药物进入组织细胞内发挥治疗作用提供了理论基础。
关键词
pET28a质粒
TAT蛋白转导区
TAT-β-Gal融合蛋白
平滑肌细胞
Keywords
pET28a phage
TAT protein transduction domain3
TAT-β-Gal fusion protein
Vascular smooth muscle cells
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
人内皮抑素在大肠杆菌中的高效表达及活性研究
被引量:
1
5
作者
张革
柯细松
丁爱玲
银巍
杨琨
朱振宇
机构
中山医科大学分子
医学
中心
重庆医科大学生生
化学
教研室
郧阳医学院生物化学教研室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第11期1370-1373,共4页
基金
国家教委留学回国人员启动基金资助项目(2 0 0 0 - 4 79)
文摘
目的 :表达人内皮抑素蛋白 ,制备多克隆抗体 ,检测其生物学活性。方法 :采用PCR法扩增人内皮抑素基因 ,构建pGEX -ES融合表达载体 ,IPTG(异丙基硫代 - β-D半乳糖苷 )诱导表达。初步纯化的内皮抑素包含体蛋白制备兔多克隆抗体 ,Western -blot检测其在小鼠肝、肾等的表达。亲和纯化的内皮抑素蛋白用内皮细胞抑制实验检测其生物学活性。结果 :诱导表达的人内皮抑素蛋白经凝血酶酶切后 ,分子量约为 2 0kD ,具有抑制内皮细胞生长的活性。制备的多克隆抗体检测出内皮抑素在小鼠肝、肾等组织的表达。结论
关键词
内皮抑素
大肠杆菌
抗体
生物学活性
PCR法
实体瘤
单克隆抗体
Keywords
Endostatin
Antibodies
Biological activity
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R730.23 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
黑木耳抗动脉粥样硬化的实验研究
被引量:
6
6
作者
肖瑛
黄永章
熊秀敏
孙鹏飞
机构
同济医科大学
郧阳医学院生物化学教研室
同济医科大学
郧阳
医学院
生理学
教研室
出处
《同济医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1990年第5期328-331,共4页
文摘
本文观察黑木耳对实验性动脉粥样硬化(AS)家兔AS病变及有关生化指标的影响。实验结果,黑木耳有降低血浆胆固醇(TC)、过氧化脂质(LPO)、血栓素A_2(TXA_2)的含量,提高前列环素/血栓素A_2(PGI_2/TXA_2)比值,减轻AS病变的作用。表明黑木耳具有抗AS作用。其机理可能是通过降血TC,保护动脉内膜,抑制血小板聚集,并由此抑制TXA_2合成;血TC降低亦可减少脂质过氧化,从而使环氧化酶、TXA_2合成酶活性降低,TXA_2合成减少。黑木耳通过以上途径维系PGI_2/TXA_2平衡,保护血管完整性的内环境相对稳定,对抗动脉粥样硬化的发生。
关键词
黑木耳
动脉粥样硬化
Keywords
Auricularia auricula (L.ex Hook) Underw
atherosclerosis, cholesterol
thromboxane A2
lipoperoxides
分类号
R282.710.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞诱导分化的实验研究
卢方安
卢娟
朱志芬
于龙顺
潘龙瑞
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
5
在线阅读
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职称材料
2
骨髓基质干细胞的分离纯化及培养
阮绪芝
陈霞萍
严世荣
王卫民
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2004
5
在线阅读
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职称材料
3
EBV-DNA酶全基因扩增克隆和鉴定
朱振宇
严世荣
黄迪
陈尚武
马涧泉
《中山医科大学学报》
CSCD
1995
7
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职称材料
4
pET28a-TAT-LacZ重组子的构建
严世荣
龚坚
严洁
邱云城
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2003
3
在线阅读
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职称材料
5
人内皮抑素在大肠杆菌中的高效表达及活性研究
张革
柯细松
丁爱玲
银巍
杨琨
朱振宇
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
1
在线阅读
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职称材料
6
黑木耳抗动脉粥样硬化的实验研究
肖瑛
黄永章
熊秀敏
孙鹏飞
《同济医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1990
6
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职称材料
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