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普通烟草NtASAT2的结构预测、克隆表达及功能验证
1
作者
韩丽
董滋强
+4 位作者
王丽娇
李文钦
王晨辉
肖成志
毛多斌
《轻工学报》
北大核心
2025年第4期69-76,共8页
为获得具有活性的普通烟草酰基糖酰基转移酶(NtASAT2),采取生物信息学方法对其序列及结构进行分析和预测,并对其基因进行克隆、原核表达与纯化,通过酶催化反应对获得的重组蛋白进行功能验证。结果表明:在NtASAT2二级结构中,α-螺旋及无...
为获得具有活性的普通烟草酰基糖酰基转移酶(NtASAT2),采取生物信息学方法对其序列及结构进行分析和预测,并对其基因进行克隆、原核表达与纯化,通过酶催化反应对获得的重组蛋白进行功能验证。结果表明:在NtASAT2二级结构中,α-螺旋及无规则卷曲占比较大,分别为39.04%和41.13%,且NtASAT2的氨基酸序列与粘毛烟草NacASAT2高度相似;在原核细胞BL21(DE3)表达的重组蛋白中,可溶性NtASAT2含量较少,且NtASAT2与镍柱的亲和力较弱,纯化后仅得到少量目标蛋白;在含有底物的酶催化反应体系中,NtASAT2表现出酶活性并催化生成蔗糖二酯。该研究结果可为NtASAT2在酶催化合成蔗糖酯方面的应用提供理论参考。
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关键词
普通烟草
酰基糖酰基转移酶
蔗糖酯
克隆
表达与纯化
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题名
普通烟草NtASAT2的结构预测、克隆表达及功能验证
1
作者
韩丽
董滋强
王丽娇
李文钦
王晨辉
肖成志
毛多斌
机构
郑州
轻工业
大学
食品与
生物
工程学院
郑州轻工业大学烟草工业生物技术重点实验室
出处
《轻工学报》
北大核心
2025年第4期69-76,共8页
基金
中国烟草总公司重点研发项目(110202202006)。
文摘
为获得具有活性的普通烟草酰基糖酰基转移酶(NtASAT2),采取生物信息学方法对其序列及结构进行分析和预测,并对其基因进行克隆、原核表达与纯化,通过酶催化反应对获得的重组蛋白进行功能验证。结果表明:在NtASAT2二级结构中,α-螺旋及无规则卷曲占比较大,分别为39.04%和41.13%,且NtASAT2的氨基酸序列与粘毛烟草NacASAT2高度相似;在原核细胞BL21(DE3)表达的重组蛋白中,可溶性NtASAT2含量较少,且NtASAT2与镍柱的亲和力较弱,纯化后仅得到少量目标蛋白;在含有底物的酶催化反应体系中,NtASAT2表现出酶活性并催化生成蔗糖二酯。该研究结果可为NtASAT2在酶催化合成蔗糖酯方面的应用提供理论参考。
关键词
普通烟草
酰基糖酰基转移酶
蔗糖酯
克隆
表达与纯化
Keywords
Nicotiana tabacum L.
acylsugar acyltransferase
sucrose ester
cloning
expression and purification
分类号
TS413 [农业科学—烟草工业]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
普通烟草NtASAT2的结构预测、克隆表达及功能验证
韩丽
董滋强
王丽娇
李文钦
王晨辉
肖成志
毛多斌
《轻工学报》
北大核心
2025
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