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枸杞多糖抑制核因子κB(NF-κB)通路降低骨关节炎软骨细胞炎性细胞因子水平 被引量:34
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作者 蔡松涛 孙京涛 魏瑄 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期989-993,共5页
目的探讨枸杞多糖对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖、细胞中免疫相关细胞因子水平的影响及其潜在机制。方法收集骨关节炎样本,分离培养OA软骨细胞。以(0、100、200、400、800)μg/m L枸杞多糖作用OA软骨细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖确定... 目的探讨枸杞多糖对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖、细胞中免疫相关细胞因子水平的影响及其潜在机制。方法收集骨关节炎样本,分离培养OA软骨细胞。以(0、100、200、400、800)μg/m L枸杞多糖作用OA软骨细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖确定最佳枸杞多糖剂量。以400μg/m L枸杞多糖处理OA软骨细胞,实时荧光定量PCR检测细胞中诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、生长转化因子β(TGF-β)、核因子κBp65(NF-κBp65)的mRNA水平,Western blot法检测细胞i NOS、TGF-β、NF-κBp65的蛋白水平,ELISA检测培养OA软骨细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果当枸杞多糖剂量为(200、400、800)μg/m L时,OA软骨细胞活力明显低于0μg/m L组,且400μg/m L组、800μg/m L组细胞活力低于200μg/m L组,而400μg/m L组和800μg/m L组细胞活力无明显变化,选取400μg/m L为最适剂量。与对照组相比,400μg/m L枸杞多糖处理的OA软骨细胞上清液中IL-1β和TNF-α水平降低,细胞中i NOS在mRNA和蛋白水平上表达下调,而TGF-β表达上调,同时,NF-κBp65蛋白水平降低。结论枸杞多糖能够降低OA软骨细胞炎性细胞因子水平,抑制NF-κB信号通路,从而改善骨关节炎症损伤。 展开更多
关键词 骨关节炎 枸杞多糖 白细胞介素1β(IL-1β) 肿瘤坏死因子α(TNF-α) 核因子κBp65(NF-κBp65)
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miR-23b-3p靶向XIAP调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的机制研究 被引量:11
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作者 蔡松涛 孙京涛 魏瑄 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1310-1315,共6页
目的:探讨微小RNA-23b-3p(miR-23b-3p)靶向X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:应用RT-qPCR检测体外培养的RA滑膜成纤维细胞中miR-23b-3p和XIAP的表达水平。通过TargetScan预测分... 目的:探讨微小RNA-23b-3p(miR-23b-3p)靶向X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:应用RT-qPCR检测体外培养的RA滑膜成纤维细胞中miR-23b-3p和XIAP的表达水平。通过TargetScan预测分析miR-23b-3p与XIAP的靶向关系,并使用双萤光素酶报告基因实验进行验证。采用脂质体法将miR-23b-3p模拟物和抑制物转入细胞中,RT-qPCR法检测miR-23b-3p和XIAP表达水平的变化;CCK-8法和细胞流式术分别检测miR-23b-3p对细胞活力和细胞凋亡的影响;Western blot检测Ki67和Bcl-2蛋白表达量的变化。结果:类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中miR-23b-3p表达显著下调,XIAP表达显著上调(P<0.05)。转染miR-23b-3p模拟物促使XIAP表达显著下调(P<0.05),并且显著抑制细胞活力,促进细胞凋亡(P<0.05),同时Ki67和Bcl-2显著下调(P<0.05);转染miR-23b-3p抑制物的效果与之相反。结论:miR-23b-3p通过靶向XIAP抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖,促进其凋亡。 展开更多
关键词 微小RNA-23b-3p X连锁凋亡抑制蛋白 类风湿关节炎 细胞活力 细胞凋亡
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