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后天感染河南樱桃谷鸭乙型肝炎病毒模型的建立 被引量:4
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作者 臧利敏 吴学炜 +5 位作者 赵雪杰 方先珍 杨晓瑞 王庆端 常俊标 郑立运 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2013年第6期732-735,共4页
目的:建立并验证后天感染河南樱桃谷鸭乙型肝炎病毒(DHBV)模型。方法:筛选3日龄DHBV阴性河南樱桃谷鸭,经胫静脉注射DHBV阳性血清建立DHBV模型鸭,连续观察42 d,采用荧光定量PCR方法检测鸭血清和肝脏中DHBV DNA变化情况。DHBV阴性鸭48只,... 目的:建立并验证后天感染河南樱桃谷鸭乙型肝炎病毒(DHBV)模型。方法:筛选3日龄DHBV阴性河南樱桃谷鸭,经胫静脉注射DHBV阳性血清建立DHBV模型鸭,连续观察42 d,采用荧光定量PCR方法检测鸭血清和肝脏中DHBV DNA变化情况。DHBV阴性鸭48只,分为正常组、模型组和3TC组,每组16只。模型组和3TC组于鸭3日龄时建模,模型组给予生理盐水2 mL/(kg·d),3TC组给予3TC 20 mg/(kg·d),连续给药10 d。PCR检测给药5、10 d后及停药3 d后血清和肝脏中DHBV DNA含量,并进行肝脏病理学观察。结果:感染2 d后,鸭血清和肝脏中均可检测到DHBV DNA。血清DHBV DNA水平第14天达到高峰,拷贝数为7.7×109mL-1,肝脏DHBV DNA第21天达到高峰,拷贝数达2.1×109mL-1,42 d内均维持较高的DHBV DNA水平。与模型组比较,3TC组鸭血清和肝脏DHBV DNA拷贝数明显降低(血清:F组间=17.625,F时间=68.141,F交互=134.517,P<0.001;肝脏:F组间=69.430,F时间=35.330,F交互=75.770,P<0.001)。3TC组鸭用药10 d后,血清和肝脏HBV DNA抑制率分别为86.5%和84.9%,但停药3 d后有轻度"反弹"现象。3TC组肝组织病变较模型组有明显改善。结论:河南樱桃谷鸭后天感染DHBV较敏感,病毒在体内增殖稳定,是DHBV感染的理想动物模型。 展开更多
关键词 樱桃谷鸭 鸭乙肝病毒 动物模型
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厚朴叶脱色及染色工艺的优化 被引量:4
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作者 郭香凤 史国安 +2 位作者 徐金龙 程建强 齐国亮 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期189-193,共5页
厚朴是中国的传统中药原材料,广泛用作食品包装材料。本实验以20%食盐腌制的厚朴叶为原料,对乙醇脱色和叶绿素铜钠盐复染的最佳工艺进行了研究。以脱色残液中的叶绿素含量为指标,通过单因素实验和正交实验得到最佳脱色工艺为:乙醇浓度80... 厚朴是中国的传统中药原材料,广泛用作食品包装材料。本实验以20%食盐腌制的厚朴叶为原料,对乙醇脱色和叶绿素铜钠盐复染的最佳工艺进行了研究。以脱色残液中的叶绿素含量为指标,通过单因素实验和正交实验得到最佳脱色工艺为:乙醇浓度80%、料液比1∶50 g/m L、脱色温度70℃、脱色时间3 h,此时厚朴叶转变为茶花色。以叶绿素铜钠盐的上染率为指标,通过单因素实验和正交实验得到最佳染色工艺为:叶绿素铜钠盐浓度4 g/L、料液比1∶5 g/m L、染色温度95℃、染色时间40 min,成功地将厚朴叶复染呈亮绿色。该工艺可应用于厚朴叶工业化生产。 展开更多
关键词 厚朴叶 脱色 染色 叶绿素铜钠盐
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国内丙型肝炎病毒抗体酶联免疫法试剂评价参考品体系的建立 被引量:4
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作者 牛小斌 王新明 +1 位作者 刘功成 李永伟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期761-764,共4页
目的建立国内丙型肝炎病毒抗体酶联免疫法(EIA)诊断试剂评价参考品。方法收集2009-03/2010-10期间来自全国不同省份4833份供血人员血清样品,用国产5种抗HCV EIA试剂和国外2种抗HCV EIA试剂分别进行初筛和复检;用Chiron的RIBA HCV 3.0 SI... 目的建立国内丙型肝炎病毒抗体酶联免疫法(EIA)诊断试剂评价参考品。方法收集2009-03/2010-10期间来自全国不同省份4833份供血人员血清样品,用国产5种抗HCV EIA试剂和国外2种抗HCV EIA试剂分别进行初筛和复检;用Chiron的RIBA HCV 3.0 SIA、Roche HCV定量试剂对筛选样品进行了确认试验,对确认阳性样品进行HCV基因型检测;选择不同强度的确认阳性、阴性样品、混合阳性系列稀释样品、部分特殊样品等建立抗HCV诊断试剂评价参考品。结果设立了抗HCV诊断试剂评价参考品,包含30份强、中、弱阳性的抗HCV混合阳性样品,10份单片段抗体阳性确认阳性样品,6份评价灵敏度系列稀释样品,30份抗HCV确认阴性样品。结论本研究设立的抗HCV评价参考品检测结果可靠,样品涵盖背景丰富,对新产品研发和筛选评价高质量的抗HCV诊断试剂有一定参考价值。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 EIA诊断试剂 抗HCV 评价参考品
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商品化酶联免疫HCV抗体诊断试剂盒性能评估 被引量:3
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作者 牛小斌 王新明 +1 位作者 刘功成 李永伟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期90-92,共3页
HCV抗体酶联免疫法诊断试剂目前已经发展到第3代,其灵敏度和特异性较1代和2代试剂均有很大改善,现广泛应用于血液制品、献血员的筛选和丙型肝炎病毒感染的辅助诊断。由于HCV感染者血液循环中存在针对HCV不同蛋白的抗体,且具体针对某... HCV抗体酶联免疫法诊断试剂目前已经发展到第3代,其灵敏度和特异性较1代和2代试剂均有很大改善,现广泛应用于血液制品、献血员的筛选和丙型肝炎病毒感染的辅助诊断。由于HCV感染者血液循环中存在针对HCV不同蛋白的抗体,且具体针对某种蛋白的抗体是否出现、出现的时间、持续时间长短均有所差异[1]。因此,ELISA测定HCV抗体时所使用的包被抗原必须全面,才能有效地检出所存在抗体,但在实际检验过程中由于不同的抗HCVELISA试剂盒生产厂家所使用HCV抗原的来源、质量及包被浓度不同,使得在检测中对同一份标本,尤其是对较弱阳性的样本或仅出现针对HCV单个蛋白成份的抗体样本,所测定的结果有时会出现很大的差异,所以对国内外不同厂家试剂盒性能水平进行评估具有很大意义。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 酶联免疫法 参考品 试剂盒
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猪BMP4基因原核表达及优化 被引量:1
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作者 周建设 李明 +3 位作者 陈其新 张驰 石晓卫 赵巧辉 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期24-28,64,共6页
构建猪BMP4基因pET32a-BMP4原核表达质粒,在E.coli中表达并分离纯化目的蛋白。采用PCR技术以pMD18-T-BMP4重组质粒为模板扩增获得BMP4基因编码成熟肽片段,并插入到原核表达载体pET32a中,构建原核表达重组质粒pET32a-BMP4。将阳性重组质... 构建猪BMP4基因pET32a-BMP4原核表达质粒,在E.coli中表达并分离纯化目的蛋白。采用PCR技术以pMD18-T-BMP4重组质粒为模板扩增获得BMP4基因编码成熟肽片段,并插入到原核表达载体pET32a中,构建原核表达重组质粒pET32a-BMP4。将阳性重组质粒转化到表达宿主菌中,在不同的温度、IPTG浓度和时间下进行诱导表达,SDS-PAGE分析鉴定。构建的重组表达质粒经PCR、酶切和DNA测序鉴定与预期的结果一致,表达宿主菌经IPTG诱导表达分子量约为31 ku的融合蛋白,表达产物占菌体总蛋白的30%以上。成功构建了pET32a-BMP4原核表达质粒,并经纯化得到BMP4目的蛋白,为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定基础。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白4 原核表达 条件
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应用PCR-DGGE指纹技术解析清香型大曲生产过程中酵母群落结构 被引量:15
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作者 兰玉倩 樊丹敏 +1 位作者 刘志磊 王德良 《中国酿造》 CAS 2012年第10期156-159,共4页
用PCR-DGGE指纹技术分析了清香型大曲在生产过程中酵母类微生物的演替规律。共检测到Issatchenkla、Pichia、Saccha-romyces、Glomeromycota、Saccharomycopsis、Geotrichum、Rhizopus等7个真菌分类属微生物。其中Issatchenkla orienta... 用PCR-DGGE指纹技术分析了清香型大曲在生产过程中酵母类微生物的演替规律。共检测到Issatchenkla、Pichia、Saccha-romyces、Glomeromycota、Saccharomycopsis、Geotrichum、Rhizopus等7个真菌分类属微生物。其中Issatchenkla orientalis在大曲整个生产过程中占绝对优势,Glomeromycota为不可培养微生物。 展开更多
关键词 清香型大曲 群落结构 DGGE 酵母
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荧光法研究免疫试验抗体包被过程
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作者 郑汀 渠海 付光宇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期306-307,共2页
目的:以荧光法作为定量和示踪手段,研究免疫试验中抗体在固相载体上包被的行为及意义。方法:以异硫氰酸荧光素(FITC)标记后的抗体包被固相载体,构建化学发光免疫分析(CLIA)体系。通过荧光光度计精确测定包被前后包被液中游离抗体的浓度... 目的:以荧光法作为定量和示踪手段,研究免疫试验中抗体在固相载体上包被的行为及意义。方法:以异硫氰酸荧光素(FITC)标记后的抗体包被固相载体,构建化学发光免疫分析(CLIA)体系。通过荧光光度计精确测定包被前后包被液中游离抗体的浓度,定量抗体的包被量,并研究其包被量对免疫反应的影响。结果:抗体包被量与CLIA发光值非线性相关;间接法较直接吸附法包被更有利于保持抗体活性;热处理后化学发光系统发光值降低与包被抗体脱落有关。结论:荧光法为构建有效CLIA体系提供了一种研究方法。 展开更多
关键词 荧光素 抗体 定量 热稳定 FITC 免疫吸附试验
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