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猪源致病性格氏乳球菌的分离鉴定及毒力基因分析
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作者 舒静超 张菡 +1 位作者 彭志锋 乔宏兴 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3399-3407,共9页
本研究旨在研究猪源格氏乳球菌的生物学特征、药物敏感性及致病性。从患病猪肝脏中分离到可疑细菌,并对分离的细菌进行革兰染色镜检、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定、16S rRNA基因序列测定及序列分析;通过药敏试... 本研究旨在研究猪源格氏乳球菌的生物学特征、药物敏感性及致病性。从患病猪肝脏中分离到可疑细菌,并对分离的细菌进行革兰染色镜检、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定、16S rRNA基因序列测定及序列分析;通过药敏试验和小鼠感染试验探究分离菌株的耐药性和致病性;通过PCR扩增筛选分离菌株相关毒力基因。结果显示:从患病猪肝脏中分离到1株产α-溶血环的阳性球菌;MALDI-TOF MS分析、16S rRNA基因测序及进化树分析均显示分离菌株为格氏乳球菌;小鼠感染试验显示,分离菌株对小鼠有较强的致死性,能引起小鼠肝、脾肿大,肠道、腹腔、胸腔严重充血;药敏试验结果显示,分离菌株对β-内酰胺类药物如青霉素G、氨苄西林,以及红霉素、林可霉素耐药,对其它抗生素均敏感;毒力基因检测结果显示,分离菌株含有黏附相关基因adhC1、psaA、eno以及lp1,含有溶血相关基因hly1、hly2、hly3,含有荚膜基因簇形成相关基因cgcC,含有外多糖相关基因epsA、epsB、epsC、epsD、epsL,以及其他毒力基因nadho、sod、pgm、chp。本试验分离的猪格氏乳球菌具有较强的致病性,因其属于人畜共患病原体,带来的潜在风险不可忽视,本研究为临床格氏乳球菌感染的防治提供数据参考。 展开更多
关键词 格氏乳球菌 16S rRNA 药敏试验 毒力基因
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鸭源海豚葡萄球菌A亚群的分离鉴定及药物敏感性分析
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作者 舒静超 张菡 +5 位作者 徐钱钱 张雨乐 赵盼盼 晋雅静 和小娥 彭志锋 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第2期130-136,共7页
为研究鸭源海豚葡萄球菌(S.delphini)的生物学特征、药物敏感性及致病性,本研究从病鸭肝脏中通过分离纯化、革兰染色镜检、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定、16S r RNA基因的PCR扩增与测序等方法进行细菌的分离鉴定... 为研究鸭源海豚葡萄球菌(S.delphini)的生物学特征、药物敏感性及致病性,本研究从病鸭肝脏中通过分离纯化、革兰染色镜检、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定、16S r RNA基因的PCR扩增与测序等方法进行细菌的分离鉴定;通过多重PCR鉴定分离菌株的亚群;分别通过k-B纸片法和雏鸭感染试验分析分离菌株的耐药性和致病性。结果显示,从患病鸭肝脏分离到产生β-溶血环的葡萄串状革兰阳性球菌;MALDI-TOF MS结果显示,分离菌株从蛋白水平上鉴定为S.delphini;16S r RNA基因的PCR扩增及序列进化树分析结果显示,扩增出1135 bp的目的条带,与S.delphini聚为一个进化分支,表明分离菌株从基因水平上鉴定为S.delphini;多重PCR鉴定结果显示,该菌为S.delphini A亚群;药敏试验结果显示,分离菌株对四环素类药物的多西环素、头孢菌素类药物的头孢吡肟、β-内酰胺类药物的青霉素G等敏感;对氨基糖苷类药物的大观霉素和庆大霉素、头孢菌素类药物的头孢唑林和头孢他啶等中介;对喹诺酮类药物的氧氟沙星、大环内酯类药物的红霉素、氯霉素类药物氟苯尼考等耐药,是典型的多重耐药菌。雏鸭感染试验结果显示,分离菌对雏鸭有一定的致死性,能引起其肝脏不同程度颜色变浅、出血及坏死点,腹腔含少量混浊、黄色浆液,膀胱有轻微化脓;本研究首次从鸭体内分离到S.delphini A亚群,该菌株对雏鸭有一定的致病性,且呈多重耐药,因此其带来的潜在风险不可忽视,本研究结果为该菌进一步的研究和防控其的感染提供参考。 展开更多
关键词 海豚葡萄球菌 PCR 16S rRNA 药敏试验
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荧光素酶生物发光法在快速药敏试验中的研究与应用 被引量:1
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作者 向杰 崔晓莉 +3 位作者 李璐一 周同喜 方娟 郑业焕 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1261-1266,共6页
目的通过荧光素酶生物发光法与微量肉汤稀释法对质控菌株和临床收集菌株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)进行测定,探讨荧光素酶生物发光法在病原微生物快速药物敏感性试验中的应用价值。方法以D-荧光素钠、Mg^(2+... 目的通过荧光素酶生物发光法与微量肉汤稀释法对质控菌株和临床收集菌株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)进行测定,探讨荧光素酶生物发光法在病原微生物快速药物敏感性试验中的应用价值。方法以D-荧光素钠、Mg^(2+)、O_(2)和待测菌株为荧光素酶催化反应底物,连续检测待测菌与抗生素孵育过程中相对光强度(relative light unit,RLU)变化,计算发光率并确定MIC,分析与微量肉汤稀释法的基本一致性(essential agreement,EA)和分类一致性(categorical agreement,CA)。结果荧光素酶生物发光法快速检测大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌等质控菌株MIC与微量肉汤稀释法检测MIC结果CA和EA值均为100%;并应用该检测体系对91株临床革兰阴性菌样本、93株革兰阳性菌样本进行MIC测定,革兰阴性菌检测结果中的6种药物EA和CA分别大于90%和84%,革兰阳性菌检测结果中的6种药物EA和CA分别大于90%和80%,并使检测周期由常规药敏实验的16~24 h缩短至5~6 h。结论荧光素酶生物发光法快速检测药敏结果与微量肉汤稀释法结果具有较高一致性,且更快速、敏感,可为今后的临床检验工作提供全新的快速药敏检测方法。 展开更多
关键词 荧光素酶 发光率 一致性 快速药敏
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鸭源马尿气球菌的鉴定及全基因组测序分析 被引量:3
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作者 张菡 舒静超 +4 位作者 张晓静 董青 彭志锋 边传周 乔宏兴 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期128-139,共12页
为鉴定一株鸭源分离菌,并探究其生物信息学特性,本研究分别通过Pacbio Sequel三代测序技术和Illumina NovaSeq二代测序技术对该株鸭源分离菌进行全基因组测序;基于该分离菌16S rRNA基因序列构建进化树;通过GTDB基于基因组之间的平均核... 为鉴定一株鸭源分离菌,并探究其生物信息学特性,本研究分别通过Pacbio Sequel三代测序技术和Illumina NovaSeq二代测序技术对该株鸭源分离菌进行全基因组测序;基于该分离菌16S rRNA基因序列构建进化树;通过GTDB基于基因组之间的平均核苷酸相似性及采用infer软件构建120个单拷贝基因序列进化树并对其分类;利用NR数据库比对分离菌全基因组蛋白编码基因序列;采用VFDB数据库分析该分离菌相关毒力基因;采用K-B纸片法测定分离菌对21种药物的药敏性试验;采用CARD数据库分析分离菌的耐药基因;利用GO、KEGG、COG数据库对分离菌进行基因功能、信号通路及基因的注释。测序结果显示分离菌由一个环形染色体和一个环形质粒组成,大小分别为2 133 811 bp和37 505 bp,GC含量分别为39.04%和35.03%;通过GTDB分类及NR数据库比对分析显示,该菌为马尿气球菌亚种;VFDB数据库比对发现6种致病毒力基因;药敏试验结果显示分离菌对红霉素、多西环素、庆大霉素、卡那霉素等多种药物耐药,CARD数据库比对发现6种耐药基因;基因功能分析显示,1 277个基因参与25类代谢通路,1 767个基因编码蛋白质,3 304个基因与分子功能相关,1 977个基因与细胞组分相关,4 421个基因与生物学过程相关。本研究对鸭源分离菌进行全基因组测序及基因组结构、功能分析,丰富了鸭源马尿气球菌全基因组数据库资料,完善了该菌的系统进化信息,分析了其毒力因子和相关耐药基因,为后续对该菌株分子生物学特征、致病性和耐药基因筛选提供了基因组信息和基因资源。 展开更多
关键词 马尿气球菌 全基因组序列 耐药性 致病性
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纳米银和乙烯利预处理调控伊藤牡丹‘巴茨拉’切花瓶插品质 被引量:6
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作者 史国安 王依 +4 位作者 史田 高双成 赵渊 尚申申 胡思源 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第9期79-89,共11页
【目的】分析‘巴茨拉’伊藤牡丹调控切花乙烯致衰的生理效应,以期为牡丹切花保鲜的调控技术提供理论依据。【方法】分别用外源20μg·L-1纳米银(NS)、5和20μL·L-1乙烯利(CEPA)预处理1 h,通过瓶插法观察‘巴茨拉’切花乙烯致... 【目的】分析‘巴茨拉’伊藤牡丹调控切花乙烯致衰的生理效应,以期为牡丹切花保鲜的调控技术提供理论依据。【方法】分别用外源20μg·L-1纳米银(NS)、5和20μL·L-1乙烯利(CEPA)预处理1 h,通过瓶插法观察‘巴茨拉’切花乙烯致衰的调控。利用气相色谱法测定花瓣乙烯释放的动态变化,称重法测定花枝水分状况,分光光度法测定膜脂过氧化水平,高效液相色谱法测定能量状态,结合主成分分析法解析‘巴茨拉’切花瓶插过程中乙烯代谢、脂质过氧化和能量状态各指标之间的关系。【结果】1)‘巴茨拉’切花吸水迅速,瓶插24 h达到盛开状态,瓶插寿命较短,仅有3~4天;纳米银预处理能够显著延长瓶插寿命改善切花瓶插品质,乙烯利加速切花的衰老进程,并且有显著的剂量效应。2)瓶插6 h有短暂的乙烯跃变特征,与对照相比,纳米银预处理乙烯释放峰值降低26.5%,而乙烯利显著促进乙烯释放,5和20μL·L^(-1)乙烯利预处理分别升高了19.0%和125.5%。3)‘巴茨拉’开放衰老是花枝水分失衡与膜脂过氧化加剧的过程,纳米银能够改善花枝的水分状况、抑制丙二醛含量升高和可溶性蛋白质含量降低,乙烯利作用与纳米银作用相反。4)纳米银能够促进呼吸底物转化与积累,提高呼吸代谢关键酶活性和能荷水平;乙烯利则降低呼吸底物含量、降低呼吸代谢关键酶活性和能荷水平。【结论】‘巴茨拉’牡丹切花是乙烯超敏感类型,切花开放和衰老进程受到内源乙烯和能量代谢的共同调控,控制乙烯生物合成与能量状态应成为改善‘巴茨拉’牡丹切花品质的基本策略。 展开更多
关键词 伊藤牡丹 ‘巴茨拉’ 切花 纳米银 乙烯利 衰老特征 代谢 调控效应
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纳米改性塑胶跑道研究 被引量:7
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作者 王新灵 渠海 +1 位作者 孙德梅 杨静 《塑料工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期39-42,共4页
随着运动员对体育用品的安全性能与舒适性要求的提高,由于纳米材料具有的特殊性能,使纳米材料广泛应用于体育领域。采用蒙脱土纳米改性聚氨酯弹性体材料和纳米二氧化硅(Si O2)改性聚氨酯弹性体材料,来克服传统的聚氨酯塑胶跑道中甲苯二... 随着运动员对体育用品的安全性能与舒适性要求的提高,由于纳米材料具有的特殊性能,使纳米材料广泛应用于体育领域。采用蒙脱土纳米改性聚氨酯弹性体材料和纳米二氧化硅(Si O2)改性聚氨酯弹性体材料,来克服传统的聚氨酯塑胶跑道中甲苯二异氰酸酯(TDI)有毒以及二苯基甲烷二异氰酸酯(MDI)常温下是固体,使用前必须加热熔化成液体,不利于其操作等缺点。 展开更多
关键词 纳米材料 塑胶跑道 聚氨酯弹性体
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磁力联轴器涡流损失的数值计算与试验 被引量:1
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作者 汪家琼 王凯 +3 位作者 孙静如 赵瑞杰 童凯 柏宇星 《排灌机械工程学报》 EI CSCD 北大核心 2020年第3期230-235,共6页
为研究转速、隔离套材料以及转角差对磁力联轴器涡流损失的影响规律,对圆筒型磁力联轴器进行稳态磁场数值计算.计算结果表明:涡流损失随转速的提高成倍增长,转速为3000 r/min时的涡流损失值约为500 r/min时的24倍;材料电导率不同,所制... 为研究转速、隔离套材料以及转角差对磁力联轴器涡流损失的影响规律,对圆筒型磁力联轴器进行稳态磁场数值计算.计算结果表明:涡流损失随转速的提高成倍增长,转速为3000 r/min时的涡流损失值约为500 r/min时的24倍;材料电导率不同,所制成的隔离套涡流损失也不同,钛板TP340电导率为304SS的1.65倍,其涡流损失为后者的1.61倍;在1个磁极周期内,转角差增大1°,涡流损失值约增大1%.对该磁转子进行试验测试,结果表明:在转速分别为3000,500 r/min条件下,304SS隔离套的涡流损失之比是23.0,而TP340隔离套的涡流损失之比为24.6;涡流损失随耦合长度减小而减小,且在高速下减小更多,耦合长度每减小10 mm,转速500 r/min时涡流损失值约下降3.6%,转速3000 r/min时涡流损失值约下降10%.对比数值计算与试验结果,其能量损失变化趋势较一致. 展开更多
关键词 磁力联轴器 涡流损失 磁场 数值模拟
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多黏菌素B药敏条在肠杆菌科药敏检测中应用研究 被引量:2
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作者 郑业焕 李轶 +1 位作者 金湘东 荆鹏伟 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2019年第11期1312-1315,共4页
目的使用微量稀释法和E-test法分析肠杆菌科细菌对多黏菌素B体外敏感性,评估E-test法多黏菌素B药敏条在临床药敏检测中的价值。方法收集了887株临床肠杆菌科细菌,同时采用E-test法和微量稀释法进行体外药敏试验,考察两种方法的一致性,... 目的使用微量稀释法和E-test法分析肠杆菌科细菌对多黏菌素B体外敏感性,评估E-test法多黏菌素B药敏条在临床药敏检测中的价值。方法收集了887株临床肠杆菌科细菌,同时采用E-test法和微量稀释法进行体外药敏试验,考察两种方法的一致性,针对不一致的进行复测,复测仍不一致者判为不一致,对两种检测方法进行统计学分析。结果887株菌的平行检测中,842株用药敏条和微量稀释法测定MIC值在|±1|个稀释倍数的范围内,有45株菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)值超出了此范围,复测有8株菌的MIC值回到了|±1|个稀释倍数的范围内,即纠正后的EA(essential agreement)%为95.94%(851/887)。肠杆菌科内按照种属分析,EA值最高的为沙门菌属的97.09%(100/103),EA最低的为其他属肠杆菌的94.03%(126/134),统计学分析,不同属间无显著性差异。结论多黏菌素B药敏条用于肠杆菌科细菌检测药敏检测所测定的MIC值判定结果准确可靠,与CLSI推荐的微量稀释法的符合率在94%以上,能满足临床和实验室药敏检测需求。 展开更多
关键词 E-TEST法 微量稀释法 一致率 肠杆菌
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两种商品化降钙素原定量检测试剂盒方法学比对 被引量:5
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作者 杨琴 张学东 张文星 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1527-1528,共2页
降钙素原(Procalcitonin,PCT)由位于11号染色体(11p15.4)上的Calc-I基因编码,通过选择性剪接(编码1~4外显子)生成Calc-ImRNA,转录后在甲状腺滤泡旁细胞粗面内质网翻译成降钙素原前体。裂解生成的PCT由116个氨基酸组成,相对分子质... 降钙素原(Procalcitonin,PCT)由位于11号染色体(11p15.4)上的Calc-I基因编码,通过选择性剪接(编码1~4外显子)生成Calc-ImRNA,转录后在甲状腺滤泡旁细胞粗面内质网翻译成降钙素原前体。裂解生成的PCT由116个氨基酸组成,相对分子质量为13 000[1,2]。它在细菌或真菌感染合并严重全身系统反应或器官低灌注时显著升高, 展开更多
关键词 降钙素原 粗面内质网 真菌感染 试剂盒方法 氨基酸组成 化学发光 进口试剂 选择性剪接 低灌注 相对分子质量
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打顶时期对万源雪茄茄衣叶片晾制的影响 被引量:3
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作者 鲁宇童 罗雯 +5 位作者 徐世晓 刘亮 张海枞 朱治忠 范文博 李文渊 《江西农业学报》 CAS 2023年第1期16-20,共5页
以川雪1号为试材,通过设置不同打顶时期的处理,研究了其对雪茄烟植株农艺性状的影响和雪茄烟叶晾制过程中色素含量的影响。结果表明:不同打顶时期处理对农艺性状的影响表现为:盛花时去顶芽>初花时去顶芽>现蕾时去顶芽;对川雪1号... 以川雪1号为试材,通过设置不同打顶时期的处理,研究了其对雪茄烟植株农艺性状的影响和雪茄烟叶晾制过程中色素含量的影响。结果表明:不同打顶时期处理对农艺性状的影响表现为:盛花时去顶芽>初花时去顶芽>现蕾时去顶芽;对川雪1号下部叶的变黄、变褐速率的影响表现为:盛花时去顶芽>初花时去顶芽>现蕾时去顶芽,并且烟叶在绿变黄的同时也进行着变褐的过程;在晾制过程中,叶绿素、类胡萝卜素含量依次为:现蕾时去顶芽>盛花时去顶芽>初花时去顶芽,色素降解曲线呈“S”形的慢—快—慢的降解规律。综合来看,初花开放时去顶芽处理的整体效果较好。 展开更多
关键词 雪茄烟 打顶时期 川雪1号 晾制 叶绿素 类胡萝卜素
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IL-6磁微粒化学发光定量检测方法的建立和评价 被引量:7
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作者 刘珂 李双法 +2 位作者 李奎 于林 程云龙 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期1988-1993,共6页
目的:建立并评价基于磁微粒化学发光免疫分析(CLIA)平台的IL-6定量检测方法。方法:以抗人IL-6抗体包被的磁微粒、待检血清及辣根过氧化物酶标记的IL-6抗体组成分析体系,基于CLIA平台,采用双抗体夹心模式,建立IL-6抗原定量检测方法,并对... 目的:建立并评价基于磁微粒化学发光免疫分析(CLIA)平台的IL-6定量检测方法。方法:以抗人IL-6抗体包被的磁微粒、待检血清及辣根过氧化物酶标记的IL-6抗体组成分析体系,基于CLIA平台,采用双抗体夹心模式,建立IL-6抗原定量检测方法,并对其进行条件优化和性能评价。结果:该方法的LoB、LoD、FS分别为0.5 pg/ml、2 pg/ml、2.5 pg/ml;分析内、分析间变异及总不精密度分别≤7%、≤10%、≤12%;线性范围为3~1000 pg/ml,最大稀释倍数为8倍;回收率在(100±15)%以内;标本中的血红蛋白、三酰甘油、胆红素浓度分别为200 mg/dl、2000 mg/dl、45 mg/dl时,其检测结果无显著影响;本研究与罗氏同时检测临床标本,其结果的拟合曲线回归方程为:Y=0.955X+9.263,R2=0.9932。结论:本研究建立的IL-6磁微粒化学发光定量检测方法性能良好,具有一定的临床意义,可满足临床检测IL-6水平的需要。 展开更多
关键词 白细胞介素6 磁微粒 化学发光 性能评估
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头孢洛林对革兰阳性菌敏感性研究
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作者 郑业焕 张影 +3 位作者 李轶 张艺 方娟 付光宇 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1267-1272,共6页
目的 通过头孢洛林对临床革兰阳性菌的体外敏感性研究,为临床头孢洛林合理使用提供参考。方法 收集了491株临床非苛养革兰阳性菌,同时采用自动化系统和微量稀释法对头孢洛林进行体外药敏试验,采用统计学方法对两种检测方法进行一致性研... 目的 通过头孢洛林对临床革兰阳性菌的体外敏感性研究,为临床头孢洛林合理使用提供参考。方法 收集了491株临床非苛养革兰阳性菌,同时采用自动化系统和微量稀释法对头孢洛林进行体外药敏试验,采用统计学方法对两种检测方法进行一致性研究,分析革兰阳性菌对头孢洛林体外敏感性。结果 491株革兰阳性菌最低抑菌浓度检测结果中,用自动化系统和微量肉汤稀释法测定的MIC值在±1个二倍稀释倍数范围内的有479株,超出此范围的有12株菌,即基本一致性(EA,Essential agreement)为97.56%(479/491)。针对有CLSI折点的金黄色葡萄球菌敏感性分析,211株用自动化系统和微量稀释法测定MIC值在±1个稀释倍数的范围内,有7株菌的MIC值超出了此范围,即EA为96.70%(205/212)。1株菌药敏解释出现差异,即分类一致性(CA,Category agreement)为99.53%(211/212)。此外,统计分析显示试剂盒检测金黄色葡萄球菌对头孢洛林的敏感率为96.70%(205/212),MRSA对头孢洛林的敏感率为95.95%(71/74)。结论 在自动化仪器药敏检测中,头孢洛林用于革兰阳性菌的药敏检测结果精准稳定,与微量肉汤稀释法的符合率达到97%以上,对MRSA的敏感率较高,一定程度上满足临床微生物实验室药敏检测需求。 展开更多
关键词 头孢洛林 革兰阳性菌 药敏 体外
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