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大黄素通过调控ROS/TXNIP/NLRP3轴介导的细胞焦亡途径减轻重症肺炎大鼠肺损伤 被引量：26
1
作者 王亚静 张静 +1 位作者 宋卫卫 高延秋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1240-1245,共6页
目的:探讨大黄素是否通过调控活性氧簇(ROS)/硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴减轻重症肺炎大鼠肺损伤。方法:SD大鼠随机分为对照组、模型组、大黄素(80 mg/kg)组、氧化三甲胺(TMAO;ROS特异... 目的:探讨大黄素是否通过调控活性氧簇(ROS)/硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴减轻重症肺炎大鼠肺损伤。方法:SD大鼠随机分为对照组、模型组、大黄素(80 mg/kg)组、氧化三甲胺(TMAO;ROS特异性激活剂;110 mg/kg)组及大黄素与TMAO合用组,每组8只,除对照组外,其余各组大鼠均通过气管滴入肺炎克雷伯杆菌液构建重症肺炎模型,模型构建成功后按照各治疗组给药剂量进行灌胃处理,连续2周。末次灌胃结束后24 h采集大鼠动脉血、肺泡灌洗液及肺组织,采用血气分析仪分析大鼠动脉血二氧化碳(CO_(2))含量、动脉CO_(2)分压(PaCO_(2))、动脉血氧饱和度(SaO_(2))和动脉氧分压(PaO_(2));ELISA法测定肺泡灌洗液中炎症因子(TNF-α、IL-6及IL-1β)水平并采用瑞氏染色计数其中炎症细胞;HE染色观察各组大鼠肺组织病理学变化;ROS检测试剂盒测定大鼠肺组织中ROS活性;Western blot检测大鼠肺组织中ROS/TXNIP/NLRP3通路相关蛋白的表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠肺组织损伤严重,PaCO_(2)、炎症因子水平、炎症细胞数量、ROS活性和ROS/TXNIP/NLRP3通路相关蛋白表达均显著升高(P<0.05),而CO_(2)含量、PaO_(2)和SaO_(2)则显著降低(P<0.05);与模型组相比,大黄素组大鼠肺损伤减轻,PaCO_(2)、炎症因子水平、炎症细胞数量、ROS活性和ROS/TXNIP/NL-RP3通路相关蛋白的表达均显著降低(P<0.05),而CO_(2)含量、PaO_(2)和SaO_(2)则显著升高(P<0.05);与大黄素组相比,大黄素与TMAO合用组大鼠肺组织损伤严重,PaCO_(2)、炎症因子水平、炎症细胞数量、ROS活性和ROS/TXNIP/NLRP3通路相关蛋白的表达均显著升高(P<0.05),CO_(2)含量、PaO_(2)和SaO_(2)则显著降低(P<0.05)。结论:大黄素可一定程度上减轻重症肺炎大鼠肺损伤,其机制可能与抑制ROS/TXNIP/NLRP3通路有关。 展开更多
关键词 大黄素 ROS/TXNIP/NLRP3信号通路 细胞焦亡 重症肺炎
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人环状RNA_0114428对脂多糖诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的作用及其机制 被引量：2
2
作者 王亚静 贾宝辉 +4 位作者 韩方方 韩迎东 赵兰兰 石莹 张华 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期101-109,共9页
目的:探讨人环状RNA_0114428(circ_0114428)对脂多糖(LPS)诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的作用,阐明circ_0114428通过调节微小RNA-139-5p(miR-139-5p)/转化生长因子β受体2(TGFBR2)轴改善HK-2细胞损伤的可能分子机制。方法:体外培养H... 目的:探讨人环状RNA_0114428(circ_0114428)对脂多糖(LPS)诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的作用,阐明circ_0114428通过调节微小RNA-139-5p(miR-139-5p)/转化生长因子β受体2(TGFBR2)轴改善HK-2细胞损伤的可能分子机制。方法:体外培养HK-2细胞,双荧光素酶报告基因实验验证miR-139-5p与circ_0114428和TGFBR2的靶向调控关系,CCK-8法筛选合适的LPS干预浓度和时间。给予10 mg·L^(-1) LPS干预12 h构建HK-2细胞损伤模型,HK-2细胞分为对照组、LPS组、LPS+circ_0114428沉默对照(LPS+si-NC)组、LPS+circ_0114428沉默(LPS+si-circ_0114428)组、LPS+circ_0114428沉默+miR-139-5p抑制剂对照(LPS+si-circ_0114428+in-NC)组和LPS+circ_0114428沉默+miR-139-5p抑制剂(LPS+si-circ_0114428+in-miR-139-5p)组,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中circ_0114428、miR-139-5p和TGFBR2 mRNA表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中TGFBR2、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL^(-1)β)水平。结果:双荧光素酶报告基因实验,miR-139-5p与circ_0114428和TGFBR2存在靶向调控关系(t=10.171,P<0.05;t=7.682,P<0.05)。CCK-8法检测LPS干预的最佳浓度为10 mg·L^(-1),最佳干预时间为12 h。与对照组比较,LPS组HK-2细胞中circ_0114428表达水平、TGFBR2 mRNA和蛋白表达水平、Bax蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞上清液中IL-6、TNF-α和IL^(-1)β水平均明显升高(P<0.05),miR-139-5p表达水平和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与LPS+si-NC组比较,LPS+si-circ_0114428组HK-2细胞中circ_0114428表达水平、TGFBR2 mRNA和蛋白表达水平、Bax蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞上清液中IL-6、TNF-α和IL^(-1)β水平均明显降低(P<0.05),miR-139-5p表达水平和Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与LPS+si-circ_0114428+in-NC组比较,LPS+si-circ_0114428+in-miR-139-5p组HK-2细胞中circ_0114428表达水平、TGFBR2 mRNA和蛋白表达水平、Bax蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞上清液中IL-6、TNF-α和IL^(-1)β水平均明显升高(P<0.05),miR-139-5p表达水平和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:circ_0114428能减轻LPS诱导的HK-2细胞损伤,其作用机制可能与调节miR-139-5p/TGFBR2轴有关。 展开更多
关键词 环状RNA_0114428 miR-139-5p 转化生长因子β受体2 脂多糖 人肾小管上皮细胞
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