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题名人反义VEGF基因对肾癌细胞VEGF表达的影响
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作者
潘周辉
陈昭典
杨太森
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机构
浙江大学附属第一医院泌尿外科
郑州大学附属第一医院泌尿外科
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出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第12期2392-2395,共4页
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文摘
目的:构建反义VEGF基因真核表达载体,研究其对肾癌细胞VEGF表达的影响。方法:克隆人 VEGF基因,将反义VEGF基因定向克隆于质粒PCDNA3.1(-)真核表达载体,酶切鉴定;转染入肾癌细胞,G418筛选阳性克隆。RT-PCR方法检测VEGFMRNA的表达,免疫组化法检测VEGF基因的蛋白表达,MTT法测细胞生长,流式细胞术检测细胞周期。结果:成功构建反义VEGF基因真核表达载体;反义VEGF组VEGFMRNA的表达受到抑制, 明显低于空载体组和对照组VEGFMRNA的表达,空载体组VEGFMRNA的表达没有受到影响;反义VEGF组的VEGF 蛋白表达明显低于空载体组和对照组,空载体组和对照组VEGF蛋白的表达无显著差异;反义VEGF组细胞生长减慢,G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少。结论:人反义VEGF基因可明显降低肾癌细胞VEGF基因在转录和翻译水平的表达,抑制肾癌细胞生长,为肾癌基因治疗提供一定的实验依据。
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关键词
内皮生长因子
肾肿瘤
基因表达
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Keywords
Endothelial growth factors
Kidney neoplasms
Gene expression
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分类号
R363
[医药卫生—病理学]
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