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正常宫颈上皮细胞原代培养体系的改良
被引量：
1
1
作者
李雅
荣守华
+3 位作者
智艳芳
樊婷婷
邱翠
李肖甫
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2017年第3期370-375,共6页
目的:探索一种高效、可重复的正常宫颈上皮细胞原代培养方法。方法:取60例正常宫颈组织,分成2组,分别采用Ⅱ型中性蛋白酶联合0.25 g/mL胰蛋白酶-EDTA(中性蛋白酶联合法)及Ⅰ型胶原酶消化分离后进行原代培养,比较两种分离效果;观察采用...
目的:探索一种高效、可重复的正常宫颈上皮细胞原代培养方法。方法:取60例正常宫颈组织,分成2组,分别采用Ⅱ型中性蛋白酶联合0.25 g/mL胰蛋白酶-EDTA(中性蛋白酶联合法)及Ⅰ型胶原酶消化分离后进行原代培养,比较两种分离效果;观察采用中性蛋白酶联合法消化不同时间对分离效果的影响。观察添加体积分数5%FBS dK-SFM培养基与单纯dK-SFM培养基培养原代宫颈上皮细胞的生长曲线差异,并用形态学、广谱角蛋白免疫细胞化学染色鉴定细胞来源。结果:正常宫颈上皮细胞原代培养总成功率为40%。中性蛋白酶联合法成功率、分离所得细胞密度、原代细胞融合时间及细胞纯度均高于Ⅰ型胶原酶消化法(P<0.05)。中性蛋白酶消化20 h的分离效果优于消化16和24 h(P<0.05)。体积分数5%FBS dK-SFM培养基原代培养的宫颈上皮细胞增殖活性高于单纯dK-SFM培养基(P<0.05)。细胞生长状况良好,可在体外传代至5~6代,并可冻存与复苏,免疫细胞化学染色显示广谱角蛋白表达阳性。结论:Ⅱ型中性蛋白酶联合0.25 g/mL胰蛋白酶-EDTA分离法和体积分数5%FBS dK-SFM培养基培养原代正常宫颈上皮细胞,高效、可重复性好。
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关键词
原代培养
宫颈上皮细胞
中性蛋白酶
角质细胞无血清培养基
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职称材料
HPV-16 L1甲基化和HPV E6/E7 mRNA检测宫颈病变的临床价值
被引量：
9
2
作者
李肖甫
邱翠
+3 位作者
智艳芳
李雅
荣守华
樊婷婷
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2016年第1期47-51,共5页
目的:探讨HPV-16 L1甲基化程度、HPV E6/E7 mRNA表达水平在检测宫颈病变中的临床价值。方法:选择50例HPV-16感染患者的宫颈脱落细胞学标本,其中CIN1 11例、CIN2 11例、CIN3 21例、宫颈鳞癌(SCC)7例,另取11例病理检测HPV-16阴性或慢性炎...
目的:探讨HPV-16 L1甲基化程度、HPV E6/E7 mRNA表达水平在检测宫颈病变中的临床价值。方法:选择50例HPV-16感染患者的宫颈脱落细胞学标本,其中CIN1 11例、CIN2 11例、CIN3 21例、宫颈鳞癌(SCC)7例,另取11例病理检测HPV-16阴性或慢性炎症者为对照。采用甲基化敏感性高分辨溶解曲线法检测HPV-16 L1甲基化水平,采用b DNA技术检测HPV E6/E7 mRNA的表达情况。结果:对照组、CIN1组、CIN2组、CIN3组和SCC组HPV-16 L1甲基化阳性率分别为9.1%、72.7%、81.8%、90.5%、100.0%,HPV E6/E7 mRNA阳性率分别为45.5%、72.7%、90.9%、100.0%、100.0%;CIN2以上病变中HPV-16 L1甲基化阳性率均高于对照组,而CIN3以上病变中HPV E6/E7 mRNA阳性率均高于对照组(P均<0.005)。HPV-16 L1甲基化程度和HPV E6/E7 mRNA水平均随宫颈病变严重程度的增加而升高(rS=0.638和0.525,P均<0.001);HPV-16 L1甲基化程度与HPV E6/E7mRNA表达水平呈正相关(rS=0.420,P=0.001)。结论:HPV-16 L1甲基化与HPV E6/E7 mRNA检测在分流HPV感染或细胞学阳性患者方面具有良好的临床应用前景。
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关键词
人乳头瘤病毒
宫颈病变
HPV-16
L1甲基化
HPV
E6/E7
mRNA
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职称材料
宫颈液基标本简易判读方法介绍
3
作者
李肖甫
李雁青
张琳琳
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期211-213,共3页
ThinPrep薄层制片作为一种液基细胞学技术因其涂片背景干净、细胞单层平铺,标本的满意率高而得到广泛运用[1]。然而,并非每一张液基制片都可获得满意效果。据报道,标本中黏液过多和血液量过多,可导致制片质量下降。
关键词
液基细胞学
血污染标本
处理
标准比色瓶
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职称材料
题名
正常宫颈上皮细胞原代培养体系的改良
被引量：
1
1
作者
李雅
荣守华
智艳芳
樊婷婷
邱翠
李肖甫
机构
郑州大学第三附属医院细胞室
出处
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2017年第3期370-375,共6页
基金
河南省医学科技攻关计划资助项目201503112
文摘
目的:探索一种高效、可重复的正常宫颈上皮细胞原代培养方法。方法:取60例正常宫颈组织,分成2组,分别采用Ⅱ型中性蛋白酶联合0.25 g/mL胰蛋白酶-EDTA(中性蛋白酶联合法)及Ⅰ型胶原酶消化分离后进行原代培养,比较两种分离效果;观察采用中性蛋白酶联合法消化不同时间对分离效果的影响。观察添加体积分数5%FBS dK-SFM培养基与单纯dK-SFM培养基培养原代宫颈上皮细胞的生长曲线差异,并用形态学、广谱角蛋白免疫细胞化学染色鉴定细胞来源。结果:正常宫颈上皮细胞原代培养总成功率为40%。中性蛋白酶联合法成功率、分离所得细胞密度、原代细胞融合时间及细胞纯度均高于Ⅰ型胶原酶消化法(P<0.05)。中性蛋白酶消化20 h的分离效果优于消化16和24 h(P<0.05)。体积分数5%FBS dK-SFM培养基原代培养的宫颈上皮细胞增殖活性高于单纯dK-SFM培养基(P<0.05)。细胞生长状况良好,可在体外传代至5~6代,并可冻存与复苏,免疫细胞化学染色显示广谱角蛋白表达阳性。结论:Ⅱ型中性蛋白酶联合0.25 g/mL胰蛋白酶-EDTA分离法和体积分数5%FBS dK-SFM培养基培养原代正常宫颈上皮细胞,高效、可重复性好。
关键词
原代培养
宫颈上皮细胞
中性蛋白酶
角质细胞无血清培养基
Keywords
primary culture
cervical epithelial cell
dispase
dK-SFM
分类号
R711.74 [医药卫生—妇产科学]
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职称材料
题名
HPV-16 L1甲基化和HPV E6/E7 mRNA检测宫颈病变的临床价值
被引量：
9
2
作者
李肖甫
邱翠
智艳芳
李雅
荣守华
樊婷婷
机构
郑州大学第三附属医院细胞室
出处
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2016年第1期47-51,共5页
基金
河南省科技厅基础科技攻关课题资助项目122300410036
文摘
目的:探讨HPV-16 L1甲基化程度、HPV E6/E7 mRNA表达水平在检测宫颈病变中的临床价值。方法:选择50例HPV-16感染患者的宫颈脱落细胞学标本,其中CIN1 11例、CIN2 11例、CIN3 21例、宫颈鳞癌(SCC)7例,另取11例病理检测HPV-16阴性或慢性炎症者为对照。采用甲基化敏感性高分辨溶解曲线法检测HPV-16 L1甲基化水平,采用b DNA技术检测HPV E6/E7 mRNA的表达情况。结果:对照组、CIN1组、CIN2组、CIN3组和SCC组HPV-16 L1甲基化阳性率分别为9.1%、72.7%、81.8%、90.5%、100.0%,HPV E6/E7 mRNA阳性率分别为45.5%、72.7%、90.9%、100.0%、100.0%;CIN2以上病变中HPV-16 L1甲基化阳性率均高于对照组,而CIN3以上病变中HPV E6/E7 mRNA阳性率均高于对照组(P均<0.005)。HPV-16 L1甲基化程度和HPV E6/E7 mRNA水平均随宫颈病变严重程度的增加而升高(rS=0.638和0.525,P均<0.001);HPV-16 L1甲基化程度与HPV E6/E7mRNA表达水平呈正相关(rS=0.420,P=0.001)。结论:HPV-16 L1甲基化与HPV E6/E7 mRNA检测在分流HPV感染或细胞学阳性患者方面具有良好的临床应用前景。
关键词
人乳头瘤病毒
宫颈病变
HPV-16
L1甲基化
HPV
E6/E7
mRNA
Keywords
human papillomavirus
cervical lesion
HPV-16 L1 methylation
HPV E6/E7 mRNA
分类号
R737.330.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
宫颈液基标本简易判读方法介绍
3
作者
李肖甫
李雁青
张琳琳
机构
郑州大学第三附属医院细胞室
出处
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期211-213,共3页
文摘
ThinPrep薄层制片作为一种液基细胞学技术因其涂片背景干净、细胞单层平铺,标本的满意率高而得到广泛运用[1]。然而,并非每一张液基制片都可获得满意效果。据报道,标本中黏液过多和血液量过多,可导致制片质量下降。
关键词
液基细胞学
血污染标本
处理
标准比色瓶
分类号
R711.74 [医药卫生—妇产科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
正常宫颈上皮细胞原代培养体系的改良
李雅
荣守华
智艳芳
樊婷婷
邱翠
李肖甫
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2017
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
HPV-16 L1甲基化和HPV E6/E7 mRNA检测宫颈病变的临床价值
李肖甫
邱翠
智艳芳
李雅
荣守华
樊婷婷
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2016
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
宫颈液基标本简易判读方法介绍
李肖甫
李雁青
张琳琳
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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