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DZNep对Eca109细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响被引量：2: 1; 作者王瑞莉李庆华 +6 位作者张彦婷毛丽红蒋海丽龚方华王静薛乐勋关方霞《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第4期449-452,共4页; 目的:探讨DZNep处理食管鳞状细胞癌Eca109细胞后对其增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法:DZNep处理Eca109细胞48 h,以DMSO处理48 h的Eca109细胞作为对照。采用EdU荧光显微镜法检测细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Transwell小室检... 展开更多; 关键词 DZNep ECA109细胞增殖凋亡迁移; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛋白酶体激活因子PA28α对Eca109和EC9706细胞细胞周期和凋亡的影响: 2; 作者蒋海丽张彦婷 +6 位作者石科韩康王瑞莉龚方华王静薛乐勋关方霞《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第4期445-449,共5页; 目的:探讨蛋白酶体激活因子PA28α对食管鳞癌细胞周期和凋亡的影响。方法:扩增PA28α的cDNA全长序列并连接到pCMV-Myc上,构建真核表达载体pCMV-Myc-PA28α,脂质体法转染食管鳞癌细胞系Eca109和EC9706,荧光显微镜观察PA28α蛋白在细胞中... 展开更多; 关键词 PA28α 食管鳞癌细胞细胞周期细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

Notch1-NICD胞内结构域真核表达载体的构建及其初步功能分析被引量：2: 3; 作者巩天晓刘红涛 +2 位作者鲁照明许培荣薛乐勋《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第3期468-472,共5页; 目的:构建包含Notch1胞内结构域的Notch1-NICD真核表达载体及绿色荧光蛋白载体并转染食管鳞状细胞癌细胞株EC9706及Eca109,并对Notch1-NICD1在食管鳞状细胞癌中的功能进行初步探索。方法:根据GenBank上的Notch1-NICD序列设计扩增引物,由... 展开更多; 关键词 Notch1信号途径食管鳞状细胞癌细胞细胞增殖真核表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

杜氏盐藻过氧化物酶1酵母双杂交诱饵质粒的构建: 4; 作者王静龚方华 +3 位作者张彦婷王瑞莉薛乐勋关方霞《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第4期469-472,共4页; 目的:构建杜氏盐藻过氧化物酶1(DsPrdx1)的酵母双杂交诱饵质粒并检测其对酵母细胞有无自激活及毒害作用。方法:PCR扩增DsPrdx1的开放阅读框,将扩增出的基因片段插入酵母表达质粒pGBKT7中构建诱饵质粒。经酶切鉴定正确后,用PEG/LiAc法将... 展开更多; 关键词杜氏盐藻酵母双杂交过氧化物酶1; 在线阅读下载PDF 职称材料

杜氏盐藻鞭毛内运输蛋白88在鞭毛组装过程中的功能分析及其原核表达: 5; 作者韩康石科 +4 位作者毛丽红李庆华龚方华蒋海丽薛乐勋《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第2期171-174,共4页; 目的:克隆杜氏盐藻鞭毛内运输蛋白(IFT)88的cDNA全长并分析其部分功能。方法:根据盐藻转录组测序片段,分别设计其3'端内、外侧引物及5'端内、外侧引物,PCR扩增其全长。提取盐藻再生过程中不同时间段的总RNA,逆转录后进行实时荧... 展开更多; 关键词杜氏盐藻鞭毛内运输蛋白88 鞭毛再生; 在线阅读下载PDF 职称材料

杜氏盐藻糖原合成酶激酶3cDNA片段的克隆及其在鞭毛再生中的功能: 6; 作者毛丽红李庆华 +3 位作者韩康王瑞莉龚方华薛乐勋《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第2期167-170,共4页; 目的:克隆杜氏盐藻糖原合成酶激酶3(GSK3)基因序列并探讨它在鞭毛再生中的作用。方法:根据杜氏盐藻转录组测序得到的GSK3的2个片段设计上下游引物,提取盐藻总RNA进行RT-PCR,以此为模板扩增2个片段之间的序列。采用3'RACE方法扩增杜... 展开更多; 关键词杜氏盐藻糖原合成酶激酶3 鞭毛再生; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名DZNep对Eca109细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响被引量：2: 1; 作者王瑞莉李庆华张彦婷毛丽红蒋海丽龚方华王静薛乐勋关方霞; 机构郑州大学生命科学学院郑州大学第一附属医院细胞生物学研究室; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第4期449-452,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目30700140 科技部国际科技合作基金资助项目2007DFA01240; 文摘目的:探讨DZNep处理食管鳞状细胞癌Eca109细胞后对其增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法:DZNep处理Eca109细胞48 h,以DMSO处理48 h的Eca109细胞作为对照。采用EdU荧光显微镜法检测细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Transwell小室检测细胞迁移数。结果:DZNep处理后的Eca109细胞增殖率为(34.60±4.45)%,低于对照组的(42.37±4.64)%(t=3.625,P=0.002);其细胞凋亡率为(16.27±3.70)%,高于对照组的(7.38±0.77)%(t=7.061,P<0.001);迁移到下室的细胞数为(179±38)个,较对照组的(494±99)个少(t=8.912,P<0.001)。结论:DZNep能够抑制Eca109细胞的增殖和迁移,促进其凋亡。; 关键词 DZNep ECA109细胞增殖凋亡迁移; Keywords DZNep Eca109 cell proliferation apoptosis migration; 分类号 R735.1 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛋白酶体激活因子PA28α对Eca109和EC9706细胞细胞周期和凋亡的影响: 2; 作者蒋海丽张彦婷石科韩康王瑞莉龚方华王静薛乐勋关方霞; 机构郑州大学生命科学学院郑州大学第一附属医院细胞生物学研究室; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第4期445-449,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目30700140 科技部国际科技合作基金资助项目2007DFA01240; 文摘目的:探讨蛋白酶体激活因子PA28α对食管鳞癌细胞周期和凋亡的影响。方法:扩增PA28α的cDNA全长序列并连接到pCMV-Myc上,构建真核表达载体pCMV-Myc-PA28α,脂质体法转染食管鳞癌细胞系Eca109和EC9706,荧光显微镜观察PA28α蛋白在细胞中的定位;Western blot法鉴定重组载体的表达;流式细胞仪检测PA28α在食管鳞癌EC9706细胞中过表达对其细胞周期和凋亡的影响。结果:转染了重组载体pCMV-Myc-PA28α的食管鳞癌Eca109和EC9706细胞中PA28α蛋白主要存在于细胞质。与空载体转染组(0.342±0.007)相比,pCMV-Myc-PA28α转染组(1.073±0.040)EC9706细胞中有较高的PA28α蛋白表达(F=984.411,P<0.001)。与空载体转染组(37.642±1.000)相比,pCMV-Myc-PA28α转染组(39.258±0.154)EC9706细胞处于S期细胞比例明显增高(F=24.592,P<0.001)。pCMV-Myc-PA28α转染组EC9706细胞的凋亡率(14.463%±0.634%)明显低于空载体转染组(43.893%±0.473%),差异有统计学意义(F=1 448.569,P<0.001)。结论:PA28α与食管鳞癌的凋亡有密切关系,可能成为治疗食管鳞癌的一个有效靶点。; 关键词 PA28α 食管鳞癌细胞细胞周期细胞凋亡; Keywords PA28α ESCC cell cycle cell apoptosis; 分类号 R735.1 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Notch1-NICD胞内结构域真核表达载体的构建及其初步功能分析被引量：2: 3; 作者巩天晓刘红涛鲁照明许培荣薛乐勋; 机构郑州大学第一附属医院细胞生物学研究室郑州大学第二附属医院肿瘤科郑州大学生物工程系细胞生物学研究室; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第3期468-472,共5页; 基金教育部“十五”“211工程”重点学科建设项目2002-2 河南省医学科技攻关计划项目20050009; 文摘目的:构建包含Notch1胞内结构域的Notch1-NICD真核表达载体及绿色荧光蛋白载体并转染食管鳞状细胞癌细胞株EC9706及Eca109,并对Notch1-NICD1在食管鳞状细胞癌中的功能进行初步探索。方法:根据GenBank上的Notch1-NICD序列设计扩增引物,由RT-PCR扩增NICD片段,测序鉴定,并通过Blast进行序列比对,然后回收目的片段并与真核表达载体pcDNA3.1(+)相连,构建Notch1-NICD真核表达载体pNotch1-NICD1,同时将扩增的NICD与pEGFP-C1载体相连构建绿色荧光蛋白表达载体pENotch1-NICD1,并转染EC9706及Eca109,观察Notch1在细胞中的定位及其途径的激活状态。同时将pNotch1-NICD1真核表达载体转染EC9706及Eca109,用MTT法分别在24h、48h、72h、96h及120h观察外源性Notch1片段的导入对EC9706及Eca109细胞增殖的影响。结果:通过RT-PCR获得1个Notch1胞内区片段,并成功构建了包含Notch1胞内区结构域的绿色荧光蛋白载体及真核表达载体。转染pENotch1-NICD1后,Notch1在胞质和胞核内均有表达,表明Notch1信号通路被激活。此外,MTT结果表明转染Notch1-NICD1片段的食管鳞状细胞癌细胞的增殖受到明显抑制(P<0.05)。结论:成功构建了Notch1绿色荧光蛋白表达载体及pcDNA3.1(+)真核表达载体。外源Notch1片段的引入能够明显抑制食管鳞状细胞癌细胞的增殖,提示Notch1基因有可能成为治疗食管鳞状细胞癌的一个潜在的分子靶点。; 关键词 Notch1信号途径食管鳞状细胞癌细胞细胞增殖真核表达载体; Keywords Notchl signaling pathway esophageal squamous cell carcinoma cell cell proliferation eukaryotic expression vector; 分类号 R735.1 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名杜氏盐藻过氧化物酶1酵母双杂交诱饵质粒的构建: 4; 作者王静龚方华张彦婷王瑞莉薛乐勋关方霞; 机构郑州大学生命科学学院郑州大学第一附属医院细胞生物学研究室; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第4期469-472,共4页; 基金科技部国际科技合作基金资助项目2007DFA01240 国家自然科学基金资助项目30700140; 文摘目的:构建杜氏盐藻过氧化物酶1(DsPrdx1)的酵母双杂交诱饵质粒并检测其对酵母细胞有无自激活及毒害作用。方法:PCR扩增DsPrdx1的开放阅读框,将扩增出的基因片段插入酵母表达质粒pGBKT7中构建诱饵质粒。经酶切鉴定正确后,用PEG/LiAc法将构建的诱饵质粒分别转化到酵母菌株Y187和AH109中,检测诱饵蛋白对酵母菌有无自激活和毒性作用。结果与结论:构建的酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-Prdx1对Y187和AH109既无自激活又无毒害作用,可用于酵母双杂交系统。; 关键词杜氏盐藻酵母双杂交过氧化物酶1; Keywords Dunaliella salina yeast two-hybrid peroxiredoxin 1; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名杜氏盐藻鞭毛内运输蛋白88在鞭毛组装过程中的功能分析及其原核表达: 5; 作者韩康石科毛丽红李庆华龚方华蒋海丽薛乐勋; 机构郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州大学第一附属医院细胞生物学研究室; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第2期171-174,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目30700140 科技部国际科技合作基金资助项目2007DFA01240; 文摘目的:克隆杜氏盐藻鞭毛内运输蛋白(IFT)88的cDNA全长并分析其部分功能。方法:根据盐藻转录组测序片段,分别设计其3'端内、外侧引物及5'端内、外侧引物,PCR扩增其全长。提取盐藻再生过程中不同时间段的总RNA,逆转录后进行实时荧光定量PCR,检测IFT88 mRNA的表达情况。随后利用ORF finder预测并扩增其开放阅读框,连接到pET28a载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),并在1mmol/LIPTG、37℃的条件下诱导4h,提取总蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测IFT88蛋白表达情况。结果:克隆拼接后共得到开放阅读框2400bp,编码799个氨基酸。BLAST显示该氨基酸序列与多个物种的IFT88有较高同源性。SDS-PAGE结果显示,与未诱导组相比,诱导组在90000左右有一条明显的条带。在鞭毛再生过程中,杜氏盐藻IFT88 mRNA的表达量在去鞭毛后30min左右时最高,随后快速下降。结论:扩增得到杜氏盐藻IFT88 cDNA序列且IFT88可能参与盐藻鞭毛组装。; 关键词杜氏盐藻鞭毛内运输蛋白88 鞭毛再生; Keywords Dunaliella salina intraflagellar transport protein 88 flagellar regeneration; 分类号 Q781 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名杜氏盐藻糖原合成酶激酶3cDNA片段的克隆及其在鞭毛再生中的功能: 6; 作者毛丽红李庆华韩康王瑞莉龚方华薛乐勋; 机构郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州大学第一附属医院细胞生物学研究室; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第2期167-170,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目30700140 科技部国际科技合作基金资助项目2007DFA01240; 文摘目的:克隆杜氏盐藻糖原合成酶激酶3(GSK3)基因序列并探讨它在鞭毛再生中的作用。方法:根据杜氏盐藻转录组测序得到的GSK3的2个片段设计上下游引物,提取盐藻总RNA进行RT-PCR,以此为模板扩增2个片段之间的序列。采用3'RACE方法扩增杜氏盐藻GSK3基因3'端序列,通过杜氏盐藻消减杂交模板扩增得到5'端序列。采用pH休克法去除杜氏盐藻鞭毛,通过实时荧光定量PCR观察鞭毛再生过程中GSK3基因在转录水平上的变化。结果:获得一段长为2116bp的GSK3 cDNA片段,其中包含737bp的3'UTR和1158bp的开放阅读框。实时荧光定量PCR结果表明,GSK3的mRNA转录水平在鞭毛再生过程中明显升高。结论:杜氏盐藻GSK3基因与鞭毛再生密切相关。; 关键词杜氏盐藻糖原合成酶激酶3 鞭毛再生; Keywords Dunaliella salina glycogen synthase kinase 3 flagellar regeneration; 分类号 Q781 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	DZNep对Eca109细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响	王瑞莉李庆华张彦婷毛丽红蒋海丽龚方华王静薛乐勋关方霞	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	蛋白酶体激活因子PA28α对Eca109和EC9706细胞细胞周期和凋亡的影响	蒋海丽张彦婷石科韩康王瑞莉龚方华王静薛乐勋关方霞	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	Notch1-NICD胞内结构域真核表达载体的构建及其初步功能分析	巩天晓刘红涛鲁照明许培荣薛乐勋	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	杜氏盐藻过氧化物酶1酵母双杂交诱饵质粒的构建	王静龚方华张彦婷王瑞莉薛乐勋关方霞	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	杜氏盐藻鞭毛内运输蛋白88在鞭毛组装过程中的功能分析及其原核表达	韩康石科毛丽红李庆华龚方华蒋海丽薛乐勋	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	杜氏盐藻糖原合成酶激酶3cDNA片段的克隆及其在鞭毛再生中的功能	毛丽红李庆华韩康王瑞莉龚方华薛乐勋	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料