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重症肌无力患者外周血单个核细胞Fas及血清sFas、TNFα检测被引量：3: 1; 作者胡军阮丽荣 +3 位作者张清勇李倩如杜英张国荣《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第1期4-6,共3页; 目的:探讨外周血淋巴细胞凋亡与重症肌无力(MG)发生的关系。方法: 收集 20例MG患者及 20例健康献血者的外周血,分离单个核细胞和血清,用流式细胞仪测定单个核细胞膜Fas,用双抗体夹心ELISA法测定血清中sFas、TNFα水平。结果:MG患者血清s... 展开更多; 关键词重症肌无力 SFAS FAS TNFΑ; 在线阅读下载PDF 职称材料

大鼠去细胞神经支架制备方法的改良被引量：3: 2; 作者高嵩涛邓展生 +3 位作者杜英张胜利郭晓柠李宝军《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第3期616-619,共4页; 目的:探讨去除大鼠周围神经中的细胞和髓鞘以取得去细胞神经支架的方法。方法:取15只SD大鼠的坐骨神经30条,随机分为3组(每组10条)。分别为正常神经组(A组),TritonX-200处理的化学去细胞组(B组),TritonX-200联合sulfobetaine-16(SB-16)... 展开更多; 关键词去细胞神经坐骨神经神经移植大鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

重症肌无力患儿胸腺细胞体外增殖和CD4、CD8、Fas测定被引量：2: 3; 作者王霞阮丽荣 +2 位作者张清勇杜英张国荣《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第1期9-11,共3页; 目的:探讨胸腺异常在儿童重症肌无力(MG)患者发病中的作用.方法:取临床确诊MG患儿手术切除的及24～38周流产胚胎胸腺组织(对照),分离胸腺细胞,MTT比色分析法观察胸腺细胞体外增殖情况;用流式细胞仪测定胸腺细胞表面膜CD4、CD8和Fas.结果... 展开更多; 关键词重症肌无力胸腺细胞 CD4 CD8 FAS 增殖; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源化抗肾小球基底膜抗体的单链抗体scFv3的原核表达及鉴定: 4; 作者肖静刘章锁 +2 位作者王雅楠赵国强王沛《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期50-53,共4页; 目的:在原核细胞中构建并表达抗肾小球基底膜(GBM)抗体单链抗体scFv3,并鉴定其活性。方法:用PCR扩增抗GBM抗体单链抗体scFv3基因,将scFv3 DNA与pGEM-T Easy质粒连接,构建克隆载体pGEM-scFv3。用酶切后电泳鉴定构建载体的正确性;测序检... 展开更多; 关键词抗GBM抗体单链抗体scFv3 原核表达鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

人磷脂磷酸水解酶3基因真核表达载体的构建及其对卵巢癌细胞生长的抑制作用: 5; 作者李留霞乔玉环 +6 位作者王淼郭瑞霞赵国强张孝艳周蔚张建好赵先兰《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第1期69-74,共6页; 目的:构建人磷脂磷酸水解酶3(hLPP3)基因的真核表达载体pLenExpress-hLPP3并转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,初步观察重组表达载体对卵巢癌细胞的转染效率、目的基因表达情况及对卵巢癌细胞生长的影响。方法:采用RT-PCR法从正常胎盘组织中提... 展开更多; 关键词人磷脂磷酸水解酶3 卵巢癌细胞系真核表达载体转染; 在线阅读下载PDF 职称材料

杜氏盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN 1622-CAT的构建: 6; 作者张汇征崔柳青 +1 位作者潘卫东薛乐勋《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第1期20-24,共5页; 目的:构建杜氏盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN1622-氯霉素乙酰转移酶(CAT)。方法:以光非依赖性的原叶绿素酸酯还原酶chlN基因为同源片段,以CAT抗性基因为选择标记,构建盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN1622-CAT,并通过电击法转入野生型盐藻细胞... 展开更多; 关键词杜氏盐藻叶绿体转化 chlN基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重症肌无力患者外周血单个核细胞Fas及血清sFas、TNFα检测被引量：3: 1; 作者胡军阮丽荣张清勇李倩如杜英张国荣; 机构郑州大学微生物学与免疫学教研室郑州大学第二附属医院普胸外科 Department of Neurology; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第1期4-6,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目 39970264 河南省 2002年度杰出青年科学基金资助项目 0212000100; 文摘目的:探讨外周血淋巴细胞凋亡与重症肌无力(MG)发生的关系。方法: 收集 20例MG患者及 20例健康献血者的外周血,分离单个核细胞和血清,用流式细胞仪测定单个核细胞膜Fas,用双抗体夹心ELISA法测定血清中sFas、TNFα水平。结果:MG患者血清sFas、TNFα水平较对照组高(P<0. 01);单个核细胞表面Fas分子的表达率低于对照组(P<0. 05)。结论:MG患者单个核细胞膜Fas分子和血清sFas、TNFα水平异常,可能与疾病的发生有关。; 关键词重症肌无力 SFAS FAS TNFΑ; Keywords myasthenia gravis soluble Fas Fas TNFα; 分类号 R746.1 [医药卫生—神经病学与精神病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大鼠去细胞神经支架制备方法的改良被引量：3: 2; 作者高嵩涛邓展生杜英张胜利郭晓柠李宝军; 机构河南省肿瘤医院骨科中南大学湘雅医院骨科郑州大学微生物学与免疫学教研室重庆市中山医院骨科中南大学湘雅二医院骨科; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第3期616-619,共4页; 文摘目的:探讨去除大鼠周围神经中的细胞和髓鞘以取得去细胞神经支架的方法。方法:取15只SD大鼠的坐骨神经30条,随机分为3组(每组10条)。分别为正常神经组(A组),TritonX-200处理的化学去细胞组(B组),TritonX-200联合sulfobetaine-16(SB-16)、sulfobetaine-10(SB-10)去细胞组(C组)。在光镜和电镜下观察各组神经组织的组织学结构,采用免疫组织化学SP法检测各组神经组织中S-100蛋白和层黏连蛋白(Laminin)的表达。结果:制备出的去细胞神经呈淡乳白色圆柱状外观,略透亮,其延展性较化学处理前略增加。B、C组神经经去细胞处理后,均去除了Schwann细胞、神经髓鞘和轴突,C组更好地保存了由Schwann细胞基底膜管以及外膜和束膜的细胞外基质构成的三维支架结构。结论:TritonX-200联合SB-16、SB-10改良化学方法处理可获得达到要求的去细胞神经支架。; 关键词去细胞神经坐骨神经神经移植大鼠; Keywords aeellular nerve sciatic nerve nerve graft rat; 分类号 R651.3 [医药卫生—外科学] R318.08 [医药卫生—生物医学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重症肌无力患儿胸腺细胞体外增殖和CD4、CD8、Fas测定被引量：2: 3; 作者王霞阮丽荣张清勇杜英张国荣; 机构河南省人民医院儿科郑州大学微生物学与免疫学教研室郑州大学第二附属医院普胸外科 Department of Neurology; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第1期9-11,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目39970264 河南省 2002年度杰出青年科学基金资助项目0212000100; 文摘目的:探讨胸腺异常在儿童重症肌无力(MG)患者发病中的作用.方法:取临床确诊MG患儿手术切除的及24～38周流产胚胎胸腺组织(对照),分离胸腺细胞,MTT比色分析法观察胸腺细胞体外增殖情况;用流式细胞仪测定胸腺细胞表面膜CD4、CD8和Fas.结果:与对照相比,MG患儿体外培养胸腺细胞增殖能力增强(P＜0.01),胸腺细胞CD4 CD8+细胞增多(P＜0.01),CD4+CD8+细胞减少(P＜0.01),CD4-CD8-、CD4+CD8-细胞数量无变化;CD4+Fas+、CD8+Fas+胸腺细胞均减少(P＜0.01).结论:MG患儿胸腺细胞存在增殖和膜分子表达的异常.; 关键词重症肌无力胸腺细胞 CD4 CD8 FAS 增殖; Keywords myasthenia gravis thymocyte CD4 CD8 Fas proliferation; 分类号 R746.1 [医药卫生—神经病学与精神病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源化抗肾小球基底膜抗体的单链抗体scFv3的原核表达及鉴定: 4; 作者肖静刘章锁王雅楠赵国强王沛; 机构郑州大学第一附属医院肾内科郑州大学微生物学与免疫学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期50-53,共4页; 基金国家卫生部资助项目(WKJ2007-2-033) 河南省医学科技攻关重大项目(200701006); 文摘目的:在原核细胞中构建并表达抗肾小球基底膜(GBM)抗体单链抗体scFv3,并鉴定其活性。方法:用PCR扩增抗GBM抗体单链抗体scFv3基因,将scFv3 DNA与pGEM-T Easy质粒连接,构建克隆载体pGEM-scFv3。用酶切后电泳鉴定构建载体的正确性;测序检测质粒重组后序列有无改变。再将scFv3亚克隆入表达载体pQE-80L,构建pQE80L-scFv3重组质粒,转化大肠杆菌Rosetta2,酶切鉴定。IPTG诱导表达蛋白后,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物的抗体活性。结果:PCR扩增scFv3 DNA片段约为750 bp,与预期结果相同;克隆载体pGEM-scFv3酶切后显示scFv3成功的克隆入pGEM-T Easy质粒;测序验证插入片段全序列无改变;表达载体pQE80L-scFv3酶切图谱与预期相同;SDS-PAGE显示,在分子量约为27 kD处可见目的蛋白带,Western blot证实scFv3能与抗GBM抗体结合。结论:成功构建并表达了抗GBM抗体的单链抗体scFv3蛋白,为进一步研究scFv3的生物学特性和基因工程抗体的制备奠定了基础。; 关键词抗GBM抗体单链抗体scFv3 原核表达鉴定; Keywords anti-GBM antibody scFv3 Prokaryotic expression Identification; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人磷脂磷酸水解酶3基因真核表达载体的构建及其对卵巢癌细胞生长的抑制作用: 5; 作者李留霞乔玉环王淼郭瑞霞赵国强张孝艳周蔚张建好赵先兰; 机构郑州大学第一附属医院妇产科厦门市妇幼保健院郑州大学微生物学与免疫学教研室; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第1期69-74,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目30571948; 文摘目的:构建人磷脂磷酸水解酶3(hLPP3)基因的真核表达载体pLenExpress-hLPP3并转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,初步观察重组表达载体对卵巢癌细胞的转染效率、目的基因表达情况及对卵巢癌细胞生长的影响。方法:采用RT-PCR法从正常胎盘组织中提取hLPP3基因,先克隆入克隆载体pGEM-T easy质粒得到pGEM-T-hLPP3,再用BamHⅠ和XhoⅠ进行双酶切,切下的hLPP3基因亚克隆入真核表达载体pLenExpress,得到pLenEx-press-hLPP3重组质粒,采用脂质体转染法转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞。实验分为3组:A组为实验组(转染表达hLPP3基因重组质粒)、B组为空质粒对照(转染空表达质粒)、C组为无转染对照。荧光显微镜观察细胞转染效率,实时荧光定量PCR法检测hLPP3 mRNA的表达,化学法测定转染前后细胞上清液中溶血磷脂酸(LPA)含量的变化,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况。结果:重组表达质粒经限制性酶切鉴定得到与hLPP3基因长度一致(936bp)的酶切产物,测序分析证实,目的基因序列与GenBank上登录的hLPP3基因(BC009196)序列完全一致。荧光显微镜下见A、B2组SKOV3细胞内有大量绿色荧光信号,转染率分别为67%和69%,C组细胞中无荧光信号。实时荧光定量PCR测定显示A组细胞中hLPP3 mRNA的相对表达量较B、C组明显增加(A、B、C组分别为0.5109±0.0584、0.1499±0.0255、0.1433±0.0181,P<0.05)。A组卵巢癌细胞上清液中的LPA含量较B、C组明显下降[A、B、C组分别为(2.37±0.76)μmol/L、(6.71±2.03)μmol/L、(6.84±1.49)μmol/L,P<0.05];流式细胞仪检测显示A组卵巢癌细胞凋亡率明显增加[A、B、C组分别为(30.50±2.12)%、(1.26±0.43)%、(0.10±0.03)%,P<0.05],细胞周期无明显变化。结论:成功构建了表达目的基因hLPP3的重组真核表达载体pLenEx-press-hLPP3,并能高效转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,使细胞中hLPP3基因表达水平明显升高。增强hLPP3基因表达可以降低细胞外LPA水平,诱导细胞凋亡,抑制卵巢癌细胞的生长。; 关键词人磷脂磷酸水解酶3 卵巢癌细胞系真核表达载体转染; Keywords human lipid phosphate phosphatase 3 gene ovarian cancer cell line eukaryotic expression vector transfection; 分类号 R737.31 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名杜氏盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN 1622-CAT的构建: 6; 作者张汇征崔柳青潘卫东薛乐勋; 机构郑州大学微生物学与免疫学教研室河南工业大学生物工程学院郑州大学生物工程系细胞生物学研究室; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第1期20-24,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目30300208 31000580; 文摘目的:构建杜氏盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN1622-氯霉素乙酰转移酶(CAT)。方法:以光非依赖性的原叶绿素酸酯还原酶chlN基因为同源片段,以CAT抗性基因为选择标记,构建盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN1622-CAT,并通过电击法转入野生型盐藻细胞,筛选转化藻株。结果:在氯霉素浓度为300mg/L的选择压力下,野生型盐藻10d左右死亡,转化藻仍正常生长,得到表达氯霉素抗性的盐藻转化株。结论:以chlN基因作为同源片段构建盐藻叶绿体转化载体是可行的。; 关键词杜氏盐藻叶绿体转化 chlN基因; Keywords Dunaliella salina chloroplast transformation chlN gene; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	重症肌无力患者外周血单个核细胞Fas及血清sFas、TNFα检测	胡军阮丽荣张清勇李倩如杜英张国荣	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	大鼠去细胞神经支架制备方法的改良	高嵩涛邓展生杜英张胜利郭晓柠李宝军	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2009	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	重症肌无力患儿胸腺细胞体外增殖和CD4、CD8、Fas测定	王霞阮丽荣张清勇杜英张国荣	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2005	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人源化抗肾小球基底膜抗体的单链抗体scFv3的原核表达及鉴定	肖静刘章锁王雅楠赵国强王沛	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人磷脂磷酸水解酶3基因真核表达载体的构建及其对卵巢癌细胞生长的抑制作用	李留霞乔玉环王淼郭瑞霞赵国强张孝艳周蔚张建好赵先兰	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	杜氏盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN 1622-CAT的构建	张汇征崔柳青潘卫东薛乐勋	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料