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转Gαq和Gαq/ACⅥ基因小鼠心脏电生理特性比较
1
作者 章茜 王书春 +3 位作者 乔鹏 何玉霞 董子明 Valeriy Timofeyev 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第3期551-553,共3页
目的利用转Gαq和Gαq/ACⅥ基因小鼠探讨心脏功能衰竭的细胞机制及病理生理学特性。方法采用全细胞膜片钳技术测定转Gαq、Gαq/ACⅥ基因和野生型小鼠左室心肌细胞动作电位持续时间(APD)、L-型钙电流(ICa,L)、一过性外向钾电流(Ito)的... 目的利用转Gαq和Gαq/ACⅥ基因小鼠探讨心脏功能衰竭的细胞机制及病理生理学特性。方法采用全细胞膜片钳技术测定转Gαq、Gαq/ACⅥ基因和野生型小鼠左室心肌细胞动作电位持续时间(APD)、L-型钙电流(ICa,L)、一过性外向钾电流(Ito)的变化。结果转Gαq小鼠心肌细胞APD50%和APD90%延长,Ito减小。转Gαq/ACⅥ小鼠上述指标有所改善。结论心脏直接过表达Gαq可导致左室功能衰竭,增加心肌ACⅥ表达可明显改善心脏功能。 展开更多
关键词 转基因小鼠 电生理 心脏功能衰竭
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心肌肥大和心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及Bax和Bcl-2的表达 被引量：28
2
作者 付春景 郭龙辉 +2 位作者 申琦 黄幼田 许燕 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第3期500-502,共3页
目的:探讨心肌肥大和心力衰竭(心衰)大鼠心肌细胞凋亡及Bax和Bcl-2蛋白表达的变化。方法:24只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(对照组)、心肌肥大组、心衰组,每组8只。心肌肥大组和心衰组均采用缩窄腹主动脉构建模型。假手术组和心肌肥... 目的:探讨心肌肥大和心力衰竭(心衰)大鼠心肌细胞凋亡及Bax和Bcl-2蛋白表达的变化。方法:24只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(对照组)、心肌肥大组、心衰组,每组8只。心肌肥大组和心衰组均采用缩窄腹主动脉构建模型。假手术组和心肌肥大组大鼠于第4周处死,心衰组大鼠于第12周处死。分别检测各组血流动力学和左室肥大指标,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测心肌Bcl2和Bax的表达。结果:心力衰竭组与心肌肥大组比较,左室收缩末压、左室舒张末压、心室内压变化最大速率差异均有统计学意义(P<0.01或0.05)。心衰组较心肌肥大组心肌细胞凋亡增加,Bax表达增加,Bcl-2表达减少(P<0.01)。结论:心肌细胞凋亡在心脏由心肌肥大向衰竭的转变过程中起着重要的作用,并与凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达改变有关。 展开更多
关键词 心肌肥大 心力衰竭 细胞凋亡 BAX Bcl-2
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牛膝多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞抗肿瘤能力的影响 被引量：21
3
作者 冯婷 赵明耀 +4 位作者 孙丽莎 李沛 马俊芬 黄幼田 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第3期359-362,共4页
目的:研究牛膝多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)抗肿瘤能力的影响。方法:正常小鼠骨髓来源单个核细胞通过粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)体外诱导生成DC,细胞培养第3天加入3种质量浓度的牛膝多糖(200、300和400mg... 目的:研究牛膝多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)抗肿瘤能力的影响。方法:正常小鼠骨髓来源单个核细胞通过粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)体外诱导生成DC,细胞培养第3天加入3种质量浓度的牛膝多糖(200、300和400mg/L),第5天负载EC9706细胞制备的冻融抗原,流式细胞术检测DC表面CD86和CD11a的表达和成熟情况。提取培养第8天的DC和T淋巴细胞再混合培养3d,流式细胞术检测T淋巴细胞的增殖分化情况及DC诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)对EC9706细胞的杀伤活性。以上均以生理盐水培养作为对照组,各组均设4个复孔。结果:与生理盐水组相比,低中剂量牛膝多糖在有异源性抗原负载的情况下能够促进小鼠骨髓来源DC的分化、成熟及表面标记CD86(F=9.788,P=0.012)、CD11a(F=10.220,P=0.016)的表达,增加DC致敏的T淋巴细胞增殖指数(F=9.807,P=0.012),DC诱导的CTL对EC9706细胞的杀伤活性增强(F=9.923,P=0.015),且在一定范围内存在量效关系。400mg/L的牛膝多糖可使这些方面的效应明显降低。结论:适当质量浓度的牛膝多糖能够提高DC的抗原递呈能力,进而提高DC的抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 牛膝多糖 树突状细胞 小鼠 抗肿瘤能力
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枸杞多糖对荷H22肝腹水瘤小鼠免疫功能的影响 被引量：14
4
作者 郝习 赵明耀 +3 位作者 杨红艳 黄幼田 郑智敏 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第2期242-245,共4页
目的:观察枸杞多糖(LBP)对荷H22肝腹水瘤小鼠免疫功能的影响。方法:昆明小鼠40只,分成4组(n=10),腹腔注射200μL的H22肝腹水瘤细胞(106mL-1),24h后分别以5、10或20mg/(kg·d)的LBP和等体积生理盐水灌胃,记录各组小鼠成瘤期和生存期... 目的:观察枸杞多糖(LBP)对荷H22肝腹水瘤小鼠免疫功能的影响。方法:昆明小鼠40只,分成4组(n=10),腹腔注射200μL的H22肝腹水瘤细胞(106mL-1),24h后分别以5、10或20mg/(kg·d)的LBP和等体积生理盐水灌胃,记录各组小鼠成瘤期和生存期。另取40只,随机分成4组(n=10),同上处理,连续喂养14d后处死小鼠,分别计算胸腺指数和脾指数;分离小鼠骨髓树突状细胞(DC),流式细胞术检测CD86、CD11a的表达,Westernblot检测白介素12(IL-12)P40的表达;诱导培养小鼠脾脏T淋巴细胞,MTT法检测分别以4组小鼠骨髓DC致敏的T淋巴细胞对H22肿瘤细胞的杀伤活性。结果:LBP可延缓荷瘤小鼠的成瘤期,延长其生存期(χ2=28.808和35.410,P均<0.001);提高其胸腺指数和脾指数(F=262.396和126.976,P均<0.001);使骨髓DCCD86、CD11a和IL-12P40的表达升高(F=3122.694,1469.946和252.590,P均<0.001);DC致敏的T淋巴细胞杀伤活性增强(F=122.539,P<0.001)。结论:LBP可以促进荷H22肝腹水瘤小鼠骨髓DC的成熟。 展开更多
关键词 枸杞多糖 树突状细胞 抗原提呈 肿瘤免疫 小鼠 H22肿瘤
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中国人群凝血酶原FⅡG20210A和FVLeiden的分布 被引量：14
5
作者 郑红 连建华 +4 位作者 贺颖 齐华 曾青成 Christopher Butt 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第1期102-104,共3页
目的:探讨FV Leiden(FVL)和FⅡG20210A在中国人群中的分布。方法:利用多重PCR和限制性片段长度多态性方法,检测了676例正常中国人和500例高加索正常人群的FVL和FⅡG20210A的分布情况。结果:中国人群中FVL和FⅡG20210A的分布频率和位点... 目的:探讨FV Leiden(FVL)和FⅡG20210A在中国人群中的分布。方法:利用多重PCR和限制性片段长度多态性方法,检测了676例正常中国人和500例高加索正常人群的FVL和FⅡG20210A的分布情况。结果:中国人群中FVL和FⅡG20210A的分布频率和位点频率均为0.15%和0.07%,其中FVL分布频率与高加索人群比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:FVL和FⅡG20210A在中国人群中分布频率极低,在血栓形成过程中的作用可能很小。 展开更多
关键词 FV LEIDEN FⅡ G20210A 血栓形成 病因学
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PTEN基因表达对EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响 被引量：13
6
作者 黄丽艳 王娜 +4 位作者 汤黎明 许燕 黄幼田 杨红艳 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第1期16-20,共5页
目的:观察PTEN基因表达水平的变化对食管癌EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响。方法:构建2个靶向PTEN的siRNA载体及1个PTEN表达载体,分别转染EC9706细胞。实验分沉默1组、沉默2组、siRNA载体对照组、PTEN表达组、表达载体对照组和... 目的:观察PTEN基因表达水平的变化对食管癌EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响。方法:构建2个靶向PTEN的siRNA载体及1个PTEN表达载体,分别转染EC9706细胞。实验分沉默1组、沉默2组、siRNA载体对照组、PTEN表达组、表达载体对照组和未转染组。RT-PCR、Westernblot法检测转染后各组细胞PTEN基因mRNA和蛋白表达水平。采用CCK-8试验、软琼脂克隆形成实验、流式细胞术和Transwell试验分别检测各组细胞增殖、克隆形成能力、细胞凋亡率及侵袭能力。结果:与未转染组比较,沉默1组、沉默2组PTENmRNA和蛋白表达量均降低,PTEN表达组PTENmRNA相对表达量升高(F=25.762,P<0.001);与未转染组比较,PTEN表达组细胞软琼脂克隆形成数和穿透细胞数均降低,细胞凋亡率增加(F=50.752、29.981、32.193,P均<0.001)。结论:上调PTEN的表达水平可以有效抑制EC9706细胞的增殖、克隆形成和侵袭转移能力,同时促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 PTEN EC9706 细胞增殖 细胞侵袭 凋亡 食管癌
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大鼠脑缺血再灌注损伤后兴奋性氨基酸、NOS和NO的含量变化 被引量：9
7
作者 崔景斌 王俊萍 +2 位作者 鄢文海 赵卫星 白浩 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2002年第2期169-171,共3页
目的 :通过测定大鼠脑缺血再灌注后兴奋性氨基酸 (EAA)、一氧化氮合酶 (NOS)和一氧化氮 (NO)含量的变化 ,探讨脑缺血再灌注损伤的发生机制。方法 :将动物分为假手术组和缺血 30min后再灌注组 ,通过高效液相色谱或分光光度法测定再灌注... 目的 :通过测定大鼠脑缺血再灌注后兴奋性氨基酸 (EAA)、一氧化氮合酶 (NOS)和一氧化氮 (NO)含量的变化 ,探讨脑缺血再灌注损伤的发生机制。方法 :将动物分为假手术组和缺血 30min后再灌注组 ,通过高效液相色谱或分光光度法测定再灌注后不同时间 (1h、6h、2 4h、4 8h和 72h)脑组织EAA、NOS和NO的含量。结果 :再灌注后 1hEAA水平较假手术组显著增高 ,以谷氨酸最为明显 ,随后逐渐下降 ,2 4h达正常水平。NOS和NO于再灌注后1h即升高 (P <0 .0 5 ) ,2 4h达最高水平 (P <0 .0 1) ,72h降至正常。结论 :脑缺血再灌注后EAA、NOS和NO含量发生变化 。 展开更多
关键词 再灌注损伤 兴奋性氨基酸 一氧化氮合酶 一氧化氮 大鼠 脑缺血
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8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响 被引量：8
8
作者 李士坤 郑乃刚 +2 位作者 吴景兰 白经修 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第5期663-666,共4页
目的 :探讨 8 Br cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca 10 9细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响。 方法 :将培养的Eca 10 9细胞分为 3组 :①加 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②加槲皮素组 (Q组 ) ;③不加任何药物对照组 (C组 )。同时培养 4 8h ,... 目的 :探讨 8 Br cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca 10 9细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响。 方法 :将培养的Eca 10 9细胞分为 3组 :①加 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②加槲皮素组 (Q组 ) ;③不加任何药物对照组 (C组 )。同时培养 4 8h ,将野生型DNApolβ的cDNA ,EGFRcDNA ,野生型 (wt)p5 3cDNA及c myccDNA分别制备了生物素 /地高辛标记的探针进行原位杂交和RNA斑点印迹阵列。另进行POLB ,XRCC1,VEGF及PCNA的免疫组化染色及免疫斑点印迹阵列。结果 :Br组和Q组的DNApolβ ,EGFR ,c myc基因表达下调而wtp5 3基因表达上调。POLB ,XRCC1,PCNA及VEGF免疫斑点印迹减弱。 8 Br cAMP及槲皮素显著下调Eca 10 9细胞的DNApolβ基因表达及相关癌基因表达 ,同时上调抑癌基因的表达。作为POLB的异二聚体XRCC1及恶性细胞生物标志的PCNA及VEGF表达下调。结论 :分化诱导剂下调Eca 10 9细胞DNApolβ基因表达 ,提示Eca 10 9细胞的polβ基因是高表达的 ;功能调整后的polβ通过相关基因表达的改变尤其是wtp5 展开更多
关键词 DNA聚合酶Β 基因表达 ECA-109细胞 8-BR-CAMP 槲皮素 食管鳞状上皮癌
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EC109细胞cDNA微矩阵基因芯片的建立及其方法学分析 被引量：7
9
作者 李沛 凌志强 +3 位作者 赵继敏 杨洪艳 黄幼田 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第2期272-274,共3页
目的建立食管癌EC109细胞cDNA微矩阵基因芯片,并对其可靠性进行验证。方法提取正常食管上皮细胞和EC109细胞的mRNA,逆转录得cDNA,再逆转录得cRNA,用Cy3-dUTP标记EC109细胞cRNA,用Cy5-dUTP标记正常食管上皮细胞cRNA,制备表达谱探针,利用... 目的建立食管癌EC109细胞cDNA微矩阵基因芯片,并对其可靠性进行验证。方法提取正常食管上皮细胞和EC109细胞的mRNA,逆转录得cDNA,再逆转录得cRNA,用Cy3-dUTP标记EC109细胞cRNA,用Cy5-dUTP标记正常食管上皮细胞cRNA,制备表达谱探针,利用该探针对EC109细胞与正常食管上皮细胞进行杂交。荧光扫描基因芯片,筛选表达谱。利用自身比较实验、重复实验和R2、一致率(CR)及假阳性率(FPR)等指标对该基因芯片系统进行方法学分析。结果该基因芯片系统2次实验结果的符合率达85%,R2=0.7329,CR=100%。该系统的FPR为0.45%,扩增样品与无扩增样品的基因表达谱表现出较好的吻合性。结论该芯片系统具有良好的稳定性、可靠性及低误差率等特点,可用于基因差异表达谱的分析。 展开更多
关键词 食管癌细胞 基因芯片 差异表达 基因表达谱 可靠性
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辣椒素对食管鳞状细胞癌细胞凋亡和NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响 被引量：7
10
作者 田芳 江亚南 +1 位作者 张晓艳 范天黎 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第4期437-440,共4页
目的:探讨辣椒素对食管鳞状细胞癌(食管鳞癌)细胞凋亡和NF-κB信号通路的影响。方法:采用Westernblot法检测食管鳞癌EC9706和Eca109细胞中IκBα、磷酸化IκBα(pIκBα)、p50和p65蛋白的表达及0、50、100和200μmol/L辣椒素作用后pIκ... 目的:探讨辣椒素对食管鳞状细胞癌(食管鳞癌)细胞凋亡和NF-κB信号通路的影响。方法:采用Westernblot法检测食管鳞癌EC9706和Eca109细胞中IκBα、磷酸化IκBα(pIκBα)、p50和p65蛋白的表达及0、50、100和200μmol/L辣椒素作用后pIκBα和Bcl-2蛋白的表达;凝胶滞留实验检测2种食管鳞癌细胞胞核中NF-κB与DNA的结合活性及0、100和200μmol/L辣椒素作用对NF-κB与DNA结合活性的影响。2种食管鳞癌细胞分别分为对照组、5-FU组、辣椒素组和联合组,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:2种食管鳞癌细胞胞质均表达IκBα和pIκBα蛋白,胞核均表达p50和p65蛋白;随辣椒素作用浓度的增加,pIκBα和Bcl-2蛋白的表达逐渐下降,NF-κB与DNA的结合活性也逐渐下降。辣椒素可促进2种食管鳞癌细胞的凋亡,与5-FU联合使用时,凋亡细胞显著增加(EC9706:F辣椒素=2535.497,F交互=113.034,P<0.001;Eca109:F辣椒素=5984.040,F交互=5.150,P<0.05)。结论:辣椒素可能通过抑制IκBα的磷酸化阻断NF-κB信号通路,促进食管鳞癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 辣椒素 NF-κB IΚBΑ Bcl-2 EC9706 ECA109
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siRNA阻断NF-κB信号通路对食管鳞癌细胞增殖、耐药的影响 被引量：8
11
作者 田芳 田卫红 +2 位作者 许培荣 刘红涛 薛乐勋 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第1期41-44,共4页
目的:通过RNA干扰(RNAi)阻断食管鳞癌细胞中NF-κB信号通路,研究其与肿瘤细胞增殖、耐药的关系。方法:使用NF-κB p65 siRNA分别转染人食管鳞癌Eca109和EC9706细胞72h,以未转染的Eca109和EC9706细胞为对照,采用Western blot检测p65蛋白... 目的:通过RNA干扰(RNAi)阻断食管鳞癌细胞中NF-κB信号通路,研究其与肿瘤细胞增殖、耐药的关系。方法:使用NF-κB p65 siRNA分别转染人食管鳞癌Eca109和EC9706细胞72h,以未转染的Eca109和EC9706细胞为对照,采用Western blot检测p65蛋白的表达;MTT法检测转染NF-κBp65siRNA24h、48h、72h后Eca109和EC9706细胞的增殖情况及转染同时联合应用不同质量浓度5-Fu(0mg/L,16.35mg/L,32.7mg/L,327mg/L,3270mg/L,6540mg/L)对Eca109和EC9706细胞增殖的影响。结果:①NF-κB亚单位p65在Eca109和EC9706细胞质中高表达,p65siRNA可有效阻断p65蛋白表达。②MTT实验表明,转染组细胞存活率较未转染组明显下降(P<0.05);与化疗药5-Fu联用,转染组和未转染组细胞的增殖活性随着5-Fu浓度的增加有下降趋势,但在同一浓度,转染p65siRNA的细胞与未转染组相比,细胞增殖活性明显下降(P<0.05)。结论:应用RNAi技术可有效干扰p65的表达,抑制食管鳞癌细胞的增殖,增强对化疗药5-Fu的敏感性。因此,可将阻断NF-κB信号通路作为基因治疗的靶点。 展开更多
关键词 食管肿瘤 NF-KAPPAB RNA干扰 SIRNA
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STI571及As_2O_3诱导K562细胞凋亡机制的研究 被引量：6
12
作者 付春景 李金龙 +3 位作者 黄幼田 申琦 郑智敏 宫亚欧 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1919-1920,1928,共3页
目的 :探讨比较STI5 71和As2 O3 诱导K5 6 2细胞凋亡及抑制其生长的可能机制 ,为进一步揭示慢性粒细胞白血病 (CML)的发病机制及STI5 71和As2 O3 的临床应用提供理论依据。方法 :采用细胞培养、台盼蓝染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、Westernb... 目的 :探讨比较STI5 71和As2 O3 诱导K5 6 2细胞凋亡及抑制其生长的可能机制 ,为进一步揭示慢性粒细胞白血病 (CML)的发病机制及STI5 71和As2 O3 的临床应用提供理论依据。方法 :采用细胞培养、台盼蓝染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、Westernblot等方法研究STI5 71和As2 O3 分别对K5 6 2细胞的生长抑制和诱导凋亡的作用 ,检测两种药物在诱导K5 6 2细胞凋亡的过程中某些凋亡相关蛋白的表达。结果 :STI5 71和As2 O3 均可抑制K5 6 2细胞的增殖、诱导其凋亡。两种药物均可下调Bcl-XL的表达 ,并裂解caspase - 3。As2 O3 作用浓度为 2 μmol/L时其下调Bcl-XL的作用与 1μmol/L时没有明显的差别 ,但是其裂解caspase - 3的作用较后者更加明显。 结论 :STI5 71作为凋亡诱导剂 ,可通过抑制Bcl-XL的表达从而激活caspase - 3,诱导K5 6 2细胞凋亡 ;As2 O3 诱导K5 6 2细胞凋亡过程中伴有caspase - 3的激活 。 展开更多
关键词 三氧化二砷 K562细胞 BCL-XL 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 细胞凋亡
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加热与紫杉醇联合应用对人舌癌Tca8113细胞增殖的影响 被引量：8
13
作者 吴皓 董子明 +3 位作者 张明五 王新朝 张文娟 吴逸明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第3期414-416,共3页
目的:探讨加热与紫杉醇联合应用对人舌癌Tca8113细胞增殖的影响,为临床热疗与紫杉醇化疗的联合应用提供依据。方法:将不同温度(39℃、41℃和43℃)及不同浓度紫杉醇(1.25μg/L、2.50μg/L、5.00μg/L、10.00μg/L和20.00μg/L)采用组内... 目的:探讨加热与紫杉醇联合应用对人舌癌Tca8113细胞增殖的影响,为临床热疗与紫杉醇化疗的联合应用提供依据。方法:将不同温度(39℃、41℃和43℃)及不同浓度紫杉醇(1.25μg/L、2.50μg/L、5.00μg/L、10.00μg/L和20.00μg/L)采用组内分组设计,共15个组,并设各浓度37℃对照组(5组)。在紫杉醇对人舌癌Tca8113细胞作用24h后加温40min,应用MTT比色分析法测定加热和紫杉醇联合应用对细胞增殖率的影响。结果:41℃组细胞增殖率与不同温度同剂量组比较,除与39℃1.25μg/L紫杉醇组比较差异无统计学意义外(P>0.05),与其余各组比较均降低,比较差异均有统计学意义(P<0.05或0.01);39℃和43℃10μg/L紫杉醇组细胞增殖率与37℃对照组比较均升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:41℃时各浓度紫杉醇对Tca8113细胞均有增殖抑制作用;39℃或43℃联合10μg/L紫杉醇时Tca8113细胞增殖能力最强。 展开更多
关键词 舌肿瘤 TCA8113细胞 紫杉醇 加热 细胞增殖
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小鼠骨髓树突状细胞pcDNA3-hCEA转染疫苗的抗瘤作用 被引量：4
14
作者 黄幼田 董子明 +6 位作者 赵明耀 杨洪艳 张义国 郑智敏 马俊芬 汤黎明 陈宁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1317-1323,共7页
目的 :将pcDNA3 -hCEA转染小鼠骨髓树突状细胞 (DCs) ,观察其诱导BALB/c小鼠对CT2 6(hCEA+ )的抗肿瘤免疫效应。方法 :采用rmGM -CSF和rmIL - 4体外诱导培养小鼠骨髓DCs;构建真核表达质粒pcDNA3 -hCEA ;并用lipofectamine将其转染DCs,制... 目的 :将pcDNA3 -hCEA转染小鼠骨髓树突状细胞 (DCs) ,观察其诱导BALB/c小鼠对CT2 6(hCEA+ )的抗肿瘤免疫效应。方法 :采用rmGM -CSF和rmIL - 4体外诱导培养小鼠骨髓DCs;构建真核表达质粒pcDNA3 -hCEA ;并用lipofectamine将其转染DCs,制备DCs(pCDNA3 -hCEA)疫苗 ;同时制备CT2 6(hCEA+ ) ;采用RT -PCR检测DCs(pCDNA3 -hCEA)中CEAmRNA的表达 ,采用放射免疫法检测DCs(pCDNA3 -hCEA)培养上清中CEA的含量 ;使用DCs(pCDNA3 -hCEA)疫苗体外诱导小鼠同种异体T淋巴细胞靶向性杀伤。采用DCs(pcDNA3 -hCEA)疫苗预防免疫BALB/c小鼠 ,观察其对于荷临界致瘤量CT2 6(hCEA+ )小鼠的抗肿瘤效应。结果 :经G41 8筛选 ,DCs(pCDNA3 -hCEA)有 1 4 %的获得率 ;RT -PCR检测表明DCs(pCDNA3 -hCEA)内CEAmRNA呈阳性表达 ;放射免疫法检测表明DCs(pCDNA3 -hCEA)能微量表达人CEA ;DCs(pCDNA3 -hCEA)能够有效诱导CEA靶向免疫杀伤。DCs(pcDNA3 -hCEA)疫苗延长荷CT2 6(hCEA+ )瘤小鼠生存期 1周至 4周。结论 :编码肿瘤抗原基因的真核表达质粒转染的树突状细胞 。 展开更多
关键词 小鼠 骨髓树突状细胞 pcDNA3-hCEA 癌胚抗原 肿瘤 免疫效应 真核表达质粒
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卵巢癌组织中EphA2受体蛋白的表达 被引量：9
15
作者 韩丽萍 董子明 +2 位作者 乔玉环 Jahn M.Nesland 索振河 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第2期308-311,共4页
目的:探讨卵巢癌组织中EphA2受体蛋白的表达及其评价预后的价值。方法:应用免疫组织化学法对 135例卵巢癌组织进行EphA2检测,对其中15例不同级别EphA2蛋白表达的冰冻组织标本,应用激光捕获显微切 割技术(LCM)捕获卵巢癌细胞,应用Wes... 目的:探讨卵巢癌组织中EphA2受体蛋白的表达及其评价预后的价值。方法:应用免疫组织化学法对 135例卵巢癌组织进行EphA2检测,对其中15例不同级别EphA2蛋白表达的冰冻组织标本,应用激光捕获显微切 割技术(LCM)捕获卵巢癌细胞,应用Western印迹分析方法检测其蛋白表达水平。结果:在135例卵巢癌组织中, EphA2蛋白阳性表达率为91.1%,分别为(-)12例(8.9%),(+)75例(55.6%),( )30例(22.2%),( )18例 (13.3%)。EphA2蛋白表达与卵巢癌患者的年龄、FIGO分期、组织学类型、组织分化程度以及残余肿瘤大小均无 关(P>0.05)。平均生存时间在EphA2蛋白染色强度-～+组与 ～ 组间差异有统计学意义(P<0.05),且 Western印迹结果与免疫组织化学结果一致。结论:EphA2蛋白高表达与卵巢癌患者生存差有关,具有潜在的预测 预后价值。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 EPHA2 激光捕获显微切割 WESTERN印迹
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AR、MMP-10和Bcl-2在非小细胞肺癌中的表达 被引量：11
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作者 刘源 王淑玲 古兆森 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期972-974,共3页
目的探讨AR、MMP-10和Bcl-2在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床意义。方法用免疫组织化学S-P法检测AR、MMP-10和Bcl-2在65例非小细胞肺癌及癌旁正常组织中的表达,并分析与临床病理特征的关系。结果 AR、MMP-10和Bcl-2在肺癌中的阳性... 目的探讨AR、MMP-10和Bcl-2在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床意义。方法用免疫组织化学S-P法检测AR、MMP-10和Bcl-2在65例非小细胞肺癌及癌旁正常组织中的表达,并分析与临床病理特征的关系。结果 AR、MMP-10和Bcl-2在肺癌中的阳性表达率分别是29.2%、70.8%、55.4%,显著高于癌旁正常肺组织(P<0.05)。AR的表达与临床分期和淋巴结转移有统计学意义(P<0.05),MMP-10的表达与分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05),Bcl-2在鳞癌中的表达显著高于腺癌(P<0.05)。结论 AR的阳性表达可能与淋巴结转移和进展相关,与MMP-10联合检测更能提示患者的预后。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 AR MMP-10 BCL-2
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合并肝转移的结直肠癌组织中VEGF和Survivin蛋白的表达 被引量：6
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作者 冯静 陈小兵 +4 位作者 赵明耀 董子明 罗素霞 曹新广 韩广森 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第2期207-209,共3页
目的:探讨合并肝转移的结直肠癌组织中VEGF和Survivin蛋白的表达情况。方法:采用免疫组织化学法检测80例结直肠癌(腺癌50例,有肝转移者24例,无肝转移者26例;黏液腺癌30例,有肝转移者14例,无肝转移者16例)组织中VEGF与Survivin蛋白的表... 目的:探讨合并肝转移的结直肠癌组织中VEGF和Survivin蛋白的表达情况。方法:采用免疫组织化学法检测80例结直肠癌(腺癌50例,有肝转移者24例,无肝转移者26例;黏液腺癌30例,有肝转移者14例,无肝转移者16例)组织中VEGF与Survivin蛋白的表达。结果:结直肠癌腺癌和黏液腺癌组织中有肝转移组VEGF和Sur-vivin的阳性表达率(VEGF:79.2%和85.7%;Survivin:83.3%和92.9%)分别高于无肝转移组(VEGF:34.6%和25.0%;Survivin:38.5%和31.3%,χ2=10.053,11.059,10.470和11.808,P<0.05)。结直肠癌组织中VEGF与Survivin的阳性表达率呈正关联(rP=0.323,P<0.001)。结论:VEGF和Survivin的表达与结直肠癌肝转移的发生有密切关系,联合检测2者可用于判断结直肠癌的恶性程度和预后。 展开更多
关键词 VEGF SURVIVIN 结直肠癌 肝转移
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人喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达 被引量：6
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作者 桑建中 田芳 +2 位作者 娄卫华 金红军 袁林林 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第4期572-574,共3页
目的:检测人喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达。方法:采用免疫组化法检测80例喉鳞状细胞癌和30例声带息肉组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达,分析两蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者临床病理特征的关系及二者表达的关联性。结果... 目的:检测人喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达。方法:采用免疫组化法检测80例喉鳞状细胞癌和30例声带息肉组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达,分析两蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者临床病理特征的关系及二者表达的关联性。结果:喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白的阳性表达率分别为67.5%和52.5%,声带息肉组织中未见阳性表达,2组相比差异有统计学意义(P<0.001)。c-myc蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者的临床分期、分化程度、淋巴结转移及5a生存率均有关(χ2=4.268、6.419、5.673和6.180,P<0.05)。喉鳞状细胞癌组织中二者的表达呈正关联(rP=0.241,P=0.026)。结论:喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白呈高表达,二者可能在喉鳞状细胞癌的发生中起协同作用。 展开更多
关键词 喉鳞状细胞癌 C-MYC CYCLIND1 细胞周期
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负载人HUVECs抗原的DC疫苗诱导小鼠对宫颈癌U14的特异性免疫反应 被引量：5
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作者 赵军 翟景明 +5 位作者 路静 杨洪艳 黄幼田 李珊 董子明 张曦 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期196-200,共5页
目的:探讨负载人脐静脉内皮细胞(HUVEC)抗原的DC疫苗诱导小鼠对宫颈癌U14的特异性免疫反应。方法:原代培养和鉴定人HUVECs,制备抗原,负载树突状细胞(DC),免疫小鼠,免疫结束后1周小鼠皮下注射小鼠宫颈癌U14细胞,观察肿瘤生长大小、检测... 目的:探讨负载人脐静脉内皮细胞(HUVEC)抗原的DC疫苗诱导小鼠对宫颈癌U14的特异性免疫反应。方法:原代培养和鉴定人HUVECs,制备抗原,负载树突状细胞(DC),免疫小鼠,免疫结束后1周小鼠皮下注射小鼠宫颈癌U14细胞,观察肿瘤生长大小、检测免疫后小鼠脾细胞体外CTL效应、表面CD3+CD8+百分率和血清抗体滴度,通过细胞免疫组化和Western blot血清特异性反应分析。结果:经免疫组化鉴定成功培养出纯度高的HUVECs,抗原负载DC并注射BALB/c小鼠后,PBS组肿瘤生长最快,DC组和HUVEC-DC组肿瘤也有生长,但生长较慢,在2周后HUVEC-DC组肿瘤消失,3周后DC组肿瘤消失。小鼠脾细胞体外CTL结果显示HUVEC-DC组有明显的特异性杀伤HUVEC的作用。CD3+CD8+百分比提示HUVEC-DC组细胞毒性T细胞比例较其他两组高。小鼠血清抗体滴度示有抗体产生,免疫组化检测示组与HUVEC有特异性抗原抗体反应,Western blot显示在相对分子质量(Mr)130000和220000处有特异性条带。结论:负载人HUVECs抗原的DC疫苗和DC疫苗对小鼠宫颈癌U14有抑制作用,HUVEC-DC疫苗诱导了小鼠的细胞和体液免疫,并诱导了针对HUVECs细胞中的某些抗原的应答,这些抗原可能是整合素αν和VEGF-R2。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞抗原 树突状细胞 小鼠宫颈癌 特异性免疫反应
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外周血T淋巴细胞的培养、纯化及鉴定 被引量：8
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作者 李付广 李沛 +1 位作者 靳静 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第4期605-607,共3页
目的:建立外周血T淋巴细胞初步纯化方法。方法:取健康人外周血单个核细胞(PBMCs),在低剂量IL2维持下,利用细胞培养淘汰法筛选纯化T淋巴细胞,用流式细胞术检测淋巴细胞培养过程中细胞表面标志的改变。结果:用流式细胞术检测发现:B淋巴细... 目的:建立外周血T淋巴细胞初步纯化方法。方法:取健康人外周血单个核细胞(PBMCs),在低剂量IL2维持下,利用细胞培养淘汰法筛选纯化T淋巴细胞,用流式细胞术检测淋巴细胞培养过程中细胞表面标志的改变。结果:用流式细胞术检测发现:B淋巴细胞于第1周时基本死亡,第3周时完全消失;NK细胞于第1周时明显增加,第4周时大部分死亡;第4周时,所培养的细胞绝大多数为T淋巴细胞。T淋巴细胞亚群的整体变化趋势为:随着培养时间的延长,CD4+百分数稍增加,CD8+百分数明显增加,CD4+/CD8+比值明显降低,CD3+CD16+CD56+百分数明显增加。结论:在IL2维持下,人PBMCs培养4周时,收获培养细胞为初步纯化的T淋巴细胞。 展开更多
关键词 T淋巴细胞 流式细胞术 细胞培养 纯化
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