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郑州地区健康体检人群高尿酸血症发病情况调查 被引量：12
1
作者 张建明 姚丽娜 +1 位作者 李红 王书春 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第1期174-175,共2页
目的:了解郑州地区健康体检人群高尿酸血症的发病率及其相关因素。方法:对2005年5月至7月在本院进行健康体检的3156名河南省直机关干部的血尿酸结果进行统计学分析。结果:高尿酸血症的患病率为10.65%,男性高尿酸血症的患病率为12.51%,... 目的:了解郑州地区健康体检人群高尿酸血症的发病率及其相关因素。方法:对2005年5月至7月在本院进行健康体检的3156名河南省直机关干部的血尿酸结果进行统计学分析。结果:高尿酸血症的患病率为10.65%,男性高尿酸血症的患病率为12.51%,高于女性(3.73%)(P<0.05);高尿酸血症的患病率与年龄无相关性(P>0.05);高尿酸血症的患病率与体质量指数正相关(P<0.05)。结论:郑州地区健康体检人群高尿酸血症的发病率存在明显的性别差异;肥胖与高尿酸血症的发生密切相关。 展开更多
关键词 高尿酸血症 肥胖 郑州地区
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转Gαq和Gαq/ACⅥ基因小鼠心脏电生理特性比较
2
作者 章茜 王书春 +3 位作者 乔鹏 何玉霞 董子明 Valeriy Timofeyev 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第3期551-553,共3页
目的利用转Gαq和Gαq/ACⅥ基因小鼠探讨心脏功能衰竭的细胞机制及病理生理学特性。方法采用全细胞膜片钳技术测定转Gαq、Gαq/ACⅥ基因和野生型小鼠左室心肌细胞动作电位持续时间(APD)、L-型钙电流(ICa,L)、一过性外向钾电流(Ito)的... 目的利用转Gαq和Gαq/ACⅥ基因小鼠探讨心脏功能衰竭的细胞机制及病理生理学特性。方法采用全细胞膜片钳技术测定转Gαq、Gαq/ACⅥ基因和野生型小鼠左室心肌细胞动作电位持续时间(APD)、L-型钙电流(ICa,L)、一过性外向钾电流(Ito)的变化。结果转Gαq小鼠心肌细胞APD50%和APD90%延长,Ito减小。转Gαq/ACⅥ小鼠上述指标有所改善。结论心脏直接过表达Gαq可导致左室功能衰竭,增加心肌ACⅥ表达可明显改善心脏功能。 展开更多
关键词 转基因小鼠 电生理 心脏功能衰竭
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牛膝多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞抗肿瘤能力的影响 被引量：21
3
作者 冯婷 赵明耀 +4 位作者 孙丽莎 李沛 马俊芬 黄幼田 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第3期359-362,共4页
目的:研究牛膝多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)抗肿瘤能力的影响。方法:正常小鼠骨髓来源单个核细胞通过粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)体外诱导生成DC,细胞培养第3天加入3种质量浓度的牛膝多糖(200、300和400mg... 目的:研究牛膝多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)抗肿瘤能力的影响。方法:正常小鼠骨髓来源单个核细胞通过粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)体外诱导生成DC,细胞培养第3天加入3种质量浓度的牛膝多糖(200、300和400mg/L),第5天负载EC9706细胞制备的冻融抗原,流式细胞术检测DC表面CD86和CD11a的表达和成熟情况。提取培养第8天的DC和T淋巴细胞再混合培养3d,流式细胞术检测T淋巴细胞的增殖分化情况及DC诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)对EC9706细胞的杀伤活性。以上均以生理盐水培养作为对照组,各组均设4个复孔。结果:与生理盐水组相比,低中剂量牛膝多糖在有异源性抗原负载的情况下能够促进小鼠骨髓来源DC的分化、成熟及表面标记CD86(F=9.788,P=0.012)、CD11a(F=10.220,P=0.016)的表达,增加DC致敏的T淋巴细胞增殖指数(F=9.807,P=0.012),DC诱导的CTL对EC9706细胞的杀伤活性增强(F=9.923,P=0.015),且在一定范围内存在量效关系。400mg/L的牛膝多糖可使这些方面的效应明显降低。结论:适当质量浓度的牛膝多糖能够提高DC的抗原递呈能力,进而提高DC的抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 牛膝多糖 树突状细胞 小鼠 抗肿瘤能力
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心肌肥大和心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及Bax和Bcl-2的表达 被引量：28
4
作者 付春景 郭龙辉 +2 位作者 申琦 黄幼田 许燕 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第3期500-502,共3页
目的:探讨心肌肥大和心力衰竭(心衰)大鼠心肌细胞凋亡及Bax和Bcl-2蛋白表达的变化。方法:24只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(对照组)、心肌肥大组、心衰组,每组8只。心肌肥大组和心衰组均采用缩窄腹主动脉构建模型。假手术组和心肌肥... 目的:探讨心肌肥大和心力衰竭(心衰)大鼠心肌细胞凋亡及Bax和Bcl-2蛋白表达的变化。方法:24只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(对照组)、心肌肥大组、心衰组,每组8只。心肌肥大组和心衰组均采用缩窄腹主动脉构建模型。假手术组和心肌肥大组大鼠于第4周处死,心衰组大鼠于第12周处死。分别检测各组血流动力学和左室肥大指标,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测心肌Bcl2和Bax的表达。结果:心力衰竭组与心肌肥大组比较,左室收缩末压、左室舒张末压、心室内压变化最大速率差异均有统计学意义(P<0.01或0.05)。心衰组较心肌肥大组心肌细胞凋亡增加,Bax表达增加,Bcl-2表达减少(P<0.01)。结论:心肌细胞凋亡在心脏由心肌肥大向衰竭的转变过程中起着重要的作用,并与凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达改变有关。 展开更多
关键词 心肌肥大 心力衰竭 细胞凋亡 BAX Bcl-2
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枸杞多糖对荷H22肝腹水瘤小鼠免疫功能的影响 被引量：14
5
作者 郝习 赵明耀 +3 位作者 杨红艳 黄幼田 郑智敏 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第2期242-245,共4页
目的:观察枸杞多糖(LBP)对荷H22肝腹水瘤小鼠免疫功能的影响。方法:昆明小鼠40只,分成4组(n=10),腹腔注射200μL的H22肝腹水瘤细胞(106mL-1),24h后分别以5、10或20mg/(kg·d)的LBP和等体积生理盐水灌胃,记录各组小鼠成瘤期和生存期... 目的:观察枸杞多糖(LBP)对荷H22肝腹水瘤小鼠免疫功能的影响。方法:昆明小鼠40只,分成4组(n=10),腹腔注射200μL的H22肝腹水瘤细胞(106mL-1),24h后分别以5、10或20mg/(kg·d)的LBP和等体积生理盐水灌胃,记录各组小鼠成瘤期和生存期。另取40只,随机分成4组(n=10),同上处理,连续喂养14d后处死小鼠,分别计算胸腺指数和脾指数;分离小鼠骨髓树突状细胞(DC),流式细胞术检测CD86、CD11a的表达,Westernblot检测白介素12(IL-12)P40的表达;诱导培养小鼠脾脏T淋巴细胞,MTT法检测分别以4组小鼠骨髓DC致敏的T淋巴细胞对H22肿瘤细胞的杀伤活性。结果:LBP可延缓荷瘤小鼠的成瘤期,延长其生存期(χ2=28.808和35.410,P均<0.001);提高其胸腺指数和脾指数(F=262.396和126.976,P均<0.001);使骨髓DCCD86、CD11a和IL-12P40的表达升高(F=3122.694,1469.946和252.590,P均<0.001);DC致敏的T淋巴细胞杀伤活性增强(F=122.539,P<0.001)。结论:LBP可以促进荷H22肝腹水瘤小鼠骨髓DC的成熟。 展开更多
关键词 枸杞多糖 树突状细胞 抗原提呈 肿瘤免疫 小鼠 H22肿瘤
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川芎嗪在促进大鼠结肠上皮细胞Cl^-和HCO_3^-分泌中的作用 被引量：10
6
作者 邢莹 何琼 +1 位作者 朱进霞 陈小章 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第1期61-65,共5页
目的 :探讨川芎嗪对大鼠结肠上皮水、电解质转运的影响和内在的机制。方法 :在药物和特异性通道阻断剂的作用下 ,用短路电流 (Isc)技术 ,体外测量结肠上皮短路电流的变化。结果 :离体大鼠远端结肠 ,在基础状态下的跨上皮电位差 (PD)和Is... 目的 :探讨川芎嗪对大鼠结肠上皮水、电解质转运的影响和内在的机制。方法 :在药物和特异性通道阻断剂的作用下 ,用短路电流 (Isc)技术 ,体外测量结肠上皮短路电流的变化。结果 :离体大鼠远端结肠 ,在基础状态下的跨上皮电位差 (PD)和Isc分别为 (- 5 .5± 0 .8)mV (n =8) (黏膜面为负 )和 (6 0 .3± 6 .7) μA/cm2 (n =1 6 ) ,Rt 为(94 .9± 5 .9)Ω·cm2 。在结肠上皮的基底膜加入川芎嗪 (0 .0 1～ 5mmol/L) ,能记录到一个呈剂量依赖性升高的短路电流 ,EC50 为 0 .5mmol/L (n =1 6 ) ;将Cl-或HCO3 -从溶液中替换 ,分别抑制了该电流的 5 8.4 % (n =5 ,P <0 .0 1 )和70 .8% (n =4 ,P <0 .0 1 ) ,2种离子都被替换时 ,该电流减少了 98.1 % (n =6 ,P <0 .0 0 1 ) ;川芎嗪在结肠上皮产生的短路电流能被顶膜Cl-通道阻断剂DPC(2mmol/L) (一种非选择性的Cl-通道阻断剂 )和glibenclamide(1mmol/L) [囊性纤维变性跨膜电导调节器 (CFTR)的特异性阻断剂 ]完全阻断 ,但对DIDS(1 0 0mmol/L) [Ca2 + 激活的Cl-通道(CaCC)阻断剂 ]不敏感 ;在结肠上皮的顶膜加入Na+ 通道阻断剂amiloride(1 0mmol/L)或将Na+ 从顶膜侧的溶液中替换 ,不影响随后川芎嗪产生的短路电流 ;将Na+ 从结肠上皮基底膜侧的溶液中替换或从顶膜和基底膜? 展开更多
关键词 川芎嗪 结肠上皮 大鼠 短路电流 Cl^- HCO3
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原发性高血压患者血管紧张素原基因多态性及血浆NO、内皮素水平检测 被引量：11
7
作者 张强 崔天祥 +1 位作者 李莉 乔鹏 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第4期640-643,共4页
目的:检测原发性高血压(EH)患者血管紧张素原(AGT)基因M235T、T174M多态性和血浆一氧化氮(nitricoxide,NO)、内皮素(ET)的水平。方法:对100例EH患者、40例正常血压对照组采用聚合酶链反应、限制性内切酶酶解及电泳分型的方法对AGT基因M2... 目的:检测原发性高血压(EH)患者血管紧张素原(AGT)基因M235T、T174M多态性和血浆一氧化氮(nitricoxide,NO)、内皮素(ET)的水平。方法:对100例EH患者、40例正常血压对照组采用聚合酶链反应、限制性内切酶酶解及电泳分型的方法对AGT基因M235T、T174M多态性进行分析,硝酸还原酶法和放射免疫法分别测定2组血浆NO、ET水平。结果:①EH组中M235TT、T174TM、T174MM基因型频率及T174M等位基因频率显著高于对照组(P均<0.05)。②EH组与对照组比较血浆NO水平降低;ET水平升高(P<0.001)。③EH组中T174MM型血浆NO水平明显低于T174TM型和T174TT型(P均<0.001);而ET水平T174MM型和T174TM型明显高于T174TT型(P均<0.001);血浆NO、ET水平在M235T3种基因型之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:①T174MM基因型和T174M等位基因是EH发病的危险因素。②EH存在血管内皮舒缩功能障碍,表现为血浆NO水平降低、ET水平升高。 展开更多
关键词 高血压 血管紧张素原 基因 多态性 内皮功能
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火焰原子吸收分光光度法测定野生葛不同部位铜、锌、铁含量 被引量：8
8
作者 刘利娥 刘洁 +3 位作者 张洪权 阎明 吴予明 韩萍 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第3期578-580,共3页
目的:测定河南信阳县大别山区野生葛根、藤、叶及花蕾中铜、锌、铁的含量。方法:用硝酸、高氯酸混合酸消解样品,用火焰原子吸收分光光度法测定野生葛的根、藤、叶及花蕾中铜、锌、铁的含量。结果:野生葛铜、锌、铁的含量均较高。铜、锌... 目的:测定河南信阳县大别山区野生葛根、藤、叶及花蕾中铜、锌、铁的含量。方法:用硝酸、高氯酸混合酸消解样品,用火焰原子吸收分光光度法测定野生葛的根、藤、叶及花蕾中铜、锌、铁的含量。结果:野生葛铜、锌、铁的含量均较高。铜、锌的分布为:葛叶>花蕾>葛藤>葛根;铁的分布为:葛根>葛藤>葛叶>花蕾。说明葛叶、葛藤、葛根、葛花均是补充铜、锌、铁的良好来源,与葛根、葛花相比,葛叶和葛藤也具有广阔的应用前景。结论:野生葛叶、根、花蕾及藤中铜、锌、铁含量均丰富。与葛根、葛花的广泛应用相比,葛叶和葛藤也具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 火焰原子吸收法 野生葛 铜 锌 铁
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胚胎大鼠神经干细胞的培养及鉴定 被引量：10
9
作者 张清勇 杨波 +5 位作者 赵新利 宋来君 李红伟 冯祖荫 王树凯 何炜 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第1期5-7,共3页
目的:探索胚胎大鼠神经干细胞培养、传代及鉴定方法。方法:从胚胎大鼠脑室下区(SVZ)组织分离得到神经干细胞,采用无血清培养技术进行培养,并诱导分化,采用SABC法对分化后的细胞进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸蛋白(GFAP)检... 目的:探索胚胎大鼠神经干细胞培养、传代及鉴定方法。方法:从胚胎大鼠脑室下区(SVZ)组织分离得到神经干细胞,采用无血清培养技术进行培养,并诱导分化,采用SABC法对分化后的细胞进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸蛋白(GFAP)检测及姬姆萨染色进行细胞鉴定。结果:成功培养出了胚胎大鼠神经干细胞,培养出的细胞具有自我更新能力和增殖能力,可分化为神经元、神经胶质细胞及少突胶质细胞。结论:胚胎大鼠神经干细胞在体外适宜的培养条件下具有自我更新、增殖和多向分化潜能。 展开更多
关键词 神经干细胞 细胞培养 碱性成纤维细胞生长因子 无血清培养技术
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中国人群凝血酶原FⅡG20210A和FVLeiden的分布 被引量：14
10
作者 郑红 连建华 +4 位作者 贺颖 齐华 曾青成 Christopher Butt 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第1期102-104,共3页
目的:探讨FV Leiden(FVL)和FⅡG20210A在中国人群中的分布。方法:利用多重PCR和限制性片段长度多态性方法,检测了676例正常中国人和500例高加索正常人群的FVL和FⅡG20210A的分布情况。结果:中国人群中FVL和FⅡG20210A的分布频率和位点... 目的:探讨FV Leiden(FVL)和FⅡG20210A在中国人群中的分布。方法:利用多重PCR和限制性片段长度多态性方法,检测了676例正常中国人和500例高加索正常人群的FVL和FⅡG20210A的分布情况。结果:中国人群中FVL和FⅡG20210A的分布频率和位点频率均为0.15%和0.07%,其中FVL分布频率与高加索人群比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:FVL和FⅡG20210A在中国人群中分布频率极低,在血栓形成过程中的作用可能很小。 展开更多
关键词 FV LEIDEN FⅡ G20210A 血栓形成 病因学
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大鼠脑缺血再灌注损伤后兴奋性氨基酸、NOS和NO的含量变化 被引量：9
11
作者 崔景斌 王俊萍 +2 位作者 鄢文海 赵卫星 白浩 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2002年第2期169-171,共3页
目的 :通过测定大鼠脑缺血再灌注后兴奋性氨基酸 (EAA)、一氧化氮合酶 (NOS)和一氧化氮 (NO)含量的变化 ,探讨脑缺血再灌注损伤的发生机制。方法 :将动物分为假手术组和缺血 30min后再灌注组 ,通过高效液相色谱或分光光度法测定再灌注... 目的 :通过测定大鼠脑缺血再灌注后兴奋性氨基酸 (EAA)、一氧化氮合酶 (NOS)和一氧化氮 (NO)含量的变化 ,探讨脑缺血再灌注损伤的发生机制。方法 :将动物分为假手术组和缺血 30min后再灌注组 ,通过高效液相色谱或分光光度法测定再灌注后不同时间 (1h、6h、2 4h、4 8h和 72h)脑组织EAA、NOS和NO的含量。结果 :再灌注后 1hEAA水平较假手术组显著增高 ,以谷氨酸最为明显 ,随后逐渐下降 ,2 4h达正常水平。NOS和NO于再灌注后1h即升高 (P <0 .0 5 ) ,2 4h达最高水平 (P <0 .0 1) ,72h降至正常。结论 :脑缺血再灌注后EAA、NOS和NO含量发生变化 。 展开更多
关键词 再灌注损伤 兴奋性氨基酸 一氧化氮合酶 一氧化氮 大鼠 脑缺血
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重症肌无力患者胸腺细胞凋亡障碍与Fas表达异常的关系 被引量：7
12
作者 杜英 张清勇 +3 位作者 阮丽荣 梁长春 李倩如 何炜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期450-453,共4页
目的 :探讨重症肌无力 (MG)胸腺细胞凋亡异常、Fas表达异常在自身免疫应答形成中的作用。方法 :用手术切除的MG患者的胸腺 ,制备胸腺提取液和胸腺细胞悬液 ,用MTT比色法测定胸腺细胞的增殖 ;用DNA电泳及细胞形态学观察细胞凋亡 ;用流式... 目的 :探讨重症肌无力 (MG)胸腺细胞凋亡异常、Fas表达异常在自身免疫应答形成中的作用。方法 :用手术切除的MG患者的胸腺 ,制备胸腺提取液和胸腺细胞悬液 ,用MTT比色法测定胸腺细胞的增殖 ;用DNA电泳及细胞形态学观察细胞凋亡 ;用流式细胞仪检测细胞表面Fas的表达 ,用RT PCR结合单链多态构象性分析 (SSCP) ,探讨Fas基因的转录及可能存在的Fas基因突变。结果 :MG患者的胸腺提取液 ,能抑制正常胸腺细胞增殖 ,但不能抑制MG患者胸腺细胞增殖。在地塞米松作用下 ,正常人及患者胸腺细胞的增殖均可被抑制 ,细胞增殖抑制率分别为 5 8.33%和 5 4 .2 6 %。MG患者胸腺细胞的DNA电泳可见梯状条带 ,并且胸腺细胞上Fas的表达百分率增加 [(2 0 .38± 6 .0 7) % ],与空白对照组 [(12 .4 3±4 .32 ) % ]相比较P <0 .0 5。对MG患者胸腺细胞FasmRNA进行RT PCR SSCP分析 ,部分MG患者出现异常电泳条带。结论 :MG患者胸腺细胞的凋亡及Fas分子表达均异常 ,而且存在Fas基因突变 ,提示与本病的发生发展有关。 展开更多
关键词 重症肌无力 胸腺细胞 细胞凋亡 Fas表达异常
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PTEN基因表达对EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响 被引量：13
13
作者 黄丽艳 王娜 +4 位作者 汤黎明 许燕 黄幼田 杨红艳 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第1期16-20,共5页
目的:观察PTEN基因表达水平的变化对食管癌EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响。方法:构建2个靶向PTEN的siRNA载体及1个PTEN表达载体,分别转染EC9706细胞。实验分沉默1组、沉默2组、siRNA载体对照组、PTEN表达组、表达载体对照组和... 目的:观察PTEN基因表达水平的变化对食管癌EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响。方法:构建2个靶向PTEN的siRNA载体及1个PTEN表达载体,分别转染EC9706细胞。实验分沉默1组、沉默2组、siRNA载体对照组、PTEN表达组、表达载体对照组和未转染组。RT-PCR、Westernblot法检测转染后各组细胞PTEN基因mRNA和蛋白表达水平。采用CCK-8试验、软琼脂克隆形成实验、流式细胞术和Transwell试验分别检测各组细胞增殖、克隆形成能力、细胞凋亡率及侵袭能力。结果:与未转染组比较,沉默1组、沉默2组PTENmRNA和蛋白表达量均降低,PTEN表达组PTENmRNA相对表达量升高(F=25.762,P<0.001);与未转染组比较,PTEN表达组细胞软琼脂克隆形成数和穿透细胞数均降低,细胞凋亡率增加(F=50.752、29.981、32.193,P均<0.001)。结论:上调PTEN的表达水平可以有效抑制EC9706细胞的增殖、克隆形成和侵袭转移能力,同时促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 PTEN EC9706 细胞增殖 细胞侵袭 凋亡 食管癌
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EC109细胞cDNA微矩阵基因芯片的建立及其方法学分析 被引量：7
14
作者 李沛 凌志强 +3 位作者 赵继敏 杨洪艳 黄幼田 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第2期272-274,共3页
目的建立食管癌EC109细胞cDNA微矩阵基因芯片,并对其可靠性进行验证。方法提取正常食管上皮细胞和EC109细胞的mRNA,逆转录得cDNA,再逆转录得cRNA,用Cy3-dUTP标记EC109细胞cRNA,用Cy5-dUTP标记正常食管上皮细胞cRNA,制备表达谱探针,利用... 目的建立食管癌EC109细胞cDNA微矩阵基因芯片,并对其可靠性进行验证。方法提取正常食管上皮细胞和EC109细胞的mRNA,逆转录得cDNA,再逆转录得cRNA,用Cy3-dUTP标记EC109细胞cRNA,用Cy5-dUTP标记正常食管上皮细胞cRNA,制备表达谱探针,利用该探针对EC109细胞与正常食管上皮细胞进行杂交。荧光扫描基因芯片,筛选表达谱。利用自身比较实验、重复实验和R2、一致率(CR)及假阳性率(FPR)等指标对该基因芯片系统进行方法学分析。结果该基因芯片系统2次实验结果的符合率达85%,R2=0.7329,CR=100%。该系统的FPR为0.45%,扩增样品与无扩增样品的基因表达谱表现出较好的吻合性。结论该芯片系统具有良好的稳定性、可靠性及低误差率等特点,可用于基因差异表达谱的分析。 展开更多
关键词 食管癌细胞 基因芯片 差异表达 基因表达谱 可靠性
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小鼠骨髓树突状细胞pcDNA3-hCEA转染疫苗的抗瘤作用 被引量：4
15
作者 黄幼田 董子明 +6 位作者 赵明耀 杨洪艳 张义国 郑智敏 马俊芬 汤黎明 陈宁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1317-1323,共7页
目的 :将pcDNA3 -hCEA转染小鼠骨髓树突状细胞 (DCs) ,观察其诱导BALB/c小鼠对CT2 6(hCEA+ )的抗肿瘤免疫效应。方法 :采用rmGM -CSF和rmIL - 4体外诱导培养小鼠骨髓DCs;构建真核表达质粒pcDNA3 -hCEA ;并用lipofectamine将其转染DCs,制... 目的 :将pcDNA3 -hCEA转染小鼠骨髓树突状细胞 (DCs) ,观察其诱导BALB/c小鼠对CT2 6(hCEA+ )的抗肿瘤免疫效应。方法 :采用rmGM -CSF和rmIL - 4体外诱导培养小鼠骨髓DCs;构建真核表达质粒pcDNA3 -hCEA ;并用lipofectamine将其转染DCs,制备DCs(pCDNA3 -hCEA)疫苗 ;同时制备CT2 6(hCEA+ ) ;采用RT -PCR检测DCs(pCDNA3 -hCEA)中CEAmRNA的表达 ,采用放射免疫法检测DCs(pCDNA3 -hCEA)培养上清中CEA的含量 ;使用DCs(pCDNA3 -hCEA)疫苗体外诱导小鼠同种异体T淋巴细胞靶向性杀伤。采用DCs(pcDNA3 -hCEA)疫苗预防免疫BALB/c小鼠 ,观察其对于荷临界致瘤量CT2 6(hCEA+ )小鼠的抗肿瘤效应。结果 :经G41 8筛选 ,DCs(pCDNA3 -hCEA)有 1 4 %的获得率 ;RT -PCR检测表明DCs(pCDNA3 -hCEA)内CEAmRNA呈阳性表达 ;放射免疫法检测表明DCs(pCDNA3 -hCEA)能微量表达人CEA ;DCs(pCDNA3 -hCEA)能够有效诱导CEA靶向免疫杀伤。DCs(pcDNA3 -hCEA)疫苗延长荷CT2 6(hCEA+ )瘤小鼠生存期 1周至 4周。结论 :编码肿瘤抗原基因的真核表达质粒转染的树突状细胞 。 展开更多
关键词 小鼠 骨髓树突状细胞 pcDNA3-hCEA 癌胚抗原 肿瘤 免疫效应 真核表达质粒
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辣椒素对食管鳞状细胞癌细胞凋亡和NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响 被引量：7
16
作者 田芳 江亚南 +1 位作者 张晓艳 范天黎 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第4期437-440,共4页
目的:探讨辣椒素对食管鳞状细胞癌(食管鳞癌)细胞凋亡和NF-κB信号通路的影响。方法:采用Westernblot法检测食管鳞癌EC9706和Eca109细胞中IκBα、磷酸化IκBα(pIκBα)、p50和p65蛋白的表达及0、50、100和200μmol/L辣椒素作用后pIκ... 目的:探讨辣椒素对食管鳞状细胞癌(食管鳞癌)细胞凋亡和NF-κB信号通路的影响。方法:采用Westernblot法检测食管鳞癌EC9706和Eca109细胞中IκBα、磷酸化IκBα(pIκBα)、p50和p65蛋白的表达及0、50、100和200μmol/L辣椒素作用后pIκBα和Bcl-2蛋白的表达;凝胶滞留实验检测2种食管鳞癌细胞胞核中NF-κB与DNA的结合活性及0、100和200μmol/L辣椒素作用对NF-κB与DNA结合活性的影响。2种食管鳞癌细胞分别分为对照组、5-FU组、辣椒素组和联合组,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:2种食管鳞癌细胞胞质均表达IκBα和pIκBα蛋白,胞核均表达p50和p65蛋白;随辣椒素作用浓度的增加,pIκBα和Bcl-2蛋白的表达逐渐下降,NF-κB与DNA的结合活性也逐渐下降。辣椒素可促进2种食管鳞癌细胞的凋亡,与5-FU联合使用时,凋亡细胞显著增加(EC9706:F辣椒素=2535.497,F交互=113.034,P<0.001;Eca109:F辣椒素=5984.040,F交互=5.150,P<0.05)。结论:辣椒素可能通过抑制IκBα的磷酸化阻断NF-κB信号通路,促进食管鳞癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 辣椒素 NF-κB IΚBΑ Bcl-2 EC9706 ECA109
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神经干细胞移植对AD大鼠学习记忆能力的影响 被引量：5
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作者 周辉 杨春 +2 位作者 章茜 刘廷磊 王书春 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第4期663-666,共4页
目的:观察神经干细胞(NSCs)植入AD大鼠海马内的存活情况,以及对学习记忆能力的影响。方法:采用神经球连续形成法从新生大鼠海马齿状回分离、培养NSCs,并用Nestin细胞免疫化学方法进行鉴定。NSCs经Hoechst33258标记后植入Aβ1-40诱导的A... 目的:观察神经干细胞(NSCs)植入AD大鼠海马内的存活情况,以及对学习记忆能力的影响。方法:采用神经球连续形成法从新生大鼠海马齿状回分离、培养NSCs,并用Nestin细胞免疫化学方法进行鉴定。NSCs经Hoechst33258标记后植入Aβ1-40诱导的AD模型大鼠海马,4周后,行Y迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,然后取脑进行荧光观察。以正常大鼠和AD模型大鼠为对照。结果:从新生大鼠海马齿状回成功分离培养了NSCs。NSCs移植组大鼠的学习能力和记忆能力较AD大鼠有明显提高。移植的NSCs能在海马存活并沿海马回迁移。结论:NSCs移植能改善AD模型大鼠的学习和记忆能力。 展开更多
关键词 神经干细胞 移植 ALZHEIMER病 大鼠
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8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响 被引量：8
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作者 李士坤 郑乃刚 +2 位作者 吴景兰 白经修 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第5期663-666,共4页
目的 :探讨 8 Br cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca 10 9细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响。 方法 :将培养的Eca 10 9细胞分为 3组 :①加 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②加槲皮素组 (Q组 ) ;③不加任何药物对照组 (C组 )。同时培养 4 8h ,... 目的 :探讨 8 Br cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca 10 9细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响。 方法 :将培养的Eca 10 9细胞分为 3组 :①加 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②加槲皮素组 (Q组 ) ;③不加任何药物对照组 (C组 )。同时培养 4 8h ,将野生型DNApolβ的cDNA ,EGFRcDNA ,野生型 (wt)p5 3cDNA及c myccDNA分别制备了生物素 /地高辛标记的探针进行原位杂交和RNA斑点印迹阵列。另进行POLB ,XRCC1,VEGF及PCNA的免疫组化染色及免疫斑点印迹阵列。结果 :Br组和Q组的DNApolβ ,EGFR ,c myc基因表达下调而wtp5 3基因表达上调。POLB ,XRCC1,PCNA及VEGF免疫斑点印迹减弱。 8 Br cAMP及槲皮素显著下调Eca 10 9细胞的DNApolβ基因表达及相关癌基因表达 ,同时上调抑癌基因的表达。作为POLB的异二聚体XRCC1及恶性细胞生物标志的PCNA及VEGF表达下调。结论 :分化诱导剂下调Eca 10 9细胞DNApolβ基因表达 ,提示Eca 10 9细胞的polβ基因是高表达的 ;功能调整后的polβ通过相关基因表达的改变尤其是wtp5 展开更多
关键词 DNA聚合酶Β 基因表达 ECA-109细胞 8-BR-CAMP 槲皮素 食管鳞状上皮癌
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新生大鼠海马齿状回神经干细胞的分离培养与鉴定 被引量：6
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作者 刘廷磊 章茜 +1 位作者 杨春 王书春 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第3期434-436,共3页
目的 :从新生大鼠海马齿状回分离并鉴定神经干细胞。方法 :利用无血清方法分离、培养新生大鼠齿状回神经细胞 ,采用免疫细胞化学方法检测神经巢蛋白 (Nestin)并鉴定神经元和神经胶质细胞。结果 :从新生大鼠海马齿状回分离的细胞群可不... 目的 :从新生大鼠海马齿状回分离并鉴定神经干细胞。方法 :利用无血清方法分离、培养新生大鼠齿状回神经细胞 ,采用免疫细胞化学方法检测神经巢蛋白 (Nestin)并鉴定神经元和神经胶质细胞。结果 :从新生大鼠海马齿状回分离的细胞群可不断增殖形成神经球 ,并能自我更新 ,表达Nestin。自神经球分化出的细胞分别表达神经元、星形胶质细胞特异性抗原。结论 展开更多
关键词 神经干细胞 细胞培养 分离 鉴定 大鼠
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STI571及As_2O_3诱导K562细胞凋亡机制的研究 被引量：6
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作者 付春景 李金龙 +3 位作者 黄幼田 申琦 郑智敏 宫亚欧 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1919-1920,1928,共3页
目的 :探讨比较STI5 71和As2 O3 诱导K5 6 2细胞凋亡及抑制其生长的可能机制 ,为进一步揭示慢性粒细胞白血病 (CML)的发病机制及STI5 71和As2 O3 的临床应用提供理论依据。方法 :采用细胞培养、台盼蓝染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、Westernb... 目的 :探讨比较STI5 71和As2 O3 诱导K5 6 2细胞凋亡及抑制其生长的可能机制 ,为进一步揭示慢性粒细胞白血病 (CML)的发病机制及STI5 71和As2 O3 的临床应用提供理论依据。方法 :采用细胞培养、台盼蓝染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、Westernblot等方法研究STI5 71和As2 O3 分别对K5 6 2细胞的生长抑制和诱导凋亡的作用 ,检测两种药物在诱导K5 6 2细胞凋亡的过程中某些凋亡相关蛋白的表达。结果 :STI5 71和As2 O3 均可抑制K5 6 2细胞的增殖、诱导其凋亡。两种药物均可下调Bcl-XL的表达 ,并裂解caspase - 3。As2 O3 作用浓度为 2 μmol/L时其下调Bcl-XL的作用与 1μmol/L时没有明显的差别 ,但是其裂解caspase - 3的作用较后者更加明显。 结论 :STI5 71作为凋亡诱导剂 ,可通过抑制Bcl-XL的表达从而激活caspase - 3,诱导K5 6 2细胞凋亡 ;As2 O3 诱导K5 6 2细胞凋亡过程中伴有caspase - 3的激活 。 展开更多
关键词 三氧化二砷 K562细胞 BCL-XL 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 细胞凋亡
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