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IL-12对炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞激活和炎症介质分泌的影响 被引量:12
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作者 刘占举 郭惠学 +2 位作者 胡军 李富广 杜英 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第5期818-820,共3页
目的:探讨IL-12对炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞激活和炎症介质分泌的影响。方法:收集并分离15例克罗恩病、21例溃疡性结肠炎和13例结肠镜检正常者(对照)外周血单个核细胞(PBMC)及肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC),体外培养... 目的:探讨IL-12对炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞激活和炎症介质分泌的影响。方法:收集并分离15例克罗恩病、21例溃疡性结肠炎和13例结肠镜检正常者(对照)外周血单个核细胞(PBMC)及肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC),体外培养并用IL-12刺激,培养12h、24h、48h后,用流式细胞仪测PBMC或LPMCCD69表达情况;培养48h后,收集细胞培养上清液并用ELISA检测干扰素(IFN)-γ、IL-2和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平。结果:IL-12刺激后炎症性肠病患者外周血T细胞表达高水平的CD69。克罗恩病患者的PBMC和LPMCCD69表达水平及IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平较溃疡性结肠炎和对照者明显增高(P<0.05)。结论:IL-12能直接刺激炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞激活,并产生大量促炎症介质。 展开更多
关键词 白细胞介素-12 淋巴细胞 外周血 淋巴细胞 固有层 炎症性肠病
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新型人趋化素样因子超家族8对人白血病细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响 被引量:5
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作者 陈绍倩 杜英 +3 位作者 黄玉敏 王鑫 顾巧丽 董子明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期458-461,共4页
本研究探讨新型趋化因子CKLFSF8对人白血病HL-60细胞的增殖和表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响,应用RT-PCR方法检测CKLFSF8基因在HL-60细胞中的表达;利用脂质体将CKLFSF8基因转染到HL-60细胞,在倒置显微镜下观察细胞生长;MTT法检测细... 本研究探讨新型趋化因子CKLFSF8对人白血病HL-60细胞的增殖和表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响,应用RT-PCR方法检测CKLFSF8基因在HL-60细胞中的表达;利用脂质体将CKLFSF8基因转染到HL-60细胞,在倒置显微镜下观察细胞生长;MTT法检测细胞的增殖程度;免疫细胞化学法检测CKLFSF8基因转染前后HL-60细胞EGFR的表达。结果表明:在细胞生长过程中可检测到CKLFSF8表达;CKLFSF8基因转染前后HL-60细胞的增殖受到了明显的抑制,与空白对照组和空质粒组相比有显著性差异(P(0.05);对比转染前后细胞EGFR表达的阳性率具有显著性差异(P(0.01)。结论:CKLFSF8基因转染对白血病细胞HL-60的增殖和EGFR的表达有明显抑制作用。 展开更多
关键词 CKLFSF8 HL-60细胞 细胞增殖 EGFR
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TCR Vβ8/pcDNA3.1重组质粒的构建 被引量:3
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作者 张明智 赵国强 +2 位作者 李继昌 董子明 李学民 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2002年第3期268-273,共6页
目的:构建重组质粒TCR Vβ8/pcDNA3.1。方法;从人淋巴瘤 Jurkat细胞中提取 mRNA,经 RT-PCR法获取 TCR Vβ8基因;将表达质粒 pcDNA3.l和 TCR Vβ8基因行 BamHI和 HindⅢ双酶切、低熔点胶纯化、连接酶切产物、转化DH5a感受态细菌、筛... 目的:构建重组质粒TCR Vβ8/pcDNA3.1。方法;从人淋巴瘤 Jurkat细胞中提取 mRNA,经 RT-PCR法获取 TCR Vβ8基因;将表达质粒 pcDNA3.l和 TCR Vβ8基因行 BamHI和 HindⅢ双酶切、低熔点胶纯化、连接酶切产物、转化DH5a感受态细菌、筛选菌落和测序鉴定。结果:电泳获得 523 bp的 TCR Vβ8预期条带,测序证实为正确的 TCR Vβ8目的基因序列。结论:测序是构建TCR Vβ8/pcDNA3.l重组质粒的重要步骤。 展开更多
关键词 淋巴瘤 TCR 独特型 重组质粒 DNA疫苗
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非酒精性脂肪肝患者肝组织中Irisin的表达 被引量:3
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作者 马圆圆 吴雪 +9 位作者 刘晓钢 张丽侠 李姗 王亭亭 王志芳 李冲 李静怡 韩超 李付广 郑丽丽 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第4期517-520,共4页
目的:探讨Irisin在非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者肝穿刺组织中的表达及其意义。方法:回顾性分析病理活检确诊的非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL,n=56)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH,n=75)患者及无脂肪变和脂肪性肝炎的正常者(n=20)的临床资料,免疫... 目的:探讨Irisin在非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者肝穿刺组织中的表达及其意义。方法:回顾性分析病理活检确诊的非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL,n=56)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH,n=75)患者及无脂肪变和脂肪性肝炎的正常者(n=20)的临床资料,免疫组化SP法检测各组肝穿刺组织中Irisin的表达水平。结果:3组年龄及性别构成比差异无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组相比,NAFL组及NASH组存在脂质代谢异常。NAFL组和NASH组肝组织中Irisin表达水平高于对照组(P<0.05),但NAFL组和NASH组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Irisin可能是一种补偿性调节肝脏脂质蓄积的因子。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪肝 Irisin 脂质代谢
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多步离心法提取K526细胞外泌体 被引量:1
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作者 陈绍倩 杜英 +3 位作者 王鑫 顾巧丽 黄玉敏 董子明 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第3期489-491,共3页
目的:探讨多步离心提取K526细胞外泌体的实验方法。方法:选用白血病细胞株K562细胞为研究对象,取其培养上清液,经多步骤离心获取提取物,然后进行形态和蛋白成分分析。结果:形态和蛋白成分分析证实所提取到的物质正是K526细胞外泌体。结... 目的:探讨多步离心提取K526细胞外泌体的实验方法。方法:选用白血病细胞株K562细胞为研究对象,取其培养上清液,经多步骤离心获取提取物,然后进行形态和蛋白成分分析。结果:形态和蛋白成分分析证实所提取到的物质正是K526细胞外泌体。结论:多步离心是一种方便实用的提取外泌体的方法。 展开更多
关键词 外泌体 K562细胞 离心 提取
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VR1012-TCRγV_1真核表达载体的构建
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作者 宗红 李建生 +2 位作者 赵国强 董子明 王瑞林 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第2期291-293,共3页
目的:构建含TCRγV1基因的重组表达载体。方法:从人淋巴瘤Jurkat细胞中提取总RNA,反转录合成 cDNA克隆入VR1012质粒;转化感受态细菌E.ColiDH5α,以通用引物PCR扩增筛选阳性克隆,并双酶切鉴定;小 量提取质粒进行测序。结果:测序结果... 目的:构建含TCRγV1基因的重组表达载体。方法:从人淋巴瘤Jurkat细胞中提取总RNA,反转录合成 cDNA克隆入VR1012质粒;转化感受态细菌E.ColiDH5α,以通用引物PCR扩增筛选阳性克隆,并双酶切鉴定;小 量提取质粒进行测序。结果:测序结果证实重组载体中的外源片段序列与GenBank中TCRγV1序列完全相符。结 论:成功构建了含TCRγV1基因的重组表达载体。 展开更多
关键词 TCRΓ 真核表达载体 基因疫苗
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pcDNA3/TCRγV_1真核表达载体的构建及表达
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作者 宗红 赵国强 +2 位作者 董子明 李建生 王瑞林 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2004年第5期818-820,共3页
目的 :构建含TCRγV1基因的真核表达质粒并检测其在小鼠骨骼肌中的表达。方法 :从人淋巴瘤Jurkat细胞中提取RNA ,用RT PCR法扩增含BamHⅠ与HindⅢ酶切位点的TCRγV1基因序列 ,将TCRγV1基因PCR产物插入pcDNA3后转化到大肠杆菌DH5α ,阳... 目的 :构建含TCRγV1基因的真核表达质粒并检测其在小鼠骨骼肌中的表达。方法 :从人淋巴瘤Jurkat细胞中提取RNA ,用RT PCR法扩增含BamHⅠ与HindⅢ酶切位点的TCRγV1基因序列 ,将TCRγV1基因PCR产物插入pcDNA3后转化到大肠杆菌DH5α ,阳性克隆酶切鉴定后测序分析。大量提取质粒 ,股四头肌注射法免疫小鼠 ,RT PCR法检测小鼠肌肉中TCRγV1mRNA的表达。结果与结论 :pcDNA3/TCRγV1重组质粒构建成功 ,并能在小鼠骨骼肌中表达。 展开更多
关键词 TCRΓ 真核表达载体 基因疫苗
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食管癌组织中IDO1的表达及犬尿酸对间皮素CAR-T细胞功能的影响 被引量:4
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作者 刘裕琳 张震 +2 位作者 曹玲 申春一 张毅 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2019年第3期344-348,共5页
目的:探讨食管癌组织中吲哚加双氧酶1(IDO1)的表达,及其代谢产物犬尿酸对间皮素嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)功能的影响。方法:利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库中数据分析食管癌组织中IDO1的表达对患者生存的影响;采用密度梯度离心法获得... 目的:探讨食管癌组织中吲哚加双氧酶1(IDO1)的表达,及其代谢产物犬尿酸对间皮素嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)功能的影响。方法:利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库中数据分析食管癌组织中IDO1的表达对患者生存的影响;采用密度梯度离心法获得健康供者外周血单个核细胞,并用细胞免疫磁珠分选出CD8+T细胞;采用病毒感染的方法制备间皮素CAR-T细胞,用200μmol/L犬尿酸处理48 h后,采用流式细胞术检测细胞表面标志物的表达和细胞内因子分泌的水平,检测其对KYSE510细胞的杀伤能力。以未用犬尿酸处理的间皮素CAR-T细胞作对照。结果:高表达IDO1的食管癌患者预后较差。与对照组相比,犬尿酸处理组间皮素CAR-T细胞表面抑制性分子PD-1表达上调(P <0. 05),而激活性分子CD28表达下降(P <0. 05),效应因子IFN-γ和IL-2分泌减少(P <0. 05);与KYSE510细胞共孵育后,间皮素CAR-T细胞CD107a表达降低,杀伤能力下降(P <0. 05)。结论:犬尿酸可以抑制间皮素CAR-T细胞的功能。 展开更多
关键词 吲哚加双氧酶1 犬尿酸 间皮素CAR-T细胞 食管癌 免疫治疗
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