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Tet-on调控TAp63γ基因表达EC9706细胞系的建立及对细胞增殖的影响
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作者 范天黎 侯桂琴 +4 位作者 许培荣 袁保梅 杨静 刘兰琦 杨观瑞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第2期286-289,共4页
目的:利用Tet-on基因表达调控系统建立由强力霉素(Dox)诱导TAp63γ基因表达的EC9706细胞系,为进一步研究TAp63γ基因的功能奠定基础。方法:将调控质粒pTet-on转入EC9706细胞,经G418筛选后的细胞再次转染反应质粒pTRE-TAp63γ-HA,再用潮... 目的:利用Tet-on基因表达调控系统建立由强力霉素(Dox)诱导TAp63γ基因表达的EC9706细胞系,为进一步研究TAp63γ基因的功能奠定基础。方法:将调控质粒pTet-on转入EC9706细胞,经G418筛选后的细胞再次转染反应质粒pTRE-TAp63γ-HA,再用潮霉素筛选出阳性细胞克隆,RT-PCR法选择对Dox敏感的细胞克隆。最后用不同浓度Dox诱导,Westernblot法确定Dox的最佳诱导浓度。采用此浓度的Dox分别诱导EC9706、EC9706/Tet/pTRE、EC9706/Tet/pTRE-TAp63γ3组细胞,细胞增殖分析试剂盒(CCK-8试剂盒)检测细胞生长抑制率。结果:Dox浓度为3mg/L时可诱导TAp63γ基因高表达,EC9706/Tet/pTRE-TAp63γ细胞的生长抑制率均高于EC9706和EC9706/Tet/pTRE细胞(P<0.05或0.01)。结论:成功构建了Tet-on调控TAp63γ基因表达的EC9706细胞系,为进一步研究食管鳞癌细胞内P63蛋白的生物学行为提供了一个理想的研究平台。TAp63γ基因表达可使EC9706细胞增殖受到抑制。 展开更多
关键词 Tet—on 基因表达系统 TAp63γ基因 食管癌 EC9706细胞
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糖尿病大鼠血管损伤后纤连蛋白的表达
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作者 郑丽丽 华海婴 +3 位作者 申红 王筠 叶启霞 张英鸽 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第3期388-390,共3页
目的 :观察糖尿病大鼠血管损伤后纤连蛋白 (FN)mRNA和蛋白的表达。方法 :Wistar大鼠 32只 ,随机分为正常对照组 (n =8) ,手术对照组及糖尿病组 (均n =12 ) ,糖尿病组单次腹腔注射链脲佐菌素 (STZ)制成糖尿病模型。后 2组大鼠均行胸主动... 目的 :观察糖尿病大鼠血管损伤后纤连蛋白 (FN)mRNA和蛋白的表达。方法 :Wistar大鼠 32只 ,随机分为正常对照组 (n =8) ,手术对照组及糖尿病组 (均n =12 ) ,糖尿病组单次腹腔注射链脲佐菌素 (STZ)制成糖尿病模型。后 2组大鼠均行胸主动脉至左髂总动脉球囊损伤后 ,每组选 8只用于试验。术后 14d用Northern印迹杂交测定血管平滑肌细胞FNmRNA的表达 ,用免疫组化检测FN在血管壁的表达。结果 :与手术对照组相比 ,糖尿病组FNmRNA和蛋白表达均明显增高 (P <0 .0 1) ,而此 2组又均高于对照组 (P <0 .0 1)。结论 展开更多
关键词 糖尿病 血管损伤 纤连蛋白 表达
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