哮喘患者外周血血小板-淋巴细胞比值和中性粒细胞-淋巴细胞比值的临床意义 被引量：41

1

作者 时光 赵俊伟 明亮 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期84-88,共5页

目的探讨外周血中性粒细胞-淋巴细胞比值(neutrophil-lymphocyte ratio,NLR)和血小板-淋巴细胞比值(plateletlymphocyte ratio,PLR)在支气管哮喘急性发作期患者中的变化及临床意义。方法选取2013年1月~2016年5月期间确诊的支气管哮喘急... 目的探讨外周血中性粒细胞-淋巴细胞比值(neutrophil-lymphocyte ratio,NLR)和血小板-淋巴细胞比值(plateletlymphocyte ratio,PLR)在支气管哮喘急性发作期患者中的变化及临床意义。方法选取2013年1月~2016年5月期间确诊的支气管哮喘急性发作期患者262例为病例组及130例健康体检者为正常对照组。根据其急性发作期病情严重程度,将哮喘患者分为危重组87例、非危重组175例。记录病例组和健康对照组性别、年龄等临床资料和血常规结果,并计算NLR和PLR。比较3组间中性粒细胞绝对值、淋巴细胞绝对值、血小板计数、NLR、PLR的差异,以ROC曲线评价各指标对哮喘的诊断价值。结果各组间中性粒细胞绝对值、淋巴细胞绝对值、NLR、PLR差异具有统计学意义(P<0.0001),各组血小板计数差异无统计学意义(P=0.971)。哮喘危重组淋巴细胞绝对值低于哮喘非危重组、健康对照组(P<0.0001),而中性粒细胞绝对值、NLR、PLR显著高于哮喘危重组、健康对照组(P<0.0001)。哮喘非危重组中性粒细胞绝对值、淋巴细胞绝对值、NLR、PLR与健康对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。中性粒细胞绝对值、淋巴细胞绝对值、NLR、PLR对支气管哮喘急性发作期危重患者诊断的曲线下面积分别为0.802、0.784、0.873、0.795(均P<0.01)。NLR诊断支气管哮喘急性发作期危重患者的最佳临界值为2.58,敏感度为82.8%,特异度为81.1%。结论支气管哮喘患者外周血NLR、PLR均升高,对支气管哮喘的诊断和病情监测有一定临床指导意义。 展开更多

关键词 支气管哮喘 中性粒细胞-淋巴细胞比值 血小板-淋巴细胞比值

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沉默核干因子基因表达对HL-60白血病细胞凋亡的影响 被引量：9

2

作者 岳保红 蔚利纳 王园园 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期319-323,共5页

本研究探讨靶向沉默白血病细胞的核干因子(nucleostemin,NS)基因对HL-60白血病细胞凋亡的影响。用T7启动子介导体外合成两条短发夹状干扰RNA(NS-shRNA),以其中沉默NS基因作用强的一条NS-shRNA转染HL-60细胞,同时以与NS基因序列无关小干... 本研究探讨靶向沉默白血病细胞的核干因子(nucleostemin,NS)基因对HL-60白血病细胞凋亡的影响。用T7启动子介导体外合成两条短发夹状干扰RNA(NS-shRNA),以其中沉默NS基因作用强的一条NS-shRNA转染HL-60细胞,同时以与NS基因序列无关小干扰RNA转染HL-60细胞作对照,应用RT-PCR检测被转染的HL-60细胞NS-mRNA抑制效果,倒置显微镜下观察活体细胞形态变化,Wright-Giemsa染色观察细胞胞体和细胞核形态学变化,以流式细胞仪(FCM)和TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)测定凋亡细胞数并计算凋亡阳性率。结果表明:HL-60细胞被NS-shRNA转染48小时后NS-mRNA阻断率达到74.94%,凋亡率分别为(25.32±3.06)%和(27.3±3.21)%,对照组仅(3.12±0.38)%和(3.30±1.52)%,转染组与对照组比较差异显著(p<0.01)。Wright-Giemsa染色显示细胞发生核碎裂并出现"凋亡小体"。结论:靶向沉默NS基因表达可诱发和促进HL-60白血病细胞发生凋亡,为NS基因作为恶性肿瘤治疗的候选靶基因奠定了理论基础。 展开更多

关键词 核干因子 细胞凋亡 短发夹状干扰RNA 白血病 HL-60细胞

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T7启动子介导体外构建Nucleostem in特异性短发夹状干扰RNA 被引量：4

3

作者 岳保红 朱晓燕 +5 位作者 孙玲 赵小强 陈艳丽 王清霞 刘帅 张钦宪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期731-735,共5页

目的体外构建合成针对Nuc leostem in(核干细胞因子,NS)基因的短发夹状干扰RNA(shRNA),用于进一步研究以该基因为靶目标、RNA干扰(RNA interference,RNA i)为手段的白血病基因治疗可行性。方法从Nuc leostem in基因的三个变异体cDNA共... 目的体外构建合成针对Nuc leostem in(核干细胞因子,NS)基因的短发夹状干扰RNA(shRNA),用于进一步研究以该基因为靶目标、RNA干扰(RNA interference,RNA i)为手段的白血病基因治疗可行性。方法从Nuc leostem in基因的三个变异体cDNA共同序列中筛选出2个3′端为AA的21个碱基片段作为shRNA合成的对应序列,9个碱基的5′-UCUCUUGAA-3′作为Loop环。以23个碱基的5-′GGATC-CTAATACGACTCACTATA-3′作为T7启动子(T7 Promoter)序列,构建shRNA的体外合成双链DNA模板,一条链5′端无AA,顺序为启动子、shRNA正义信息链、Loop环、shRNA反义信息链,共70个碱基;另一条是该链的互补链,5′端带有AA,共72个碱基。在T7 RNA聚合酶(T7 RNA polym erase)作用下合成shRNA,纯化后通过凝胶电泳比较灰度值确定shRNA浓度;shRNA作用于HL-60细胞,通过观察细胞形态变化和NS-mRNA抑制率验证干扰效果。结果体外合成的两条shRNA电泳无降解和弥散现象,浓度分别为5.24μmol.L-1和3.35μmol.L-1;干扰HL-60细胞48 h后,细胞密度和聚集程度下降,细胞之间大小相差悬殊,经shRNA-NS-2作用的HL-60细胞一部分由圆形变成了梭形并有明显的伪足;与对照组相比NS-mRNA抑制率分别达到37.82%和71.88%。结论体外成功构建和合成了两条针对Nu-c leostem in基因的shRNA,且抑制该基因表达的作用明显,shRNA-NS-2使HL-60细胞形态发生了改变。所合成的shR-NA-NS-2可作为进一步研究该基因和探索白血病的基因治疗的工具。 展开更多

关键词 T7启动子 核干细胞因子 体外构建 DNA模板 短发夹状干扰RNA

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HL-60细胞Nucleostemin表达下调对PI3K/AKT/mTOR通路相关分子的影响 被引量：3

4

作者 贾宇 魏园玉 +3 位作者 张帆 李曌博 刘帅 岳保红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期25-29,共5页

本研究旨在探讨白血病细胞中nucleostemin(NS)基因下调对其非依赖p53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR的相关分子表达的影响。通过重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至p53缺失型HL-60细胞以干扰NS基因的表达。用Real-time PCR技术评价转... 本研究旨在探讨白血病细胞中nucleostemin(NS)基因下调对其非依赖p53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR的相关分子表达的影响。通过重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至p53缺失型HL-60细胞以干扰NS基因的表达。用Real-time PCR技术评价转染后HL-60细胞NS基因的表达情况并检测干扰前后PI3K/AKT/mTOR信号通路中相关分子水平表达的变化。结果表明:重组慢病毒载体NS-RNAi-GV248成功感染了HL-60细胞,在荧光显微镜下可见GFP荧光水平较高,大于80%。Real-time PCR结果显示,NS基因mRNA的抑制率在HL-60细胞中为56.5%;干扰NS的表达后PI3K、AKT和GβL基因mRNA表达量分别为0.491±0.084、0.398±0.164、0.472±0.097,下调明显,与空白对照组(分别为1.002±0.171、1.000±0.411、1.001±0.206)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在HL-60细胞中PI3K/AKT/mTOR通路相关分子的变化与NS基因的下调呈正相关,两者的关联性为证明PI3K/AKT/mTOR信号通路可能是NS的一种非依赖p53作用途径提供了依据。 展开更多

关键词 NUCLEOSTEMIN PI3K AKT MTOR信号通路 HL-60细胞 p53缺失型

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支气管哮喘患者外周血单个核细胞TIPE2、TF的表达 被引量：6

5

作者 时光 赵俊伟 明亮 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2017年第6期685-689,共5页

目的:检测支气管哮喘患者外周血单个核细胞(PBMCs)肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-8样因子-2(TIPE2)、组织因子(TF)表达水平及二者的相关性,并探讨二者与哮喘控制水平的相关性。方法:108例哮喘患者根据哮喘控制水平分为未控制组53例,部分控制... 目的:检测支气管哮喘患者外周血单个核细胞(PBMCs)肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-8样因子-2(TIPE2)、组织因子(TF)表达水平及二者的相关性,并探讨二者与哮喘控制水平的相关性。方法:108例哮喘患者根据哮喘控制水平分为未控制组53例,部分控制组55例,另选择同时期健康体检者51人(健康对照组)。Western blot法检测3组患者PBMCs中TIPE2、TF的表达水平,Spearman秩相关分析二者的相关性,受试者工作曲线评估TIPE2和TF对支气管哮喘的诊断价值。结果:与部分控制组和健康对照组相比,未控制组PBMCs中TIPE2表达水平降低(P<0.01);与健康对照组相比,部分控制组PBMCs中TIPE2表达水平降低(P<0.01)。与健康对照组相比,部分控制组和未控制组PBMCs中TF表达水平升高(P<0.01),而二组间差异无统计学意义(P>0.05)。 展开更多

关键词 支气管哮喘 肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-8样因子-2 组织因子

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地塞米松对骨髓增生异常综合征患者原始细胞构成影响及其在诊断中的意义 被引量：2

6

作者 张帆 李曌博 +2 位作者 王宁宁 刘帅 岳保红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期144-149,共6页

目的:为了解地塞米松对骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓原始细胞构成变化的影响并探讨其在诊断MDS中的意义。方法:应用流式细胞术对30例MDS确诊患者骨髓细胞进行设门分析,其中10例分析前使用过地塞米松作为治疗组,另20例未使用地塞米... 目的:为了解地塞米松对骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓原始细胞构成变化的影响并探讨其在诊断MDS中的意义。方法:应用流式细胞术对30例MDS确诊患者骨髓细胞进行设门分析,其中10例分析前使用过地塞米松作为治疗组,另20例未使用地塞米松作为对照组,计算其比例并分析相关抗原的表达情况。结果:治疗组和对照组CD34^+细胞比例差异没有统计学意义(P>0.05)。地塞米松治疗组B淋巴早期细胞(CD34^+/CD19^+/CD10^+细胞)比例明显增高且髓系早期细胞(CD34^+/CD117^+细胞)占CD34^+细胞比例明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组与对照组粒细胞和单核细胞其他抗原表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:地塞米松使MDS患者骨髓中早期B淋巴细胞比例明显增高,髓系早期细胞比例明显降低,明显影响CD34^+原始细胞构成。 展开更多

关键词 骨髓增生异常综合征 地塞米松 流式细胞术 CD34细胞 原始细胞

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庆大霉素预防尿动力学检查后尿路感染作用探究 被引量：2

7

作者 文建国 李曼郁 +5 位作者 许盘龙 李婷婷 冯羡菊 贾亮花 吕宇涛 李胜云 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第6期883-885,共3页

尿动力学检查常用于评估下尿路功能。但是，其侵入性常会增加尿路感染发生的风险［1］。据报道［2-3］，尿动力学检查后尿路感染的发生率为1％～30％。许多医院为了预防检查引起的尿路感染，在尿动力学检查过程中常规使用抗生素。然而... 尿动力学检查常用于评估下尿路功能。但是，其侵入性常会增加尿路感染发生的风险［1］。据报道［2-3］，尿动力学检查后尿路感染的发生率为1％～30％。许多医院为了预防检查引起的尿路感染，在尿动力学检查过程中常规使用抗生素。然而，一些研究［4］显示使用抗生素并不能降低尿动力检查后尿路感染发生的风险。是否在膀胱测压过程中预防性应用抗生素仍有争议［1-3］。作者观察预防性使用庆大霉素膀胱灌注液灌注膀胱是否可以减少尿动力学检查后尿路感染及相关并发症的发生，为临床诊治提供参考。 展开更多

关键词 庆大霉素 尿路感染 尿动力检查

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HL-60细胞Nucleostemin表达下调对PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的影响 被引量：3

8

作者 贾宇 魏园玉 +3 位作者 李曌博 张帆 刘帅 岳保红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1592-1596,共5页

目的:探讨HL-60白血病细胞中核干细胞因子Nucleostemin(NS)表达下调对其非依赖P53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR中相关蛋白表达是否有影响。方法:采用重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至P53缺失型HL-60细胞中干扰NS的表达。用Western... 目的:探讨HL-60白血病细胞中核干细胞因子Nucleostemin(NS)表达下调对其非依赖P53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR中相关蛋白表达是否有影响。方法:采用重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至P53缺失型HL-60细胞中干扰NS的表达。用Western blot技术评价转染后HL-60细胞NS蛋白的表达水平并检测干扰前后PI3K/AKT/mTOR信号通路中相关蛋白水平的表达变化。结果:重组慢病毒载体NS-RNAi-GV248成功感染了HL-60细胞,在荧光显微镜下可见到GFP荧光表达较强(<80%)。Western blot结果显示,NS蛋白表达明显下调,干扰表达有效;干扰HL-60细胞中NS的表达后AKT、p-AKT、p70s6k、p-p70s6k蛋白变化不明显(t_1=2.31,P=0.074;t_2=3.62,P=0.069;t_3=1.60,P=0.251;t_4=2.72,P=0.113),而mTOR复合物中的GβL蛋白表达明显下调(t=15.01,P=0.002)。结论:HL-60细胞中NS蛋白可影响mTOR复合物中GβL蛋白的表达,PI3K/AKT/mTOR通路可能为NS非依赖P53作用途径之一。 展开更多

关键词 核干细胞因子 PI3K/AKT/mTOR信号通路 HL-60细胞 P53缺失型

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肠杆菌科细菌684株超广谱β内酰胺酶检测及药敏结果分析

9

作者 徐岷 王玉萍 冯羡菊 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第3期448-449,共2页

关键词 肠杆菌科 细菌 超广谱Β内酰胺酶 检测 药敏分析

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CD71作为增殖指标在血液肿瘤中的表达及与Ki-67的相关性分析 被引量：9

10

作者 魏园玉 张晓飐 +4 位作者 张帆 李曌博 王宁宁 刘帅 岳保红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期234-240,共7页

目的:本研究旨在探讨CD71作为增殖指标在血液肿瘤中的表达情况及与Ki-67的相关性,评价CD71替代Ki-67用于流式细胞术(FCM)检测血液肿瘤细胞增殖活性的可行性。方法:分别以细胞系和临床标本为研究对象:1以静止期成熟的B淋巴细胞作为对照,... 目的:本研究旨在探讨CD71作为增殖指标在血液肿瘤中的表达情况及与Ki-67的相关性,评价CD71替代Ki-67用于流式细胞术(FCM)检测血液肿瘤细胞增殖活性的可行性。方法:分别以细胞系和临床标本为研究对象:1以静止期成熟的B淋巴细胞作为对照,检测血液肿瘤细胞系的细胞周期以及CD71和Ki-67的表达情况,分析CD71的表达与细胞增殖活性和Ki-67表达的相关性;2以非血液病患者成熟B淋巴细胞作为对照,采用Ki-67/CD71/CD45/CD123、Ki-67/CD71/CD45/CD20或Ki-67/CD71/CD45/CD138抗体组合,分析临床标本中白血病细胞和骨髓瘤细胞CD71和Ki-67的表达情况和相关性。结果:1血液肿瘤细胞系CD71的表达情况:在髓系白血病细胞系中HL-60细胞CD71表达率为(99.77±0.064)%,NB4细胞CD71表达率为(99.23±0.12)%,THP-1细胞CD71表达率为(98.90±0.30)%,K562细胞CD71表达率为(97.03±0.15)%,在淋巴瘤细胞系中Raji细胞和M ino细胞CD71表达率分别为(99.35±0.21)%和(96.95±0.42)%,均明显高于对照组细胞(P<0.05);2血液肿瘤临床标本CD71的表达情况:在分化差的急性髓系白血病中CD71表达率为(51.50±19.31)%,在急性早幼粒细胞白血病(AML-M3)中CD71表达率为(35.71±14.02)%,在急性单核细胞白血病(AML-M5)中CD71表达率为(30.54±14.38)%,在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)和急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)中CD71表达率分别为(68.40±20.83)%和(39.67±18.27)%,在慢性淋巴细胞白血病(CLL)中CD71表达率为(1.32±0.33)%,在多发性骨髓瘤(MM)中CD71表达率为(55.49±18.15)%,除CLL细胞与对照组细胞差异无统计学意义(P>0.05)外,其余血液肿瘤细胞CD71表达率均高于对照组细胞(P<0.05)。3血液肿瘤细胞CD71阳性表达率和S期细胞比率(SPF)呈线性正相关(r=0.914,P<0.05),CD71和Ki-67阳性表达率呈线性正相关(r=0.894,r=0.904,P<0.05)。结论:CD71可以替代Ki-67作为FCM评估血液肿瘤细胞增殖活性的指标,在方法学上FCM检测CD71优于对Ki-67的检测。 展开更多

关键词 CD71 KI-67 血液肿瘤 细胞增殖活性

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多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中Blimp-1 mRNA的检测及其临床意义 被引量：3

11

作者 胡文坛 刘俊文 +1 位作者 刘红春 王婷婷 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1443-1448,共6页

目的:研究多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cell,BMMNC)中B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(B lymphocyte-induced maturation protein-1,Blimp-1)mRNA的表达情况,并探讨其临床意义。方法:采用qRT... 目的:研究多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cell,BMMNC)中B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(B lymphocyte-induced maturation protein-1,Blimp-1)mRNA的表达情况,并探讨其临床意义。方法:采用qRT-PCR检测39例初诊MM患者(MM组)和5例缺铁性贫血(iron deficiency anemia,IDA)患者(IDA组)治疗前BMMNC中Blimp-1 mRNA的表达水平,应用流式细胞术分析骨髓中浆细胞的性质和数量,并收集患者初始临床指标资料。将39例初诊MM患者分为2组,20例患者接受以硼替佐米为基础的BD化疗方案,19例患者接受传统的VAD化疗方案,两组患者年龄、性别、临床分期、临床分型无明显统计学差异。采集MM患者3个疗程后的骨髓标本,采用qRT-PCR检测患者BMMNC中Blimp-1 mRNA的表达。结果:IDA组和ISS(国际分期系统,international staging system)临床分期不同的初诊MM组BMMNC中Blimp-1 mRNA的相对表达水平分别为:IDA组(0.00047±0.00027),ISS I期(0.09543±0.02800),ISSⅡ期(0.13606±0.04162),ISSⅢ期(0.21202±0.03940),各组之间两两比较,差异均有统计学意义(P均<0.05),即MM患者BMMNC中Blimp-1 mRNA的相对表达水平随着疾病严重程度升高而升高。Blimp-1 mRNA与患者初诊临床指标相关性分析显示,Blimp-1mRNA的相对表达水平与患者骨髓中恶性浆细胞数量、血清中单克隆免疫球蛋白(monoclonal protein,M蛋白)、β_2微球蛋白(β_2-microglobulin,β_2-MG)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平呈正相关(r_(恶性浆细胞)=0.765,r_(M蛋白)=0.685,r_(β2-MG)=0.446,r_(LDH)=0.583,r_(CRP)=0.671,P均<0.05),与外周血血红蛋白含量(hemoglobin,Hb)呈负相关(r=-0.439,P<0.05),与年龄、血钙水平无明显相关(P>0.05)。MM患者经BD或VAD 3个疗程化疗后,M蛋白水平下降>50%的患者BMMNC中Blimp-1 mRNA水平显著低于M蛋白水平下降≤50%的患者(P<0.05)。两组MM患者化疗3个疗程后,BD组Blimp-1 mRNA表达水平显著低于VAD组(P<0.05)。结论:MM患者BMMNC中Blimp-1 mRNA的水平在反映初诊MM患者患病程度和体内肿瘤负荷方面具有一定意义。Blimp-1 mRNA水平变化与M蛋白变化可能具有一定关联,提示其可能用于评估治疗反应。抑制骨髓瘤细胞中Blimp-1 mRNA的表达,可能是硼替佐米发挥治疗效果的作用机制之一。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 BLIMP-1 MRNA 恶性浆细胞 肿瘤负荷 硼替佐米

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Nucleostemin表达下调对p53缺失型HL-60细胞自噬活性的影响 被引量：3

12

作者 魏园玉 李曌博 +3 位作者 张帆 王宁宁 刘帅 岳保红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期699-705,共7页

目的:结合前期基因芯片和生物信息学分析结果,探讨下调Nucleostemin(NS)表达对p53缺失型白血病HL-60细胞自噬活性的影响,为更深入研究NS非p53依赖性信号通路的关键节点提供依据。方法:在NS-RNAiGV248重组慢病毒载体下调NS表达的基础上,... 目的:结合前期基因芯片和生物信息学分析结果,探讨下调Nucleostemin(NS)表达对p53缺失型白血病HL-60细胞自噬活性的影响,为更深入研究NS非p53依赖性信号通路的关键节点提供依据。方法:在NS-RNAiGV248重组慢病毒载体下调NS表达的基础上,采用吖啶橙染色、Western blot和透射电镜技术,检测HL-60细胞自噬活性的变化。结果:重组慢病毒载体成功抑制了HL-60细胞中NS蛋白的表达;与空白对照组(3.1±0.28)%和阴性对照组(6.2±0.64)%相比,实验组HL-60细胞内酸性小体数量(22.4±0.76)%明显增高(P<0.05);与阴性对照组(1.010±0.039)和空白对照组(0.608±0.008)相比,实验组HL-60细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值(1.537±0.072)明显增高(P<0.05);与阴性对照组(4.2±1.2)和空白对照组(2.3±0.5)相比,实验组中HL-60细胞内自噬性结构的数量(8.7±3.1)明显增高(P<0.05)。结论:下调NS蛋白的表达可以增强p53缺失型HL-60细胞的自噬活性。 展开更多

关键词 NUCLEOSTEMIN HL-60细胞 非P53依赖性通路 自噬活性

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核干细胞因子基因沉默对HL-60细胞分化特征的影响 被引量：5

13

作者 岳保红 朱晓燕 +5 位作者 王清霞 刘帅 张功员 张秋堂 张慧 张钦宪 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第4期657-659,共3页

目的:探讨核干细胞因子(NS)特异性短发夹RNA(shRNA)沉默NS基因对白血病细胞HL-60分化的影响。方法:用体外合成的NS-shRNA转染HL-60细胞,Western blot检测转染细胞NS蛋白,Wright-Giemsa染色观察细胞形态学改变,流式细胞仪(FCM)测定细胞... 目的:探讨核干细胞因子(NS)特异性短发夹RNA(shRNA)沉默NS基因对白血病细胞HL-60分化的影响。方法:用体外合成的NS-shRNA转染HL-60细胞,Western blot检测转染细胞NS蛋白,Wright-Giemsa染色观察细胞形态学改变,流式细胞仪(FCM)测定细胞表面分化抗原变化,细胞髓过氧化物酶(MPO)和过碘酸-雪夫反应(PAS)测定细胞化学特征的变化。以转染无关shRNA序列的细胞作阴性对照,以未转染细胞作空白对照。结果:NS-shRNA转染的HL-60细胞NS蛋白较对照组降低;转染细胞细胞核和细胞质都出现了成熟和分化特征,分化抗原CD11b、CD33、CD14、CD64、HLA-DR增高,CD38降低,显示有向粒系继续成熟和向单核系重新分化的趋势;转染细胞内MPO活性增强,PAS反应增强。结论:阻断NS基因表达能促使HL-60细胞重分化。 展开更多

关键词 核干细胞因子 短发夹RNA 细胞分化 HL-60细胞

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骨髓瘤U266细胞中核干细胞因子NS与程序性细胞死亡配体PD-L1关联性的研究 被引量：1

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作者 李佳 高晓娟 +2 位作者 王亚奇 刘帅 岳保红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1894-1900,共7页

目的:探讨骨髓瘤U266细胞内Nucleostemin(NS)基因和程序性死亡配体-1(programmed deathligand-1,PD-L1)的关联性以及NS表达下调对骨髓瘤细胞的凋亡影响,评价NS、PD-L1关联性与MM细胞生物学行为改变的关系以及二者联合作为反映MM肿瘤细... 目的:探讨骨髓瘤U266细胞内Nucleostemin(NS)基因和程序性死亡配体-1(programmed deathligand-1,PD-L1)的关联性以及NS表达下调对骨髓瘤细胞的凋亡影响,评价NS、PD-L1关联性与MM细胞生物学行为改变的关系以及二者联合作为反映MM肿瘤细胞状态标志物的可行性。方法:通过NS-RNAi-GV248重组慢病毒下调U266细胞的NS基因表达;采用real-time PCR检测转染后NS、PD-L1及相关PI3K/AKT/mTOR通路基因变化;应用Western blot、流式细胞术检测NS及PD-L1蛋白表达;采用Annexin V-APC/7-AAD双染法检测敲除NS基因前后的U266细胞的凋亡变化。结果:在MOI=10条件下,NS-RNAi-GV248重组慢病毒转染U266细胞后,荧光显微镜下观察显示,转染效率达到75%以上;real-time PCR显示,与阴性对照组(1.002±0.026)相比,转染组(0.415±0.089)的NS、PD-L1及PI3K/AKT/mTOR基因的m RNA相对表达量明显减低(P<0.05);流式细胞术和Western blot结果表明,慢病毒转染后PD-L1蛋白表达量明显下调,U266细胞凋亡增加(P<0.05)。结论:骨髓瘤细胞U266中存在NS及PD-L1基因的异常高表达。下调NS基因表达后出现PD-L1基因及相关PI3K/AKT/mTOR通路基因表达的下调,说明二者引起的细胞生物学改变存在联动效应。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 NS PD-L1 基因敲除 慢病毒载体

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Nucleostemin下调联合雷帕霉素对HL-60细胞自噬与凋亡影响的初步研究 被引量：1

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作者 王亚奇 高晓娟 岳保红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1629-1634,共6页

目的:研究Nucleostemin(NS)下调联合雷帕霉素对HL-60细胞自噬和凋亡的影响并探讨其在HL-60细胞中的作用。方法:通过NS-RNAi-GV248重组慢病毒载体转染HL-60细胞后检测NS蛋白的表达。采用流式细胞术检测沉默NS和/或雷帕霉素处理24、48 h后... 目的:研究Nucleostemin(NS)下调联合雷帕霉素对HL-60细胞自噬和凋亡的影响并探讨其在HL-60细胞中的作用。方法:通过NS-RNAi-GV248重组慢病毒载体转染HL-60细胞后检测NS蛋白的表达。采用流式细胞术检测沉默NS和/或雷帕霉素处理24、48 h后HL-60细胞的凋亡变化;采用Western blot技术检测各组细胞中NS、LC3、p62、BCL-2、Bax蛋白的表达。结果:重组慢病毒载体成功下调HL-60细胞NS表达。经雷帕霉素处理后,细胞凋亡率均明显增加(P<0.05),且48 h凋亡更明显。与NS敲低组、雷帕霉素组相比,NS下调联合雷帕霉素组处理48 h后,其凋亡明显增加(P<0.05),LC3-II/LC3-I比值显著增加(P<0.05),p62蛋白表达下降更显著(P<0.05),并且BCL-2/Bax比值减低更明显(P<0.05)。结论:NS下调联合雷帕霉素可增强HL-60细胞的凋亡和自噬,并且其诱导HL-60细胞的凋亡可能与BCL-2、Bax蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 核干细胞因子 HL-60细胞 雷帕霉素 自噬 凋亡

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