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Notch1信号途径在食管鳞癌细胞株EC9706的作用研究
被引量：
11
1
作者
鲁照明
刘红涛
+2 位作者
许培荣
侯桂琴
薛乐勋
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第13期740-743,共4页
目的:研究Notch1基因在食管癌细胞株中的表达及其对食管鳞癌细胞EC9706凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。通过RT-PCR扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1,转染EC9706细胞,利用Western...
目的:研究Notch1基因在食管癌细胞株中的表达及其对食管鳞癌细胞EC9706凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。通过RT-PCR扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1,转染EC9706细胞,利用Western blotting检测转染pcDNA3.1-Notch1载体12h,24h,48h,72h的食管癌细胞株与转染空载体食管癌细胞株中Notch1的表达,并观察每一时期食管癌细胞株的凋亡情况。结果:在食管癌细胞株中Notch1基因低表达,此外,转染Notch1后的细胞株Notch1表达量与转染空载体相比有明显差异(F=80.442,P<0.05)。经组间两两比较,实验组食管癌细胞株的Notch1的表达量在12h时比对照组食管癌细胞株的表达量显著增高(P<0.01),前者约为后者的4.6倍。但48h至72h时Notch1表达量实验组与对照组食管癌细胞株无显著性差异(P>0.05)。进一步通过倒置显微镜发现48h至72h细胞出现大量凋亡的现象。上述结果说明12hNotch1表达量的增加,使食管癌细胞EC9706中的Notch1信号途径得以激活,该途径激活后导致48h到72h时的细胞大量凋亡。结论:Notch1在食管癌细胞中的激活引起细胞大量凋亡,提示Notch1基因有可能成为治疗食管癌的新靶点。
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关键词
NOTCH1
EC9706
免疫细胞化学
WESTERN
BLOTTING
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职称材料
Kringle5的真核植物细胞穿梭表达载体的构建
被引量：
1
2
作者
郑合明
薛乐勋
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2002年第2期156-159,共4页
目的 :构建含有目的基因kringle5的真核植物细胞穿梭表达载体。方法 :应用RT PCR方法 ,从正常人肝脏组织中获得kringle 5基因 ,测序后 ,再通过DNA重组技术 ,将kringle 5基因片段克隆到真核植物细胞表达载体pBI12 1和pCAMBIA330 1上。结...
目的 :构建含有目的基因kringle5的真核植物细胞穿梭表达载体。方法 :应用RT PCR方法 ,从正常人肝脏组织中获得kringle 5基因 ,测序后 ,再通过DNA重组技术 ,将kringle 5基因片段克隆到真核植物细胞表达载体pBI12 1和pCAMBIA330 1上。结果 :得到的kringle 5基因序列测定结果与文献相符 ,重组载体pB1k5和pC33k5经酶切鉴定正确 ,含有植物高效表达CaMV35S启动子。结论 :重组载体pB1k5和pC33k5不仅可以在大肠杆菌中稳定复制 。
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关键词
血管抑素
kringle5基因
穿梭表达载体
反转录PCR
启动子CaMV35S
真核植物细胞
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职称材料
人尿血管抑素测定方法的建立及在肿瘤患者中的应用
被引量：
1
3
作者
鲁照明
薛乐勋
董子明
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2004年第2期255-257,共3页
目的:建立一种测定人尿液中血管抑素的方法,并探讨其在肿瘤患者中测定的意义。方法:依据ELISA的原理和技术要求,以赖氨酸作固相包被物,血管抑素为标准品,抗入K1～3的单抗为特异性的一抗,制备测定血管抑素的ELISA试剂盒。用此方法测定40...
目的:建立一种测定人尿液中血管抑素的方法,并探讨其在肿瘤患者中测定的意义。方法:依据ELISA的原理和技术要求,以赖氨酸作固相包被物,血管抑素为标准品,抗入K1～3的单抗为特异性的一抗,制备测定血管抑素的ELISA试剂盒。用此方法测定40例健康人(正常对照组)、92例恶性肿瘤(31例肺癌、31例食管癌、30例乳癌)患者治疗前尿中血管抑素含量。结果:该ELISA方法检测人尿中血管抑素的检出范围为1～200μg/L。正常对照组中尿血管抑素含量为0～27.4μg/L,x±s(16.15±6.82)μg/L。3种肿瘤患者尿中血管抑素平均水平均高于正常对照组(P<0.05),肺癌、食管癌、乳癌的诊断符合率分别为77.4％、71.0％和70.0％,其间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:该方法操作方便,敏感性、特异性高;人尿中血管抑素含量检测可用于某些肿瘤的检出。
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关键词
人血管抑素
ELISA
肿瘤
尿
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职称材料
题名
Notch1信号途径在食管鳞癌细胞株EC9706的作用研究
被引量：
11
1
作者
鲁照明
刘红涛
许培荣
侯桂琴
薛乐勋
机构
郑州大学医学实验中心细胞生物研究室
出处
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第13期740-743,共4页
基金
河南省医学科技攻关计划项目( 编号: 20050009)
河南省外专局引智项目资助( 编号: 20064100144)
文摘
目的:研究Notch1基因在食管癌细胞株中的表达及其对食管鳞癌细胞EC9706凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。通过RT-PCR扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1,转染EC9706细胞,利用Western blotting检测转染pcDNA3.1-Notch1载体12h,24h,48h,72h的食管癌细胞株与转染空载体食管癌细胞株中Notch1的表达,并观察每一时期食管癌细胞株的凋亡情况。结果:在食管癌细胞株中Notch1基因低表达,此外,转染Notch1后的细胞株Notch1表达量与转染空载体相比有明显差异(F=80.442,P<0.05)。经组间两两比较,实验组食管癌细胞株的Notch1的表达量在12h时比对照组食管癌细胞株的表达量显著增高(P<0.01),前者约为后者的4.6倍。但48h至72h时Notch1表达量实验组与对照组食管癌细胞株无显著性差异(P>0.05)。进一步通过倒置显微镜发现48h至72h细胞出现大量凋亡的现象。上述结果说明12hNotch1表达量的增加,使食管癌细胞EC9706中的Notch1信号途径得以激活,该途径激活后导致48h到72h时的细胞大量凋亡。结论:Notch1在食管癌细胞中的激活引起细胞大量凋亡,提示Notch1基因有可能成为治疗食管癌的新靶点。
关键词
NOTCH1
EC9706
免疫细胞化学
WESTERN
BLOTTING
Keywords
Notch1 EC9706 Immunocytochemistry Western blotting
分类号
R735.1 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
Kringle5的真核植物细胞穿梭表达载体的构建
被引量：
1
2
作者
郑合明
薛乐勋
机构
郑州大学
医学
实验
中心
细胞
生物
学
研究室
出处
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2002年第2期156-159,共4页
基金
国家"九五"科技攻关基金资助项目 96 90 1 0 5 189
河南省重大科技攻关基金资助项目 0 12 2 0 3 2 5 0 0
文摘
目的 :构建含有目的基因kringle5的真核植物细胞穿梭表达载体。方法 :应用RT PCR方法 ,从正常人肝脏组织中获得kringle 5基因 ,测序后 ,再通过DNA重组技术 ,将kringle 5基因片段克隆到真核植物细胞表达载体pBI12 1和pCAMBIA330 1上。结果 :得到的kringle 5基因序列测定结果与文献相符 ,重组载体pB1k5和pC33k5经酶切鉴定正确 ,含有植物高效表达CaMV35S启动子。结论 :重组载体pB1k5和pC33k5不仅可以在大肠杆菌中稳定复制 。
关键词
血管抑素
kringle5基因
穿梭表达载体
反转录PCR
启动子CaMV35S
真核植物细胞
Keywords
angiostatin
kringle 5
shuttle expression vector
RT PCR
promoter CaMV 35S
分类号
R459.9 [医药卫生—治疗学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
人尿血管抑素测定方法的建立及在肿瘤患者中的应用
被引量：
1
3
作者
鲁照明
薛乐勋
董子明
机构
郑州大学
医学
实验
中心
细胞
生物
学
研究室
出处
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2004年第2期255-257,共3页
基金
河南省重大科技攻关基金资助项目 0122032500
河南省杰出人才创新基金资助项目 0221001900
文摘
目的:建立一种测定人尿液中血管抑素的方法,并探讨其在肿瘤患者中测定的意义。方法:依据ELISA的原理和技术要求,以赖氨酸作固相包被物,血管抑素为标准品,抗入K1～3的单抗为特异性的一抗,制备测定血管抑素的ELISA试剂盒。用此方法测定40例健康人(正常对照组)、92例恶性肿瘤(31例肺癌、31例食管癌、30例乳癌)患者治疗前尿中血管抑素含量。结果:该ELISA方法检测人尿中血管抑素的检出范围为1～200μg/L。正常对照组中尿血管抑素含量为0～27.4μg/L,x±s(16.15±6.82)μg/L。3种肿瘤患者尿中血管抑素平均水平均高于正常对照组(P<0.05),肺癌、食管癌、乳癌的诊断符合率分别为77.4％、71.0％和70.0％,其间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:该方法操作方便,敏感性、特异性高;人尿中血管抑素含量检测可用于某些肿瘤的检出。
关键词
人血管抑素
ELISA
肿瘤
尿
Keywords
Angiostatin
ELISA
neoplasm
urine
分类号
R446.12 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Notch1信号途径在食管鳞癌细胞株EC9706的作用研究
鲁照明
刘红涛
许培荣
侯桂琴
薛乐勋
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2007
11
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Kringle5的真核植物细胞穿梭表达载体的构建
郑合明
薛乐勋
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2002
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
人尿血管抑素测定方法的建立及在肿瘤患者中的应用
鲁照明
薛乐勋
董子明
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2004
1
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职称材料
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