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PEI/ASON纳米组装体对肺腺癌A549细胞增殖活性及其hTERT基因表达的影响
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作者 王志平 周建超 +1 位作者 张振中 付蕾 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期749-753,共5页
目的以聚乙烯亚胺多聚阳离子纳米载体(polyethylenimine,PEI)作为端粒酶逆转录酶(human telomerasereverse transcriptase,hTERT)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)载体转染A549细胞,研究其对A549细胞的增殖活性及hTE... 目的以聚乙烯亚胺多聚阳离子纳米载体(polyethylenimine,PEI)作为端粒酶逆转录酶(human telomerasereverse transcriptase,hTERT)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)载体转染A549细胞,研究其对A549细胞的增殖活性及hTERT mRNA表达的影响。方法采用MTT法检测PEI/ASODN纳米组装体对细胞的增殖作用情况;激光共聚焦显微镜检测5'-FITC标记的ASODN(FASODN)转染细胞后PEI/FASODN纳米组装体的细胞摄入情况;RT-PCR检测转染后hTERT mRNA的表达;免疫细胞化学技术检测端粒酶hTERT蛋白的表达;流式细胞术Annexin-V-FITC和PI双标法检测细胞凋亡情况;PEI/ASON-PEG-CNGR组装体动物体内分布实验观察NGR的肿瘤靶向作用。结果 PEI/ASODN纳米组装体转染细胞后产生良好的生长抑制作用;FASODN转染细胞后,PEI/FASODN组细胞内有大量荧光物质,而单纯FASODN组细胞内无明显荧光;RT-PCR检测结果表明PEI/ASODN纳米组装体作用于A549细胞72 h时,hTERTmRNA水平明显降低,与空白对照组相比有显著差异(P<0.05);细胞hTERT蛋白的表达也显著降低;转染72 h后PEI/ASODN组出现明显早期凋亡和晚期凋亡,凋亡率分别为36.53%和54.28%;动物体内分布实验表明PEI/ASON-PEG-CNGR具有良好的肿瘤靶向作用。结论 PEI介导的hTERT ASODN能有效抑制A549细胞增殖,降低hTERT mRNA水平从而抑制hTERT蛋白的表达,使细胞产生凋亡,对该细胞生长有明显抑制作用。 展开更多
关键词 聚乙烯亚胺 反义寡核苷酸 肺癌细胞系A549 端粒酶逆转录酶
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伐地考昔对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的抑制及放射增敏作用
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作者 黄静 梅家转 +1 位作者 刘桂举 臧利娜 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第21期2176-2180,共5页
目的探讨伐地考昔抑制人鼻咽癌CNE-2细胞增殖和增强其放射增敏的作用。方法根据实验设计的处理情况将CNE-2细胞分为6组:对照组(DMSO)、顺铂组(50μmol/L)、伐地考昔组(50μmol/L)、伐地考昔+顺铂组(50μmol/L伐地考昔+50μmol/L顺铂)、W... 目的探讨伐地考昔抑制人鼻咽癌CNE-2细胞增殖和增强其放射增敏的作用。方法根据实验设计的处理情况将CNE-2细胞分为6组:对照组(DMSO)、顺铂组(50μmol/L)、伐地考昔组(50μmol/L)、伐地考昔+顺铂组(50μmol/L伐地考昔+50μmol/L顺铂)、Wortmannin组(1μmol/L)和伐地考昔+Wortmannin组(50μmol/L伐地考昔+1μmol/L Wortmannin)(n=8)。采用MTT法检测CNE-2细胞的生长情况;Hoechst法检测细胞凋亡指数;流式细胞仪检测细胞周期;平板集落形成实验检测放射增敏效应;Western blot检测COX-2、Akt、p-Akt(Ser473)、NAG-1蛋白水平。结果①单纯50μmol/L伐地考昔处理可升高CNE-2细胞的增殖抑制率和凋亡指数、增强细胞的放射增敏,导致细胞G0/G1期增加、S期降低,COX-2、p-Akt、p-Akt/Akt降低,NAG-1蛋白水平上升,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);②与50μmol/L顺铂或1μmol/L Wortmannin(PI3K抑制剂)联合使用可增强其影响细胞周期、增殖抑制及放射增敏作用(P<0.05),且细胞G2/M期也降低;③50μmol/L顺铂处理不影响COX-2蛋白、Akt、p-Akt(Ser473)、NAG-1蛋白水平,与伐地考昔联用不影响伐地考昔对以上蛋白水平的改变(P>0.05);④1μmol/L Wortmannin可降低p-Akt、p-Akt/Akt,升高NAG-1水平,与伐地考昔联用可增强伐地考昔对p-Akt、p-Akt/Akt、NAG-1的改变作用。结论伐地考昔可能通过降低COX-2和PI3K/Akt/NAG-1来抑制人鼻咽癌CNE-2细胞的增殖、促进其凋亡及放射增敏。 展开更多
关键词 伐地考昔 CNE-2细胞 PI3K/AKT COX-2 抑制作用 放射增敏
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