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pCS^(2+)-FLASH重组质粒的构建及斑马鱼FLASH基因反义mRNA探针的制备
被引量：
2
1
作者
丁可军
何志旭
+3 位作者
舒莉萍
许威
姬牧远
杨小燕
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第10期1119-1120,共2页
目的构建斑马鱼pCS2+-FLASH重组质粒,制备斑马鱼FLASH反义mRNA探针。方法提取斑马鱼胚胎总RNA后经RT-PCR克隆斑马鱼FLASH基因片段,将得到的FLASH片段和pCS2+质粒用BamHⅠ及HindⅢ双酶切后插入pCS2+质粒,通过对重组质粒进行双酶切及插入...
目的构建斑马鱼pCS2+-FLASH重组质粒,制备斑马鱼FLASH反义mRNA探针。方法提取斑马鱼胚胎总RNA后经RT-PCR克隆斑马鱼FLASH基因片段,将得到的FLASH片段和pCS2+质粒用BamHⅠ及HindⅢ双酶切后插入pCS2+质粒,通过对重组质粒进行双酶切及插入片段序列测序鉴定后,经T3RNA体外转录体系合成DIG-FLASH基因反义mRNA探针。结果RT-PCR法扩增出长度为533bp的特异性产物,构建的pCS2+-FLASH重组质粒经酶切鉴定和测序结果与预期相符;用FLASH反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观察到FLASH在野生型斑马鱼神经系统中存在表达。结论成功构建了pCS2+-FLASH重组质粒及FLASH基因反义mRNA探针。
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关键词
斑马鱼
pCS^2+
FLASH
反义mRNA
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职称材料
题名
pCS^(2+)-FLASH重组质粒的构建及斑马鱼FLASH基因反义mRNA探针的制备
被引量：
2
1
作者
丁可军
何志旭
舒莉萍
许威
姬牧远
杨小燕
机构
贵阳医学院
儿科
教研室
郎溪县人民医院儿科
贵阳医学院组织工程与干细胞中心
贵阳医学院免疫教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第10期1119-1120,共2页
基金
国家自然科学基金面上项目(30960412)
贵州省科技基础条件平台项目([2009]4005)
贵州省优秀科技教育人才省长专项资金(S2008-4)
文摘
目的构建斑马鱼pCS2+-FLASH重组质粒,制备斑马鱼FLASH反义mRNA探针。方法提取斑马鱼胚胎总RNA后经RT-PCR克隆斑马鱼FLASH基因片段,将得到的FLASH片段和pCS2+质粒用BamHⅠ及HindⅢ双酶切后插入pCS2+质粒,通过对重组质粒进行双酶切及插入片段序列测序鉴定后,经T3RNA体外转录体系合成DIG-FLASH基因反义mRNA探针。结果RT-PCR法扩增出长度为533bp的特异性产物,构建的pCS2+-FLASH重组质粒经酶切鉴定和测序结果与预期相符;用FLASH反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观察到FLASH在野生型斑马鱼神经系统中存在表达。结论成功构建了pCS2+-FLASH重组质粒及FLASH基因反义mRNA探针。
关键词
斑马鱼
pCS^2+
FLASH
反义mRNA
分类号
R394-33 [医药卫生—医学遗传学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
pCS^(2+)-FLASH重组质粒的构建及斑马鱼FLASH基因反义mRNA探针的制备
丁可军
何志旭
舒莉萍
许威
姬牧远
杨小燕
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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