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BMP2重组慢病毒转染兔BMSCs黏附DBM支架的生物矿化研究 被引量：1
1
作者 宁寅宽 刘林志 +1 位作者 陈贤平 周次腊 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期497-502,共6页
目的探究BMP2重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附脱钙骨(DBM)支架体外构建转基因组织工程骨的生物矿化能力。方法密度梯度离心及贴壁培养法获取第5代兔BMSCs,用BMP2重组慢病毒转染细胞,通过RT-PCR检测目的基因的表达,利用倒... 目的探究BMP2重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附脱钙骨(DBM)支架体外构建转基因组织工程骨的生物矿化能力。方法密度梯度离心及贴壁培养法获取第5代兔BMSCs,用BMP2重组慢病毒转染细胞,通过RT-PCR检测目的基因的表达,利用倒置荧光显微镜观察细胞在DBM支架上的生长情况,借助扫描电镜和能谱分析观测细胞在DBM支架上的表面微观形貌及生物矿化能力。结果BMP2重组慢病毒成功转染兔BMSCs,RT-PCR显示转染后细胞能高效表达BMP2目的基因,在倒置荧光显微镜下观察见转染后细胞黏附在DBM支架上呈满天星样,并沿DBM支架孔隙内壁贴壁叠加生长、分裂增殖,扫描电镜下见细胞填满整个DBM支架孔隙,分泌大量细胞外基质,并在DBM支架表面形成凹凸不平的光泽结晶矿化物,能谱分析显示其钙磷比(Ca/P)为1.89±0.31,与正常骨组织成分相近(P>0.05)。结论BMP2重组慢病毒转染兔BMSCs黏附DBM支架构建的转基因组织工程骨成功完成了生物矿化过程,体现出较好的生物矿化能力。 展开更多
关键词 重组慢病毒载体 骨形态发生蛋白 骨髓间充质干细胞 基因治疗 生物矿化
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