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Rv2048c基因敲除对结核分枝杆菌药物敏感性的影响研究
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作者 李娜娜 王鸿 +4 位作者 田鹏 文继秀 杨丹 吴霞 兰远波 《中国防痨杂志》 北大核心 2025年第12期1621-1628,共8页
目的:探讨Rv2048c基因敲除对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)药物敏感性的影响。方法:本研究以MTB标准菌株(H37Rv-WT)为模版,基于同源重组原理构建Rv2048c基因敲除株(H37RvΔRv2048c)。通过固体培养、抗酸染色、扫描电镜... 目的:探讨Rv2048c基因敲除对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)药物敏感性的影响。方法:本研究以MTB标准菌株(H37Rv-WT)为模版,基于同源重组原理构建Rv2048c基因敲除株(H37RvΔRv2048c)。通过固体培养、抗酸染色、扫描电镜观察菌落形态、菌体大小、细胞壁完整性;绘制生长曲线评估生长速度;采用微孔板法药物敏感性试验测定最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);利用溴化乙锭染色法检测细胞壁通透性。比较H37Rv-WT与H37RvΔRv2048c在生物学特性、抗结核药物敏感性及细胞壁通透性方面的差异,进而分析Rv2048c基因对MTB药物敏感性的作用及其潜在机制。结果:成功构建了H37RvΔRv2048c;菌落形态由H37Rv-WT的粗糙型(R型)转变为H37RvΔRv2048c的光滑型(S型);两种菌体均呈棒状结构,细胞壁基本一致,H37RvΔRv2048c菌体长度变短;乙硫异烟胺(ethionamide,Eto)对H37RvΔRv2048c的MIC(1.25μg/ml)为Eto对H37Rv-WT的MIC(5.00μg/ml)的1/4;阿米卡星(amikacin,Am)对H37RvΔRv2048c的MIC(0.25μg/ml)为Am对H37Rv-WT的MIC(1.00μg/ml)的1/4;溴化乙锭染色后H37RvΔRv2048c的荧光强度(1.526 RFU)较H37Rv-WT(0.924 RFU)显著增高(t=16.960,P<0.001)。结论:Rv2048c基因的缺失可降低Eto和Am的MIC,该基因可能通过调控MTB细胞壁通透性影响MTB对Eto和Am的敏感性,为理解MTB耐药机制提供了新视角,并为增强Eto与Am疗效的研究提供了潜在靶点。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 基因敲除 微生物敏感性试验 研究
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