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同源域蛋白同源盒基因通过调控Wnt/β⁃catenin信号通路抑制胃癌细胞的增殖
1
作者
凌丽
张菁
+2 位作者
张宗敏
令狐熙涛
王钰莹
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2022年第20期2538-2544,共7页
目的探讨同源域蛋白同源盒基因(HOPX)在胃癌中的表达情况及调控胃癌细胞的增殖能力及其作用机制。方法采用Real time⁃PCR及Western blot检测HOPX在胃癌细胞和组织中的mRNA及蛋白表达水平;在胃癌细胞HGC27及BGC823中稳定过表达HOPX基因,...
目的探讨同源域蛋白同源盒基因(HOPX)在胃癌中的表达情况及调控胃癌细胞的增殖能力及其作用机制。方法采用Real time⁃PCR及Western blot检测HOPX在胃癌细胞和组织中的mRNA及蛋白表达水平;在胃癌细胞HGC27及BGC823中稳定过表达HOPX基因,通过CCK⁃8法、克隆形成实验、EdU法检测HOPX对胃癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测HOPX对胃癌细胞细胞周期的调控作用。另外将用于检测β⁃catenin/TCF/LEF可转录活性的荧光素酶报告质粒TOP flash和FOP flash转染胃癌细胞,使用双荧光素酶报告系统测定过表达HOPX对细胞内荧光素酶转录活性的影响。此外采用Western blot分别测定过表达HOPX对胃癌细胞内β⁃catenin、GSK⁃3β及p⁃GSK⁃3β蛋白表达水平的变化。进一步检测过表达HOPX后,胃癌细胞核内β⁃catenin蛋白表达水平及其下游靶基因CyclinD1的表达变化,以探讨HOPX影响胃癌细胞增殖的具体机制。结果Real time⁃PCR及Western blot结果显示HOPX在胃癌中的mRNA及蛋白表达水平均显著降低,HOPX过表达后可显著抑制胃癌细胞的增殖并抑制其细胞周期。Western blot结果表明过表达HOPX可通过抑制GSK3β的磷酸化水平促进β⁃catenin的降解,从而抑制β⁃catenin入核,进而下调下游靶基因CyclinD1的表达,达到抑制胃癌细胞的增殖能力。结论HOPX通过调控Wnt/β⁃catenin信号通路以抑制胃癌细胞的增殖。
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关键词
HOPX
胃癌
增殖
Wnt/β⁃catenin通路
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题名
同源域蛋白同源盒基因通过调控Wnt/β⁃catenin信号通路抑制胃癌细胞的增殖
1
作者
凌丽
张菁
张宗敏
令狐熙涛
王钰莹
机构
遵义
医科
大学
附属
医院
老年医学科
遵义
医科
大学
附属
医院
骨科
遵义医科大学附属医院细胞工程室
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2022年第20期2538-2544,共7页
基金
贵州省卫生计生委科学技术基金(编号:gzwjkj 2015⁃1⁃048)
遵义市科技计划(编号:遵义市科合社字(2018)82)。
文摘
目的探讨同源域蛋白同源盒基因(HOPX)在胃癌中的表达情况及调控胃癌细胞的增殖能力及其作用机制。方法采用Real time⁃PCR及Western blot检测HOPX在胃癌细胞和组织中的mRNA及蛋白表达水平;在胃癌细胞HGC27及BGC823中稳定过表达HOPX基因,通过CCK⁃8法、克隆形成实验、EdU法检测HOPX对胃癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测HOPX对胃癌细胞细胞周期的调控作用。另外将用于检测β⁃catenin/TCF/LEF可转录活性的荧光素酶报告质粒TOP flash和FOP flash转染胃癌细胞,使用双荧光素酶报告系统测定过表达HOPX对细胞内荧光素酶转录活性的影响。此外采用Western blot分别测定过表达HOPX对胃癌细胞内β⁃catenin、GSK⁃3β及p⁃GSK⁃3β蛋白表达水平的变化。进一步检测过表达HOPX后,胃癌细胞核内β⁃catenin蛋白表达水平及其下游靶基因CyclinD1的表达变化,以探讨HOPX影响胃癌细胞增殖的具体机制。结果Real time⁃PCR及Western blot结果显示HOPX在胃癌中的mRNA及蛋白表达水平均显著降低,HOPX过表达后可显著抑制胃癌细胞的增殖并抑制其细胞周期。Western blot结果表明过表达HOPX可通过抑制GSK3β的磷酸化水平促进β⁃catenin的降解,从而抑制β⁃catenin入核,进而下调下游靶基因CyclinD1的表达,达到抑制胃癌细胞的增殖能力。结论HOPX通过调控Wnt/β⁃catenin信号通路以抑制胃癌细胞的增殖。
关键词
HOPX
胃癌
增殖
Wnt/β⁃catenin通路
Keywords
HOPX
gastric cancer
proliferation
Wnt/β⁃catenin pathway
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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1
同源域蛋白同源盒基因通过调控Wnt/β⁃catenin信号通路抑制胃癌细胞的增殖
凌丽
张菁
张宗敏
令狐熙涛
王钰莹
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2022
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