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红系祖细胞在造血缺陷斑马鱼体内的移植被引量：6: 1; 作者李志操黄波 +5 位作者向文碧孙琮杰吴西军周艳华何志旭舒莉萍《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期84-89,共6页; 目的评估红系祖细胞在先天原始造血缺陷cloche^(-/-)突变体斑马鱼体内的移植效果。方法收集绿色荧光标记红系祖细胞的转基因系zTg(gata1:EGFP)斑马鱼胚胎,制备成单细胞悬液,经流式细胞仪分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,利用显微注射... 展开更多; 关键词红系祖细胞斑马鱼移植 cloche^-/-突变; 在线阅读下载PDF 职称材料

人红白血病斑马鱼异种模型的建立被引量：1: 2; 作者王一慧刘庆 +5 位作者杨小燕王念雪王猛舒莉萍何志旭吴西军《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第1期77-82,共6页; 目的利用斑马鱼胚胎建立人红白血病(HEL)细胞异种移植瘤模型,提供研究血液肿瘤的体内行为和实用药物测试的模型。方法将HEL细胞分为空白组和CM-DiI组,CM-DiI组用活细胞示踪剂进行标记;取野生型斑马鱼培育繁殖,产胚后将胚胎置于28℃孵育4... 展开更多; 关键词斑马鱼急性红白血病异种移植人红白血病细胞阿糖胞苷; 在线阅读下载PDF 职称材料

汉防己甲素联合化疗药物在斑马鱼体内逆转多药耐药的研究被引量：1: 3; 作者向文碧李志操 +4 位作者周栋珍周艳华吴西军何志旭舒莉萍《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第5期1-6,共6页; 目的探讨汉防己甲素对斑马鱼胚胎早期发育及多药耐药基因abcb4表达的影响及其机制。方法通过药物毒性实验分析汉防己甲素药液处理后斑马鱼胚胎的死亡率、孵化率、心率和畸形率情况。取斑马鱼胚胎设置分组:空白对照组、阿霉素药液处理组... 展开更多; 关键词汉防己甲素多药耐药 abcb4 斑马鱼; 在线阅读下载PDF 职称材料

rpl15在斑马鱼胚胎中的表达形式探究被引量：3: 4; 作者周唯君彭涛 +5 位作者周栋珍杨懿琛周艳华李化何志旭舒莉萍《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期9-15,共7页; 目的探究rpl15基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达形式。方法利用NCBI和Ensemble数据库进行rpl15基因的共线性分析和Rpl15蛋白质序列相似性分析,使用MEGA X软件绘制进化树;构建pCS2^(+)-rpl15重组质粒,再利用T3聚合酶制备地高辛标记的rpl1... 展开更多; 关键词斑马鱼 rpl15基因原位杂交基因表达反义mRNA 胚胎发育; 在线阅读下载PDF 职称材料

下调rpl15基因的表达抑制斑马鱼早期造血的发育: 5; 作者周唯君周栋珍 +5 位作者彭涛杨懿琛周艳华李化舒莉萍何志旭《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期1611-1618,共8页; 目的探究核糖体蛋白L15(ribosomal protein l15,rpl15)基因表达下调对斑马鱼早期造血发育的影响。方法设计并合成rpl15吗啉代反义寡核苷酸(morphilino antisense oligo,MO),通过显微注射到单细胞期斑马鱼(0~0.75 hpf)的受精卵中来下调rp... 展开更多; 关键词 rpl15 造血发育斑马鱼吗啉代反义寡核苷酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名红系祖细胞在造血缺陷斑马鱼体内的移植被引量：6: 1; 作者李志操黄波向文碧孙琮杰吴西军周艳华何志旭舒莉萍; 机构贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心临床医学院儿科学教研室贵州省再生医学重点实验室中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室遵义医科大学附属医院儿科学教研室; 出处《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期84-89,共6页; 基金黔教研合GZS[2016]02 黔科合J重大字[2015]2003 +3 种基金筑科合同[2017]5-18号黔科合平台人才[2017]5611 中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助(2018PT31048); 文摘目的评估红系祖细胞在先天原始造血缺陷cloche^(-/-)突变体斑马鱼体内的移植效果。方法收集绿色荧光标记红系祖细胞的转基因系zTg(gata1:EGFP)斑马鱼胚胎,制备成单细胞悬液,经流式细胞仪分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,利用显微注射技术将gata1^+细胞移植到42hpf的cloche^(-/-)突变体斑马鱼心脏中,采用体视荧光显微镜追踪观察移植后的红系祖细胞在cloche^(-/-)突变体斑马鱼中的表达情况。结果成功分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,并在移植后2 h可观察到携带绿色荧光的gata1^+细胞逐渐增殖扩散且16 h持续有绿色荧光表达。结论红系祖细胞有重建造血的潜力,为进一步研究红系祖细胞移植后的功能鉴定提供实验依据。; 关键词红系祖细胞斑马鱼移植 cloche^-/-突变; Keywords erythroid progenitor cells zebrafish transplantation cloche^-/- mutant; 分类号 R-33 [医药卫生]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人红白血病斑马鱼异种模型的建立被引量：1: 2; 作者王一慧刘庆杨小燕王念雪王猛舒莉萍何志旭吴西军; 机构贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心(中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室) 贵州医科大学儿科学教研室贵州医科大学附属医院呼吸与危重症医学科贵州医科大学免疫学教研室遵义医科大学附属医院儿科学教研室; 出处《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第1期77-82,共6页; 基金国家自然科学基金(编号:81760025) 贵州省教育厅青年科技人才成长项目(编号:黔教合KY字[2018]192号) 中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费2018年项目(编号:2018PT31048)。; 文摘目的利用斑马鱼胚胎建立人红白血病(HEL)细胞异种移植瘤模型,提供研究血液肿瘤的体内行为和实用药物测试的模型。方法将HEL细胞分为空白组和CM-DiI组,CM-DiI组用活细胞示踪剂进行标记;取野生型斑马鱼培育繁殖,产胚后将胚胎置于28℃孵育48 h至破膜,将破膜后斑马鱼分为空白对照组、PBS实验组、HEL实验组,将CM-DiI组细胞,通过显微注射方式移植到HEL实验组斑马鱼卵黄囊中,PBS实验组注射PBS,再将三组斑马鱼置于34℃温箱培养,通过体内外增殖实验及体内荧光观察等鉴定模型是否建立成功;将鉴定成功的斑马鱼进行阿糖胞苷药物暴露,分为50、100、200 nmol/L组及模型对照组,观察各组浓度药物暴露后异种移植瘤模型中白血病细胞的增殖及迁移情况。结果 CM-Dil组与空白组HEL细胞增殖状态相近,差异无统计学意义(P>0.05);通过体内外增殖实验证实了HEL细胞在斑马鱼体内出现了增殖,而HEL实验组斑马鱼存活量相对于空白对照组和PBS实验组降低(P<0.05);三个浓度的阿糖胞苷药物暴露组相对于模型对照组细胞增殖降低(P<0.05)。结论人急性红白血病HEL细胞移植入斑马鱼胚胎后可进行增殖,且增殖活动可被阿糖胞苷干预,证实异种移植瘤模型建立成功。; 关键词斑马鱼急性红白血病异种移植人红白血病细胞阿糖胞苷; Keywords zebrafish acute erythroleukemia xenograft human erythroleukemia cell cytarabine; 分类号 R733.71 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名汉防己甲素联合化疗药物在斑马鱼体内逆转多药耐药的研究被引量：1: 3; 作者向文碧李志操周栋珍周艳华吴西军何志旭舒莉萍; 机构贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省贵阳市妇幼保健院/贵阳市儿童医院贵州大学; 出处《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第5期1-6,共6页; 基金国家自然科学基金(31860325) 中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助(2018PT31048) 贵州省科技厅科技平台及人才团队计划([2017]5611)。; 文摘目的探讨汉防己甲素对斑马鱼胚胎早期发育及多药耐药基因abcb4表达的影响及其机制。方法通过药物毒性实验分析汉防己甲素药液处理后斑马鱼胚胎的死亡率、孵化率、心率和畸形率情况。取斑马鱼胚胎设置分组:空白对照组、阿霉素药液处理组、长春碱药液处理组、汉防己甲素药液处理组、汉防己甲素和阿霉素混合药液处理组及汉防己甲素和长春碱混合药液处理组,每组胚胎用药液处理至第5天后取50尾用于实验。通过实时荧光定量PCR检测abcb4基因的表达情况,罗丹明123实验检测胚胎的外排功能,分析耐药程度。结果低剂量汉防己甲素对斑马鱼胚胎毒性较低,高剂量汉防己甲素对胚胎孵化有抑制作用,并有致畸致死作用;实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比abcb4基因的mRNA在阿霉素和长春碱药液单独使用时表达增高,而在汉防己甲素联合阿霉素、长春碱使用时表达降低;罗丹明123实验结果显示,阿霉素和长春碱单独使用时斑马鱼体内产生耐药,而汉防己甲素联合阿霉素、长春碱使用时耐药程度降低。结论汉防己甲素对斑马鱼胚胎毒性较低,且汉防己甲素能逆转物阿霉素和长春碱的耐药作用,对提高治疗效果有重要意义。; 关键词汉防己甲素多药耐药 abcb4 斑马鱼; Keywords tetrandrine multidrug resistance abcb4 zebrafish; 分类号 R-33 [医药卫生]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名rpl15在斑马鱼胚胎中的表达形式探究被引量：3: 4; 作者周唯君彭涛周栋珍杨懿琛周艳华李化何志旭舒莉萍; 机构贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州大学; 出处《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期9-15,共7页; 基金国家自然科学基金(31860325) 贵州省科技计划项目(黔科合基础[2020]1Y092、黔科中引[2019]4008)。; 文摘目的探究rpl15基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达形式。方法利用NCBI和Ensemble数据库进行rpl15基因的共线性分析和Rpl15蛋白质序列相似性分析,使用MEGA X软件绘制进化树;构建pCS2^(+)-rpl15重组质粒,再利用T3聚合酶制备地高辛标记的rpl15反义RNA探针,用全胚胎原位杂交检测rpl15基因的mRNA水平的表达;通过Western blot检测24、48和72 hpf斑马鱼胚胎中Rpl15蛋白的表达。结果在进化过程中,rpl15基因相对保守。构建了pCS2^(+)-rpl15重组质粒,原位杂交结果显示在24 hpf,rpl15基因在斑马鱼的几乎所有细胞中广泛表达;到48 hpf,rpl15在中枢神经系统的表达最强并且在胰腺的表达也开始显现;72 hpf仍然可见rpl15在后脑中的表达以及胰腺、肝和肠道中的表达。Western blot结果显示24、48和72 hpf斑马鱼胚胎中Rpl15蛋白的相对表达量随时间增加而增多。结论系统观察了斑马鱼发育过程中rpl15的表达部位及表达水平的变化,为斑马鱼rpl15缺失模型的建立提供了实验基础。; 关键词斑马鱼 rpl15基因原位杂交基因表达反义mRNA 胚胎发育; Keywords zebrafish rpl15 gene in situ hybridization gene expression antisense RNA embryonic development; 分类号 R-33 [医药卫生]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名下调rpl15基因的表达抑制斑马鱼早期造血的发育: 5; 作者周唯君周栋珍彭涛杨懿琛周艳华李化舒莉萍何志旭; 机构贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室遵义医科大学附属医院儿科学教研室; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期1611-1618,共8页; 基金国家自然科学基金地区基金项目(31860325) 贵州省科技计划项目(黔科合基础〔2020〕1Y092)。; 文摘目的探究核糖体蛋白L15(ribosomal protein l15,rpl15)基因表达下调对斑马鱼早期造血发育的影响。方法设计并合成rpl15吗啉代反义寡核苷酸(morphilino antisense oligo,MO),通过显微注射到单细胞期斑马鱼(0~0.75 hpf)的受精卵中来下调rpl15的表达,通过qRT-PCR和Western blot技术验证下调rpl15基因表达的有效性。使用体式显微镜分别观察注射rpl15 MO(MO)组与野生型(WT)组的发育情况。O-dianisidine染色检测血红蛋白表达的情况,qRT-PCR检测红系特异性转录因子hbae3、hbbe1的表达变化。全胚原位杂交和qRT-PCR检测红系特异性转录因子gata1、髓系转录因子pu.1、粒系转录因子mpo、定向造血标志转录因子runx1和c-myb、原始祖细胞造血标志物scl和lmo2等早期造血发育过程的关键转录因子的表达变化。TUNEL实验检测造血组细胞的凋亡变化。结果显微注射rpl15 MO能显著下调斑马鱼rpl15的表达,与WT组相比,MO组表现出体节弯曲、发育迟缓、心包水肿等异常表型。MO组血红蛋白合成量与hbae3、hbbe1的表达量相较于WT组明显减少(P<0.05)。原位杂交及qRT-PCR结果表明,gata1的表达明显减少(P<0.05),pu.1、mpo、runx1、c-myb的表达无明显变化,scl的表达明显减少(P<0.01),lmo2的表达无明显变化。TUNEL实验显示造血祖细胞的凋亡无明显变化。结论下调rpl15的表达抑制了斑马鱼早期的造血发育,并可能与gata1和scl表达明显降低有关。; 关键词 rpl15 造血发育斑马鱼吗啉代反义寡核苷酸; Keywords rpl15 hematopoietic development zebrafish morpholino antisense oligo; 分类号 R-332 [医药卫生] R331.2 [医药卫生—人体生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	红系祖细胞在造血缺陷斑马鱼体内的移植	李志操黄波向文碧孙琮杰吴西军周艳华何志旭舒莉萍	《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心	2019	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人红白血病斑马鱼异种模型的建立	王一慧刘庆杨小燕王念雪王猛舒莉萍何志旭吴西军	《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	汉防己甲素联合化疗药物在斑马鱼体内逆转多药耐药的研究	向文碧李志操周栋珍周艳华吴西军何志旭舒莉萍	《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心	2020	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	rpl15在斑马鱼胚胎中的表达形式探究	周唯君彭涛周栋珍杨懿琛周艳华李化何志旭舒莉萍	《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心	2021	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	下调rpl15基因的表达抑制斑马鱼早期造血的发育	周唯君周栋珍彭涛杨懿琛周艳华李化舒莉萍何志旭	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料