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阿司匹林诱导人结肠癌细胞Caco-2凋亡与Lgr5的关系 被引量：2
1
作者 陈小燕 吴应强 +1 位作者 朱蓉 赵逵 《医药导报》 CAS 北大核心 2021年第8期1010-1016,共7页
目的研究阿司匹林对人结肠癌细胞株Caco-2的生长作用以及对Lgr5表达的影响,探讨其预防结肠癌发生的可能机制。方法运用噻唑蓝(MTT)比色法检测阿司匹林对Caco-2细胞存活率的影响;流式细胞术分析不同药物浓度和不同时间对Caco-2细胞凋亡... 目的研究阿司匹林对人结肠癌细胞株Caco-2的生长作用以及对Lgr5表达的影响,探讨其预防结肠癌发生的可能机制。方法运用噻唑蓝(MTT)比色法检测阿司匹林对Caco-2细胞存活率的影响;流式细胞术分析不同药物浓度和不同时间对Caco-2细胞凋亡的影响;采用实时-反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定各组阿司匹林干预不同时间后Caco-2细胞中Lgr5 mRNA表达;免疫组化Envison法检测阿司匹林对Lgr5蛋白在Caco-2细胞内定位变化。结果阿司匹林对Caco-2细胞增殖有抑制作用,且有明显的浓度和时间依赖性;对Caco-2细胞促凋亡作用(包括早期凋亡和总凋亡)呈明显的浓度和时间依赖性,不同浓度组和不同时间组与对照组比较均差异有统计学意义(均P<0.05);阿司匹林呈时间依赖性地抑制Caco-2细胞中Lgr5 mRNA的表达,各实验组与对照组比较均差异有统计学意义(均P<0.05);Lgr5蛋白在Caco-2细胞中大量表达,主要位于细胞质,少数定位于细胞膜,而细胞核不着色;5.0 mmol·L^(-1)组中Lgr5蛋白亚细胞定位与对照组相同,10.0 mmol·L^(-1)组和15.0 mmol·L^(-1)组可见Lgr5蛋白亚细胞定位发生了改变,除了细胞膜、细胞质有表达外,细胞核也有表达。结论阿司匹林通过抑制Lgr5基因的表达,并影响Lgr5蛋白亚细胞定位,呈时间和浓度依赖性地抑制体外培养的结肠癌Caco-2细胞的存活以及促进细胞凋亡,可能是阿司匹林防治结直肠癌的重要机制之一。 展开更多
关键词 阿司匹林 结肠癌 CACO-2 LGR5 肿瘤干细胞
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丹参提取物对高血压性心脏病大鼠神经免疫的调节作用初探 被引量：8
2
作者 吴应强 叶久茂 +2 位作者 范腾阳 吴进霞 陈小燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1826-1831,共6页
目的:探讨丹参提取物对高血压性心脏病(HHD)大鼠神经免疫的调节作用。方法:构建HHD大鼠模型,随机分为A组、B组、C组和D组,每组10只,另取10只健康大鼠记为对照组,A组和对照组腹腔注射生理盐水5 ml,B组、C组和D组分别腹腔注射0. 75 ml/mg... 目的:探讨丹参提取物对高血压性心脏病(HHD)大鼠神经免疫的调节作用。方法:构建HHD大鼠模型,随机分为A组、B组、C组和D组,每组10只,另取10只健康大鼠记为对照组,A组和对照组腹腔注射生理盐水5 ml,B组、C组和D组分别腹腔注射0. 75 ml/mg、1. 5 ml/mg、3. 0 ml/mg各5 ml丹参乙醇提取物溶液,注射持续4周。采用心脏超声诊断仪测定左心室收缩末期内径(LVESD)、舒张末期内径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF),采用尾动脉无创性血压测量收缩压(SBP)、舒张压(DBP);酶联免疫法测定外周血P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)、去甲肾上腺素(NE)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,流式细胞术检测外周血自然杀伤性细胞(NK)、T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)活性,计算CD4+/CD8+值。结果:五组所检测指标比较均有显著性差异(P<0. 05),A、B、C、D组LVEF、IL-10、SP、VIP、NK、CD4+/CD8+显著高于对照组(P<0. 05),LVEDD、LVESD、SBP、DBP、NE、AngⅡ、TNF-α显著低于对照组(P<0. 05);B、C、D组LVEF、IL-10、SP、VIP、NK、CD4+/CD8+显著高于A组(P<0. 05),LVEDD、LVESD、SBP、DBP、NE、AngⅡ、TNF-α显著低于A组,C、D组LVEF、IL-10、SP、VIP、NK、CD4+/CD8+显著高于B组,LVEDD、LVESD、SBP、DBP、NE、AngⅡ、TNF-α显著低于B组(P<0. 05);D组LVEF、IL-10、SP、VIP、NK、CD4+/CD8+显著高于C组(P<0. 05),LVEDD、LVESD、SBP、DBP、NE、AngⅡ显著低于C组(P<0. 05),C、D组TNF-α水平差异无统计学意义(P>0. 05)。结论:丹参提取物对HHD大鼠有改善心脏功能和降低血压作用,推测很可能通过调节神经免疫因子水平发挥作用。 展开更多
关键词 丹参提取物 高血压性心脏病 神经免疫调节
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长链非编码RNA HOTAIR靶向miR-138对脓毒症诱导的大鼠心肌炎症反应和氧化应激的影响及作用机制研究 被引量：9
3
作者 范腾阳 高冬梅 +2 位作者 喻荣华 柯迪 肖雪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期146-153,共8页
目的:探究同源盒基因转录反义RNA(HOTAIR)与miR-138对脓毒症诱导的大鼠心肌炎症反应和氧化应激的影响及作用机制。方法:将大鼠分为Control组、CLP组、siRNA+CLP组、si-HOTAIR+CLP组,构建大鼠CLP模型,PanoView b1500检测大鼠左心室收缩压... 目的:探究同源盒基因转录反义RNA(HOTAIR)与miR-138对脓毒症诱导的大鼠心肌炎症反应和氧化应激的影响及作用机制。方法:将大鼠分为Control组、CLP组、siRNA+CLP组、si-HOTAIR+CLP组,构建大鼠CLP模型,PanoView b1500检测大鼠左心室收缩压(LVSP)和左心室舒张末压(LVEDP),RT-PCR检测HOTAIR和miR-138表达水平,HE染色检测心肌病理损伤,试剂盒检测血清炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、心肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平,Western blot检测NF-κB信号通路蛋白表达水平;将心肌细胞分为Control组、LPS组、siRNA+LPS组、si-HOTAIR+LPS组、si-HOTAIR+LPS+inhibitor组,RT-PCR检测HOTAIR和miR-138表达水平,荧光素酶报告检测HOTAIR与miR-138靶向关系,MTT检测细胞活性,Hoechst检测细胞凋亡,试剂盒检测MDA和SOD的水平,Western blot检测NF-κB信号通路蛋白表达水平。结果:在动物实验中,与Control组比较,CLP组LVSP、细胞活性、miR-138、SOD水平显著降低,LVEDP、病理性改变、细胞凋亡率、HOTAIR、cTnⅠ、CK-MB、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA及NF-κB通路蛋白表达水平显著升高;与CLP组比较,si-HOTAIR+CLP组LVSP、细胞活性、miR-138、SOD水平显著升高,LVEDP、病理性改变、细胞凋亡率、HOTAIR、cTnⅠ、CK-MB、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA及NF-κB通路蛋白表达水平显著降低。在细胞实验中,与Control组比较,LPS组细胞活性、miR-138、SOD水平显著降低,细胞凋亡率、HOTAIR、MDA、NF-κB通路蛋白表达水平显著升高;与LPS组比较,si-HOTAIR+LPS组细胞活性、miR-138、SOD水平显著升高,细胞凋亡率、HOTAIR、MDA、NF-κB通路蛋白显著降低;与si-HOTAIR+LPS组比较,si-HOTAIR+LPS+inhibitor组细胞活性、SOD水平降低,细胞凋亡率、MDA、NF-κB通路蛋白表达水平升高。在荧光素酶报告实验中,与HOTAIR wt组比较,HOTAIR wt+miR-138 mimic组荧光素酶活性显著降低。结论:HOTAIR可以通过沉默miR-138,促进脓毒症诱导的大鼠心肌炎症反应和氧化应激,其作用机制与NF-κB信号通路激活有关。 展开更多
关键词 脓毒症 非编码RNA HOTAIR miR-138
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