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慢病毒介导的降钙素基因相关肽转染对大鼠骨髓间充质干细胞内皮分化的影响 被引量：4
1
作者 龙仙萍 汪松 +2 位作者 赵然尊 石蓓 敖竹君 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1515-1519,共5页
目的:研究慢病毒介导的降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)基因转染对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)内皮分化功能的影响。方法:用密度梯度离心结合贴壁法培养大鼠骨髓MSCs,携带CGRP的慢病毒... 目的:研究慢病毒介导的降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)基因转染对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)内皮分化功能的影响。方法:用密度梯度离心结合贴壁法培养大鼠骨髓MSCs,携带CGRP的慢病毒载体转染MSCs,未转染MSCs作为对照,应用ELISA法检测CGRP蛋白表达;实验分为转染Lenti-CGRP的MSCs(CGRP)组、转染Lenti-CGRP的MSCs+CGRP受体拮抗剂(CGRP8-37)组(CGRP+CGRP8-37)及未经转染的对照组。应用免疫细胞化学检测细胞CD31和Ⅷ因子相关抗原的表达以鉴定其分化能力;细胞计数法观察转染CGRP后MSCs增殖的影响;Matrigel实验观察转染CGRP对MSCs形成管腔样结构能力的影响。结果:MSCs转染CGRP基因经诱导分化后的CD31和Ⅷ因子相关抗原阳性细胞数量增多,与对照组相比有显著差异(P<0.05);转染CGRP组细胞数量增长较快,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);Matrigel实验显示转染CGRP组细胞微血管新生明显,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。而CGRP+CGRP8-37组上述作用明显被抑制。结论:转染CGRP基因能促进MSCs向内皮分化,并能促进内皮细胞增殖,在一定的条件下,可促进微血管新生。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 骨髓间充质干细胞 转染 内皮分化 血管生成
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降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞的心肌素表达及细胞炎症激活的作用 被引量：2
2
作者 龙仙萍 王艳 +2 位作者 汪松 石蓓 赵然尊 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第20期2027-2031,共5页
目的探讨降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对体外培养的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)心肌素表达及细胞炎症激活的影响。方法取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,根据不同的处... 目的探讨降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对体外培养的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)心肌素表达及细胞炎症激活的影响。方法取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,根据不同的处理方案,分为对照组、IL-1β组、CGRP组、心肌素高表达组、心肌素干扰组和CGRP8-37组(CGRP受体拮抗剂组)。Western blot检测不同组VSMCs中心肌素和IL-6蛋白表达水平。结果以IL-1β处理VSMCs后,细胞培养24、48、72 h时IL-6表达水平均高于基线水平(P<0.05),而心肌素水平无显著变化;以高表达心肌素的腺病毒载体转染VSMCs并给予IL-1β处理后,与单纯IL-1β处理比较,各时间点IL-6水平显著下降(P<0.05)。CGRP组中各个时间点VSMCs内心肌素水平较同时间点IL-1β组心肌素水平显著增加[24 h:(1.17±0.03)vs(0.25±0.03);48 h:(2.04±0.05)vs(0.19±0.01);72 h:(0.96±0.02)vs(0.28±0.02);P<0.05],而细胞内IL-6表达水平较同时间点IL-1β组水平显著降低[24 h:(0.23±0.01)vs(0.77±0.03);48 h:(0.28±0.02)vs(1.35±0.04);72 h:(0.20±0.02)vs(1.04±0.04);P<0.05]。心肌素干扰组VSMCs中CGRP处理后各个时间点细胞内IL-6水平较CGRP组显著升高[24 h:(1.74±0.04)vs(0.51±0.01);48 h:(1.68±0.03)vs(0.29±0.01);72 h:(0.98±0.02)vs(0.31±0.01);P<0.05],且CGRP8-37组与CGRP组比较也获得类似结果,而心肌素干扰组和CGRP8-37组中同时间点的细胞内IL-6水平无明显差异。结论 CGRP通过促进VSMCs心肌素的表达而抑制IL-1β诱导的细胞炎症激活蛋白IL-6表达,且这一作用是CGRP通过与其受体结合后实现的。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 降钙素基因相关肽 心肌素 白介素-6
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降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞心肌素表达及细胞表型改变的作用 被引量：2
3
作者 龙仙萍 邓文文 +4 位作者 汪松 王冬梅 盛瑾 石蓓 赵然尊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1360-1364,共5页
目的:研究降钙素基因相关肽(CGRP)对血管平滑肌细胞(VSMCs)心肌素表达的影响及对细胞表型改变的调节作用。方法:取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组(加入AngⅡ处理)、CGRP组(加入AngⅡ和CGR... 目的:研究降钙素基因相关肽(CGRP)对血管平滑肌细胞(VSMCs)心肌素表达的影响及对细胞表型改变的调节作用。方法:取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组(加入AngⅡ处理)、CGRP组(加入AngⅡ和CGRP处理)和CGRP8-37组(在AngⅡ和CGRP基础上加入CGRP8-37)。Western blot法检测VSMCs中心肌素及细胞表型标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和骨桥蛋白(OPN)表达情况。结果:在VSMCs培养中,细胞心肌素表达水平随着培养时间延长逐渐降低,细胞培养48 h和72h时心肌素表达水平较基线水平显著降低(P<0.05);而加入CGRP处理后,心肌素表达水平逐渐增加,与基线水平比较,加入CGRP培养后48 h和72 h时细胞心肌素水平显著增加(P<0.05)。同时,在VSMCs培养48 h时,AngⅡ组细胞心肌素水平较对照组下降(P<0.05),且α-SMA表达亦相应下降(P<0.05),而OPN表达水平显著增加(P<0.05);CGRP组VSMCs心肌素水平较AngⅡ组增加,伴随着α-SMA表达水平增加(P<0.05),相反地OPN表达水平下降(P<0.05);CGRP8-37组心肌素和α-SMA表达水平较CGRP+AngⅡ组降低(P<0.05),而OPN表达较CGRP组增加(P<0.05)。结论:CGRP通过促进VSMCs心肌素的表达而抑制细胞表型转换,使细胞维持收缩表型,且这一作用是CGRP通过与其受体结合后实现的。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 降钙素基因相关肽 心肌素 表型改变
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