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人IL-31的克隆表达及对表皮角化细胞的影响被引量：10: 1; 作者黄俊琼孙万邦 +4 位作者谢宇锋盛伟华缪竞诚杜联峰杨吉成《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期369-373,共5页; 目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PC... 展开更多; 关键词人IL-31 表皮角化细胞趋化因子趋化作用 STAT3; 在线阅读下载PDF 职称材料

ING4基因对人胃癌细胞SGC-7901生物行为的影响被引量：8: 2; 作者黄俊琼孙万邦 +1 位作者张海峰杨吉成《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期612-614,617,共4页; 目的:研究人ING4对人胃癌细胞SGC-7901的影响,探讨其作用机制。方法:将重组腺病毒质粒pAd-ING4用PacI线性化,经脂质体转染QBI-293A细胞,获得重组病毒Ad-ING4。Ad-ING4感染人SGC-7901细胞,RT-PCR及Western blot分析ING4和p21表达,MTT法检... 展开更多; 关键词 ING4 AD-ING4 人SGC-7901细胞 P21; 在线阅读下载PDF 职称材料

IL-31单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立被引量：3: 3; 作者董革辉魏培 +5 位作者黄俊琼杜青波岳欢杜文胜谭艳芳孙万邦《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期495-498,共4页; 目的:制备抗人IL-31单克隆抗体,建立ELISA检测体系。方法:采用合成免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗IL-31单克隆抗体,用HRP标记单克隆抗体,ELISA和Western blot法检测抗体的亚类、滴度和特异性;采用ELISA技术制备IL-31检测试... 展开更多; 关键词 IL-31 单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

儿童新甲型流感疫苗远期特异性CD8^+记忆T细胞的表型特征被引量：1: 4; 作者陈珺汝夏洪波 +4 位作者庄雪芬郭锦锦唐艳丽姚新生孙万邦《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期396-400,共5页; 目的:探讨儿童新甲型(H1N1)流感疫苗接种后远期外周血疫苗特异性CD8^+记忆T细胞的特征。方法:选择31例于2009年12月~2010年1月接种甲型H1N1流感疫苗的3~6岁儿童,抽取外周静脉血5 ml,分离淋巴细胞加入甲型H1N1流感疫苗进行培养,并设对照... 展开更多; 关键词儿童新甲型(H1N1)流感疫苗记忆T细胞远期免疫免疫记忆; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人IL-31的克隆表达及对表皮角化细胞的影响被引量：10: 1; 作者黄俊琼孙万邦谢宇锋盛伟华缪竞诚杜联峰杨吉成; 机构苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室遵义医学院珠海校区免疫学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期369-373,共5页; 文摘目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PCR和双酶切鉴定,并进行序列测定。将重组质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和Western blot分析rhIL-31在CHO细胞中的表达。用Ni2+树脂纯化his融合蛋白,用不同剂量rhIL-31刺激HaCaT细胞,利用Transwell穿孔板检测HaCaT细胞培养上清对外周血单个核细胞的趋化作用,荧光定量PCR检测rhIL-31对HaCaT表达趋化因子的影响,Western blot检测STAT3磷酸化。结果成功获得全长人IL-31基因,测序正确,经双酶切、PCR和序列测定鉴定,真核表达质粒构建正确,可在CHO细胞中表达;该目的蛋白刺激人表皮角化细胞HaCaT,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞表达趋化因子MDC、TARC、I-309;细胞STAT3磷酸化增加。结论IL-31作用于正常人表皮角化细胞,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞趋化因子表达增加,细胞STAT3磷酸化增加,提示IL-31可通过STAT3发挥作用。; 关键词人IL-31 表皮角化细胞趋化因子趋化作用 STAT3; Keywords Human IL-31 Chemokines Chemotaxis STAT3; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ING4基因对人胃癌细胞SGC-7901生物行为的影响被引量：8: 2; 作者黄俊琼孙万邦张海峰杨吉成; 机构遵义医学院珠海校区免疫学教研室苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期612-614,617,共4页; 文摘目的:研究人ING4对人胃癌细胞SGC-7901的影响,探讨其作用机制。方法:将重组腺病毒质粒pAd-ING4用PacI线性化,经脂质体转染QBI-293A细胞,获得重组病毒Ad-ING4。Ad-ING4感染人SGC-7901细胞,RT-PCR及Western blot分析ING4和p21表达,MTT法检测Ad-ING4对细胞生长的影响,激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡。结果:Ad-ING4感染后,SGC-7901细胞中有ING4 mRNA和蛋白质表达,细胞生长受到明显抑制,与野生型SGC-7901细胞相比,p21表达水平增高,细胞凋亡率明显增高,P<0.05。结论:ING4可通过上调p21表达发挥抑制SGC-7901细胞生长、诱导细胞凋亡的作用。; 关键词 ING4 AD-ING4 人SGC-7901细胞 P21; Keywords ING4 Ad-ING4 Human SGC-7901 cells P21; 分类号 R73-3 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名IL-31单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立被引量：3: 3; 作者董革辉魏培黄俊琼杜青波岳欢杜文胜谭艳芳孙万邦; 机构遵义医学院第三附属医院骨科遵义医学院珠海校区免疫学教研室遵义医学院附属医院检验科; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期495-498,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.81260266) 贵州省科技攻关项目(No.黔科合NY20063039号) 贵州省优秀科技教育人才省长专项资金项目(No.黔省专合200951号); 文摘目的:制备抗人IL-31单克隆抗体,建立ELISA检测体系。方法:采用合成免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗IL-31单克隆抗体,用HRP标记单克隆抗体,ELISA和Western blot法检测抗体的亚类、滴度和特异性;采用ELISA技术制备IL-31检测试剂盒,并对自制试剂盒进行评价。结果:获得了两株稳定产生抗IL-31单克隆抗体的杂交瘤细胞,抗体亚类均为IgG3,抗体特异性好,杂交瘤细胞诱生的腹水抗体效价达106。试剂盒检测灵敏度为5.726 pg/ml,检测IL-1、IL-6、TNF-α、RF的P/N值均小于2.1,为阴性,靶抗原IL-31的检测结果为阳性(P/N值=13.76);自制试剂盒检测特应性皮炎血清IL-31水平为(532.83±90.39)pg/ml,对照组血清IL-31水平为(103.31±19.17)pg/ml,皮炎组明显高于对照组,有显著性差异(P<0.001)。结论:成功制备了抗IL-31单克隆抗体,建立的ELISA试剂盒可用于临床检测IL-31。; 关键词 IL-31 单克隆抗体; Keywords IL-31 mAb ELISA; 分类号 R392-33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名儿童新甲型流感疫苗远期特异性CD8^+记忆T细胞的表型特征被引量：1: 4; 作者陈珺汝夏洪波庄雪芬郭锦锦唐艳丽姚新生孙万邦; 机构深圳市龙岗区妇幼保健院儿童保健科遵义医学院珠海校区免疫学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期396-400,共5页; 基金深圳市龙岗区科技计划医疗卫生项目(201406093001035) 国家自然科学基金项目(81441048); 文摘目的:探讨儿童新甲型(H1N1)流感疫苗接种后远期外周血疫苗特异性CD8^+记忆T细胞的特征。方法:选择31例于2009年12月~2010年1月接种甲型H1N1流感疫苗的3~6岁儿童,抽取外周静脉血5 ml,分离淋巴细胞加入甲型H1N1流感疫苗进行培养,并设对照组,用流式细胞仪检测细胞表面分子的表达,同时以CCK-8法检测细胞增殖,计算细胞增殖指数。结果:外周血PBMC中CD8^+T细胞在实验组和对照组分别是13.41%与9.41%,P>0.05。CD8^+初始T细胞在两组的比例均高达80%上;CD8^+记忆T细胞在两组占17%~19%;记忆T细胞分中央型和效应型记忆T细胞,两个亚群检测结果:CCR7和CD62L单阳性记忆T细胞亚群在实验组占比明显低于对照组的占比,P<0.05。应用CCK-8法检测疫苗刺激后抗原特异性增殖,检测结果见细胞增殖指数大于0.8的仅为51.16%,大于1.0在本研究中没有。结论:31例儿童外周血PBMC中CD8^+T细胞占比少,初始T细胞CD45R+均较高,具有抗原再刺激后再应答的基础;甲型H1N1流感疫苗可以诱导抗原特异性记忆CD8^+T细胞的产生,但数量不多,其中大多数为中央型记忆CD8^+T细胞;细胞增殖指数结果表明疫苗特异性细胞增殖不佳;提示对该疫苗的远期疫苗特异性CD8^+T细胞免疫记忆不理想。; 关键词儿童新甲型(H1N1)流感疫苗记忆T细胞远期免疫免疫记忆; Keywords Children H1N1 vaccine Immune vaccine Memory T cell Immunization long-term Immune memory; 分类号 R392.1 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人IL-31的克隆表达及对表皮角化细胞的影响	黄俊琼孙万邦谢宇锋盛伟华缪竞诚杜联峰杨吉成	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	10	在线阅读下载PDF 职称材料
2	ING4基因对人胃癌细胞SGC-7901生物行为的影响	黄俊琼孙万邦张海峰杨吉成	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2008	8	在线阅读下载PDF 职称材料
3	IL-31单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立	董革辉魏培黄俊琼杜青波岳欢杜文胜谭艳芳孙万邦	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2014	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	儿童新甲型流感疫苗远期特异性CD8^+记忆T细胞的表型特征	陈珺汝夏洪波庄雪芬郭锦锦唐艳丽姚新生孙万邦	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料