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酶联免疫法检测PAF受体RNA的聚合酶链反应产物
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作者 姚新生 孙万邦 +1 位作者 蒋汉文 邹桂平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期415-417,共3页
目的 :建立PCR ELISA法检测PAF受体RNA。方法 :提取 2 0例银屑病病人和 2 0例正常对照组血液单个核细胞标本中的总RNA ,用双标记的PAF R(Biotion与Digoxin标记 )及 β actin(Biotin与Fluorescein标记 )引物进行PT PCR ,用ELISA检测PCR产... 目的 :建立PCR ELISA法检测PAF受体RNA。方法 :提取 2 0例银屑病病人和 2 0例正常对照组血液单个核细胞标本中的总RNA ,用双标记的PAF R(Biotion与Digoxin标记 )及 β actin(Biotin与Fluorescein标记 )引物进行PT PCR ,用ELISA检测PCR产物 ,用传统的琼脂糖凝胶电泳对照。结果 :ELISA法和琼脂糖凝胶电泳法对 β actin检测结果均为阳性 ;ELISA法检测PAF R ,2 0例病人标本均为阳性 ,2 0例对照组 16例阳性 ;琼脂糖凝胶电泳法检测PAF R ,2 0例病人标本 18例阳性 ,2 0例对照组 16例阳性。结论 :PCR ELISA引物双标记法检测PAF R操作简单 ,有较高的敏感性。 展开更多
关键词 酶联免疫法 检测 PAF受体 RNA 聚合酶链反应 银屑病
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正常人外周血αβ T细胞TCR β链CDR3多态性和长度分析 被引量:16
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作者 胡云良 杨介钻 +1 位作者 倪莉 姚新生 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期492-498,共7页
采用免疫扫描谱型分析技术,分析正常人外周血T细胞TCRβ链CDR3的多态性和长度分布.提取6例正常人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell-PBMC)的总RNA,逆转录成cDNA,以24个TCR BV基因家族为上游引物,共同的TCR BC基因为... 采用免疫扫描谱型分析技术,分析正常人外周血T细胞TCRβ链CDR3的多态性和长度分布.提取6例正常人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell-PBMC)的总RNA,逆转录成cDNA,以24个TCR BV基因家族为上游引物,共同的TCR BC基因为下游引物(荧光标记),6例样品PCR产物的基因扫描分析表明,24个TCRBV家族的CDR3谱型分析在1.5%琼脂糖凝胶电泳图上显示1个模糊条带.序列测定结果显示,各TCR BV家族的CDR3谱型均超过8个条带.GeneScan分析证明,正常人外周血T细胞的24个TCR BV家族的CDR3谱型为标准的高斯分布,各家族的CDR3表达频率相近,呈现不同的CDR3多态性和不同的CDR3长度.多数TCR BV家族产物为框架内重排(相邻2个PCR产物相差3个碱基),少数TCR BV家族表现为两个峰群的重排.该研究对正常人TCRβ链CDR3谱系的详细分析将为T细胞应答、TCR重组等研究提供基础.利用免疫谱型分析技术能监测到TCR CDR3谱型分布特征和表达频率的变化. 展开更多
关键词 T淋巴细胞受体 互补决定区3 免疫扫描谱型分析 基因扫描
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