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核苷磷酸化酶酶活力检测方法的建立 被引量:1
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作者 唐艳 吴涛 +1 位作者 王成 孟月 《中国调味品》 CAS 北大核心 2021年第5期147-150,160,共5页
建立了一种核苷磷酸化酶酶活的检测方法,解决了工业化磷酸化酶质量无法判定的难题。建立核苷磷酸化酶的反应体系,以10 g/L肌苷、10 g/L三聚磷酸钠为底物,最适反应温度40℃,pH 4.5,反应10 min,使肌苷在磷酸化酶的作用下生成肌苷酸二钠(I... 建立了一种核苷磷酸化酶酶活的检测方法,解决了工业化磷酸化酶质量无法判定的难题。建立核苷磷酸化酶的反应体系,以10 g/L肌苷、10 g/L三聚磷酸钠为底物,最适反应温度40℃,pH 4.5,反应10 min,使肌苷在磷酸化酶的作用下生成肌苷酸二钠(IMP)。通过高效液相色谱法(HPLC)测定IMP的生成量,液相色谱条件:采用C18色谱柱,以0.02 mol/L磷酸二氢钾∶乙腈为99.5∶0.5(V/V)为流动相,1 mL/min等度洗脱,40℃,紫外检测器(λ=254 nm),进样量2μL。此方法测定结果准确,回收率>99.5%,重现性好,RSD<0.5%。核苷磷酸化酶酶活检测方法的建立能精准地判定酶液产品指标,准确地计算酶添加量,解决了酶催化反应终点无法判定的问题。 展开更多
关键词 磷酸化酶 酶活力 肌苷 肌苷酸二钠(IMP) 高效液相色谱法(HPLC)
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