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p16基因克隆及其对结肠癌细胞SW480生长的抑制作用
被引量：
2
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作者
孟庆凯
张菁茹
王辉
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期744-747,共4页
目的探讨p16基因对结肠癌细胞生长的抑制作用。方法采用亚克隆技术将p16基因克隆入真核表达载体pEGFP-N3中,Lipofectamine法将p16基因转染入结肠癌细胞株SW480。采用MTT法检测未转染细胞(SW480组)、转染空质粒细胞(SW480-GFP组)和转染p1...
目的探讨p16基因对结肠癌细胞生长的抑制作用。方法采用亚克隆技术将p16基因克隆入真核表达载体pEGFP-N3中,Lipofectamine法将p16基因转染入结肠癌细胞株SW480。采用MTT法检测未转染细胞(SW480组)、转染空质粒细胞(SW480-GFP组)和转染p16细胞(SW480-p16组)培养24、48和72 h后细胞的增殖率;Real-Time PCR和Western blotting分别检测3组细胞的p16、CDK4、cyclin D1 mRNA和蛋白的表达情况。结果 p16基因克隆入真核表达载体,并成功转染结肠癌细胞后,在基因和蛋白质水平均有外源性p16基因表达,与SW480组比较,相对表达量均有显著增加(P<0.01)。MTT检测结果显示:培养48 h和72 h后,SW480-p16组的细胞相对增殖率均显著低于SW480组和SW480-GFP组(P<0.01)。Real-Time PCR检测结果显示:SW480-p16组的p16 mRNA相对表达量接近SW480-GFP组的2.38倍,接近SW480细胞的2.59倍,差异具有统计学意义(P<0.01);SW480-p16组的cyclin D1 mRNA相对表达量明显低于SW480组和SW480-GFP组细胞(P<0.05),而CDK4mRNA的相对表达量略低于SW480组和SW480-GFP组,差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting检测结果显示:与SW480-GFP组和SW480组比较,SW480-p16组的P16蛋白表达量明显升高;而CDK4和cyclin D1蛋白表达量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 p16基因转染入结肠癌细胞,具有抑制癌细胞生长的功能。
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关键词
P16基因
克隆
结肠癌细胞
D型细胞周期蛋白
周期蛋白依赖性蛋白激酶4
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题名
p16基因克隆及其对结肠癌细胞SW480生长的抑制作用
被引量：
2
1
作者
孟庆凯
张菁茹
王辉
机构
辽宁省肿瘤医院肠外科
出处
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期744-747,共4页
基金
辽宁省自然科学基金(20092071)~~
文摘
目的探讨p16基因对结肠癌细胞生长的抑制作用。方法采用亚克隆技术将p16基因克隆入真核表达载体pEGFP-N3中,Lipofectamine法将p16基因转染入结肠癌细胞株SW480。采用MTT法检测未转染细胞(SW480组)、转染空质粒细胞(SW480-GFP组)和转染p16细胞(SW480-p16组)培养24、48和72 h后细胞的增殖率;Real-Time PCR和Western blotting分别检测3组细胞的p16、CDK4、cyclin D1 mRNA和蛋白的表达情况。结果 p16基因克隆入真核表达载体,并成功转染结肠癌细胞后,在基因和蛋白质水平均有外源性p16基因表达,与SW480组比较,相对表达量均有显著增加(P<0.01)。MTT检测结果显示:培养48 h和72 h后,SW480-p16组的细胞相对增殖率均显著低于SW480组和SW480-GFP组(P<0.01)。Real-Time PCR检测结果显示:SW480-p16组的p16 mRNA相对表达量接近SW480-GFP组的2.38倍,接近SW480细胞的2.59倍,差异具有统计学意义(P<0.01);SW480-p16组的cyclin D1 mRNA相对表达量明显低于SW480组和SW480-GFP组细胞(P<0.05),而CDK4mRNA的相对表达量略低于SW480组和SW480-GFP组,差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting检测结果显示:与SW480-GFP组和SW480组比较,SW480-p16组的P16蛋白表达量明显升高;而CDK4和cyclin D1蛋白表达量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 p16基因转染入结肠癌细胞,具有抑制癌细胞生长的功能。
关键词
P16基因
克隆
结肠癌细胞
D型细胞周期蛋白
周期蛋白依赖性蛋白激酶4
Keywords
p16 gene
clone
colon cancer cells
cyclin D1
cyclin dependent kinase 4
分类号
R735.35 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
p16基因克隆及其对结肠癌细胞SW480生长的抑制作用
孟庆凯
张菁茹
王辉
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
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