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中药茜草抗氧化、抗炎、抗肿瘤不同药用部位精准研究 被引量:17
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作者 李慧 包永睿 +2 位作者 王帅 李天娇 孟宪生 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2019年第3期401-407,共7页
目的:研究和比较茜草根、茎、叶、花及果的抗氧化、抗炎、抗肿瘤活性,明确茜草发挥特定药效的部位,为茜草资源合理应用提供科学依据。方法:采用HPLC法建立茜草根、茎、叶、花、果的指纹图谱;采用二苯代苦味酰基自由基(DPPH)、2,2-连氮(3... 目的:研究和比较茜草根、茎、叶、花及果的抗氧化、抗炎、抗肿瘤活性,明确茜草发挥特定药效的部位,为茜草资源合理应用提供科学依据。方法:采用HPLC法建立茜草根、茎、叶、花、果的指纹图谱;采用二苯代苦味酰基自由基(DPPH)、2,2-连氮(3-乙基苯并噻唑啉-6磺酸)二氨盐自由基(ABTS)法,以半数清除浓度(EC50)评价茜草各部位醇提物抗氧化活性;采用脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞建立炎症模型,以NO、IL-6炎性因子评价茜草各部位抗炎活性;采用噻唑蓝法(MTT),以抑制率评价茜草各部位醇提物对人肝癌HepG2细胞增殖的影响。结果:茜草各部位HPLC指纹图谱在色谱峰数量及相对峰面积方面存在较大差异,通过化学对照品比对出12种化学成分;茜草根醇提物对肝肿瘤细胞的抑制作用最显著,抗炎效果最好,茜草花醇提物抗氧化活性最高。结论:茜草不同部位化学成分群存在差异,差异的化学成分群是茜草不同部位抗氧化、抗炎、抗肿瘤药效显著差异的重要因素,本实验为茜草各药用部位的进一步深入研究及临床合理应用提供参考。 展开更多
关键词 茜草 指纹图谱 抗氧化 抗炎 抗肿瘤 精准药用部位
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中药仙鹤草不同药用部位的体外药效学研究 被引量:12
2
作者 田露露 包永睿 +3 位作者 王帅 李天娇 刘金瑛 孟宪生 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2019年第3期408-412,共5页
目的:研究仙鹤草药材不同药用部位的体外抗氧化、抗肿瘤、抗凝血活性,为生药不同部位的合理应用奠定实验基础。方法:采用HPLC色谱法建立仙鹤草不同药用部位的指纹图谱;采用MTT比色法研究仙鹤草不同药用部位对人肝癌细胞株HepG2细胞、人... 目的:研究仙鹤草药材不同药用部位的体外抗氧化、抗肿瘤、抗凝血活性,为生药不同部位的合理应用奠定实验基础。方法:采用HPLC色谱法建立仙鹤草不同药用部位的指纹图谱;采用MTT比色法研究仙鹤草不同药用部位对人肝癌细胞株HepG2细胞、人胃癌细胞株HGC-27细胞、人结肠癌细胞株Caco-2细胞增殖作用的影响;采用2,2’-联氮-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法检测仙鹤草不同药用部位的抗氧化能力;采用ELISA法测定仙鹤草不同药用部位对小鼠凝血酶原(PT)指标的影响。结果:仙鹤草不同药用部位的指纹图谱之间存在明显差异,根、茎、叶、花均显示不同程度抗肿瘤、抗氧化、抗凝血药效,其中茎对HepG2、HGC-27、Caco-2三种癌细胞株的增殖抑制作用强于根、叶、花;叶、花清除DPPH、ABTS自由基的能力强于根、茎;茎、叶降低小鼠血浆凝血酶原水平的能力强于根、花。结论:仙鹤草不同药用部位的抗氧化、抗肿瘤、抗凝血药效存在差异,为仙鹤草药材以药效为导向的不同药用部位的合理使用提供实验依据,为生药不同部位的精准应用奠定实验基础。 展开更多
关键词 仙鹤草 指纹图谱 抗肿瘤 抗氧化 抗凝血
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基于微流控芯片技术橙皮苷抗肺肿瘤作用机制研究 被引量:9
3
作者 樊佳新 王帅 +2 位作者 孟宪生 包永睿 李天娇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1260-1265,共6页
目的探究橙皮苷诱导人肺癌细胞A549凋亡的作用机制。方法基于微流控芯片技术采用Hoechst 33342/PI染色法检测橙皮苷对肺癌细胞A549凋亡坏死的影响;流式细胞术检测橙皮苷对肺癌细胞周期及凋亡的影响;实时荧光定量PCR技术检测相关基因VEGF... 目的探究橙皮苷诱导人肺癌细胞A549凋亡的作用机制。方法基于微流控芯片技术采用Hoechst 33342/PI染色法检测橙皮苷对肺癌细胞A549凋亡坏死的影响;流式细胞术检测橙皮苷对肺癌细胞周期及凋亡的影响;实时荧光定量PCR技术检测相关基因VEGF、PI3K及PTEN的表达;Western blot技术检测橙皮苷诱导肺癌细胞中PI3K-Akt信号通路相关蛋白PI3K、Akt、PTEN及凋亡蛋白Bcl-2、周期蛋白Cyclin B1的表达。结果橙皮苷作用于细胞G_0/G_1期及S期,阻滞细胞分裂,并呈现浓度依赖性诱导肺癌细胞凋亡,其细胞凋亡坏死率由正常对照组的(6.7±0.6)%增至(27.9±1.1)%;经橙皮苷诱导后的肺癌细胞中VEGF和PI3K基因表达相对降低,抑癌基因PTEN表达相对增加。Western blot结果显示,经橙皮苷诱导的肺癌细胞中凋亡蛋白Bcl-2及周期蛋白Cyclin B1相对表达降低,PI3K-Akt信号通路蛋白Akt表达量与对照组比较明显减少,PI3K蛋白表达量相对增加,PTEN表达量无明显变化。结论橙皮苷可能是通过干扰PI3K-Akt信号通路,阻碍肿瘤细胞的分裂并促进凋亡蛋白的产生,从而诱导肺癌细胞A549凋亡。 展开更多
关键词 橙皮苷 肺癌细胞A549 微流控芯片 实时荧光定量PCR PI3K-AKT信号通路 CYCLIN B1 Bcl-2 细胞凋亡
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中药小蓟不同药用部位体外抗炎、促凝血的作用研究 被引量:4
4
作者 王鹤辰 包永睿 +3 位作者 王帅 李天娇 刘金瑛 孟宪生 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2019年第3期413-418,共6页
目的:研究小蓟不同部位化学成分的差异与抗炎、促凝血病症疗效关系,研究生药不同部位的精准应用。方法:使用HPLC色谱法建立不同部位的指纹图谱,MTT法测定不同部位提取物对炎症细胞RAW264.7增值的抑制作用,ELISA法测定不同部位提取物对... 目的:研究小蓟不同部位化学成分的差异与抗炎、促凝血病症疗效关系,研究生药不同部位的精准应用。方法:使用HPLC色谱法建立不同部位的指纹图谱,MTT法测定不同部位提取物对炎症细胞RAW264.7增值的抑制作用,ELISA法测定不同部位提取物对小鼠凝血酶原(PT)指标的影响,并使用灰色关联软件,将色谱峰的峰面积与抗炎、凝血酶原指标相关联,得到各个成分的贡献率。结果:小蓟根、茎、叶、花中的成分种类与含量均有不同。在体外抗炎药效研究中,小蓟花的效果最好,对炎症细胞RAW264.7的抑制率达到63.25%。小蓟根次之,小蓟叶与茎对炎症细胞的抑制作用不大。用ELISA法测定小鼠血浆中凝血酶原指标,小蓟花对指标影响最大,叶次之,茎与根对指标变化影响不大。灰色关联度计算软件结果显示,绿原酸、橙皮苷、咖啡酸、蒙花苷对抑制炎症细胞增值(抗炎)的相关程度分别为0.7250,0.5249,0.5105,0.5096。与升高凝血酶原指标(止血)的相关程度分别为0.5982,0.5088,0.5037,0.5034。其关联程度与其他成分相比,差距较大。结论:小蓟不同部位和抗炎、促凝血病症的药效存在差异,明确了生药小蓟不同部位的精准应用。 展开更多
关键词 小蓟 指纹图谱 抗炎 凝血酶原(PT) 质量标志物
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葛根异黄酮类成分对缺氧复氧损伤心肌细胞保护作用的研究 被引量:12
5
作者 包永睿 王帅 +2 位作者 杨欣欣 孟宪生 蔡琳 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1514-1517,共4页
目的建立葛根异黄酮类成分的HPLC指纹图谱,分析其对心肌细胞缺氧复氧损伤保护作用的相关性。方法HPLC-TOF-MS法对葛根异黄酮各指纹峰进行辨认,并考察不同剂量葛根异黄酮给药组对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用,然后采用灰色关联分... 目的建立葛根异黄酮类成分的HPLC指纹图谱,分析其对心肌细胞缺氧复氧损伤保护作用的相关性。方法HPLC-TOF-MS法对葛根异黄酮各指纹峰进行辨认,并考察不同剂量葛根异黄酮给药组对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用,然后采用灰色关联分析法将峰面积和细胞存活率药效数据相关联。结果从HPLC指纹图谱中鉴定出7个葛根异黄酮类成分,分别为葛根素、3'-羟基葛根素、葛根素木糖苷、3'-甲氧基葛根素、葛根素-7-木糖苷、大豆苷和大豆苷元,这些成分的药效并无很大差异,相关系数最大值葛根素(0.761 4)与最小值大豆苷(0.670 8)之间相差不到0.1。结论葛根异黄酮保护缺氧复氧损伤心肌细胞的作用可能是通过多组分协同而发挥疗效。 展开更多
关键词 葛根异黄酮 HPLC 心肌细胞 缺氧复氧损伤 灰色关联分析法 相关性
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防己生物碱类成分提取纯化工艺研究 被引量:15
6
作者 杨欣欣 包永睿 +3 位作者 王帅 孟宪生 朱瑞卿 朱明香 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1306-1309,共4页
目的优化防己治疗湿热痹证生物碱类成分的提取、纯化工艺,确定最佳提取、纯化工艺相关技术参数,为防己药材的合理利用及开发奠定实验基础。方法以粉防己碱、防己诺林碱的量和干膏收率的综合指标为考察指标,采用单因素和正交试验设计法... 目的优化防己治疗湿热痹证生物碱类成分的提取、纯化工艺,确定最佳提取、纯化工艺相关技术参数,为防己药材的合理利用及开发奠定实验基础。方法以粉防己碱、防己诺林碱的量和干膏收率的综合指标为考察指标,采用单因素和正交试验设计法优化相关提取工艺参数;采用大孔吸附树脂法,对纯化工艺参数进行考察,筛选并确定最佳纯化工艺。结果防己生物碱类成分最佳提取工艺为8倍量70%乙醇回流提取3次,每次3 h;最佳纯化工艺为选用AB-8型号树脂,3倍柱体积水除杂,8倍量90%乙醇,药材树脂用量比1∶1(g/mL),以粉防己碱、防己诺林碱的量计,纯化后纯度约为50%。结论此工艺方法先进合理,适合工业生产,具有简便、快速、准确等优点,为防己药材的进一步研究及开发奠定一定的基础。 展开更多
关键词 防己 粉防己碱 防己诺林碱 提取工艺 纯化工艺
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基于微流控芯片技术建立缺血再灌注心肌损伤模型 被引量:4
7
作者 孙佳琳 庞磊 +2 位作者 王帅 孟宪生 包永睿 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期710-714,共5页
基于微流控芯片技术建立体外大鼠缺血再灌注(I/R)心肌细胞损伤模型并验证其适用性,该模型为研究各种心血管药物以及新药快速、有效筛选提供基础。本实验采用软光刻技术和模塑法制作一种扇形微流控芯片,芯片中培养心肌细胞并进行细胞活... 基于微流控芯片技术建立体外大鼠缺血再灌注(I/R)心肌细胞损伤模型并验证其适用性,该模型为研究各种心血管药物以及新药快速、有效筛选提供基础。本实验采用软光刻技术和模塑法制作一种扇形微流控芯片,芯片中培养心肌细胞并进行细胞活力检测,通过缺血台氏液建立I/R损伤模型;利用瑞氏-吉姆萨染液检测模型中心肌细胞形态变化;通过ELISA试剂盒检测模型中损伤指标含量变化;最后采用心肌损伤治疗药物葛根素验证该I/R损伤模型的适用性。实验结果表明,芯片中心肌细胞活力接近98%以上;与空白组相比,I/R损伤模型中心肌细胞发生明显凋亡变化,损伤指标CK-MB、LDH蛋白分泌量显著增加;葛根素组与模型组比较,细胞凋亡形态缓解,CK-MB、LDH蛋白分泌量显著降低,I/R损伤模型的适用性良好。基于微流控芯片技术建立的体外大鼠I/R心肌细胞损伤模型成功,本研究为微流控芯片技术在心血管修复新药开发领域开拓一种新思路和新方法。 展开更多
关键词 微流控芯片技术 缺血再灌注 心肌损伤模型 葛根素
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基于HepG2体外细胞培养的旋覆花抗肿瘤有效组分的提取工艺 被引量:5
8
作者 黄一凡 王帅 +1 位作者 孟宪生 包永睿 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期450-453,共4页
目的优选旋覆花抗肿瘤有效组分的提取工艺。方法采用正交实验设计,对影响提取工艺的3个因素(提取时间、提取次数、乙醇用量)进行考察,以肿瘤抑制率为考察指标来优选最佳提取工艺。同时结合层次分析法,优选以总黄酮含有量和出膏率为综... 目的优选旋覆花抗肿瘤有效组分的提取工艺。方法采用正交实验设计,对影响提取工艺的3个因素(提取时间、提取次数、乙醇用量)进行考察,以肿瘤抑制率为考察指标来优选最佳提取工艺。同时结合层次分析法,优选以总黄酮含有量和出膏率为综合评价指标的权重系数及其范围,并采用Pearson相关性分析对其进行验证。结果最佳工艺条件为20倍量55%乙醇,回流提取3次,每次1 h。以总黄酮含有量和出膏率为指标的综合权重系数范围为0.75~0.90、0.10~0.25。结论该优化工艺在保证药效的前提下,简化了考察指标,避免了复杂的操作,可为其他中药材有效组分提取工艺的优选提供了思路和方法。 展开更多
关键词 旋覆花 抗肿瘤 正交设计 层次分析 抑制率 权重系数
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消化性溃疡的研究进展 被引量:71
9
作者 杨艺 孟宪生 《世界中医药》 CAS 2017年第4期951-955,共5页
消化性溃疡是临床常见的消化性疾病之一,发病率、复发率均较高。临床上根据消化性溃疡的发病机制、病理特点、临床表现不同,其治疗方案也有所不同,并且中医与现代医学对消化性溃疡的认识及治疗也各有不同。随着中药事业的不断发展,利用... 消化性溃疡是临床常见的消化性疾病之一,发病率、复发率均较高。临床上根据消化性溃疡的发病机制、病理特点、临床表现不同,其治疗方案也有所不同,并且中医与现代医学对消化性溃疡的认识及治疗也各有不同。随着中药事业的不断发展,利用现代科学技术的理论、方法和手段对中药复方的药效物质、作用机制以及质量控制进行系统研究,为实现中医药现代化提供了新思路。笔者通过阅读近几年来有关消化性溃疡的相关文献,对消化性溃疡的研究进展作一综述,为消化性溃疡的有效治疗以及相关药物的研究提供参考。 展开更多
关键词 消化性溃疡 病因病机 治疗 研究进展
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气滞胃痛颗粒治疗胃溃疡的谱效关系研究 被引量:14
10
作者 李天娇 王帅 +1 位作者 孟宪生 包永睿 《世界科学技术-中医药现代化》 2015年第1期103-108,共6页
目的:研究气滞胃痛颗粒全时段多波长信息融合图谱及其与体外抗溃疡药效的相关性,并探讨其抗溃疡的药效学基础。方法:采用拉丁超立方抽样方法将气滞胃痛颗粒中的单味中药材按一定配伍比例组合,通过Matlab软件获得全时段多波长融合指纹图... 目的:研究气滞胃痛颗粒全时段多波长信息融合图谱及其与体外抗溃疡药效的相关性,并探讨其抗溃疡的药效学基础。方法:采用拉丁超立方抽样方法将气滞胃痛颗粒中的单味中药材按一定配伍比例组合,通过Matlab软件获得全时段多波长融合指纹图谱,以峰面积转化成的化学成分含量为指标,同时将六味药材的配伍组合进行抗胃溃疡体外药效实验,运用层次分析法得到权重系数对药效进行综合评价。将药效学信息与各组融合谱的化学信息通过灰色关联分析法进行相关性分析,再通过神经网络进行验证,最终得到谱效关系。结果:气滞胃痛颗粒具有明显的抗溃疡作用,运用灰关联度分析法得到了20个色谱峰与抗溃疡活性密切相关,以这20个色谱峰量化峰面积作为输入项,建立了气滞胃痛颗粒抗溃疡药效的神经网络模型。结论:通过系统分析气滞胃痛颗粒中组分与药效的谱效关系,明确了其抗溃疡的活性成分,对气滞胃痛颗粒的深层次研究具有重大的意义。 展开更多
关键词 气滞胃痛颗粒 谱效关系 灰色关联度法 抗溃疡 神经网络
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综合权重相关分析优选鸡血藤抗肝肿瘤组分的提取工艺 被引量:4
11
作者 潘虹 包永睿 +1 位作者 孟宪生 王帅 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2413-2417,共5页
目的优选鸡血藤抗肝肿瘤有效组分的提取工艺,为其生产利用提供可靠依据。方法采用正交设计试验方法,选取提取时间、料液比、提取次数、乙醇体积分数为考察因素,以药效为指标,优选提取工艺,再测定总黄酮含有量、芒柄花素含有量和出膏率... 目的优选鸡血藤抗肝肿瘤有效组分的提取工艺,为其生产利用提供可靠依据。方法采用正交设计试验方法,选取提取时间、料液比、提取次数、乙醇体积分数为考察因素,以药效为指标,优选提取工艺,再测定总黄酮含有量、芒柄花素含有量和出膏率。然后,通过对这三项指标赋予不同权重所得的多组综合评分与药效指标(细胞抑制率)进行相关度分析,确定能反映药效的指标及其权重范围。结果鸡血藤有效组分的最佳提取工艺为50%乙醇加热回流提取2次,料液比1∶30,提取时间1.5 h。总黄酮和芒柄花素含有量的最佳权重系数范围分别为0.6~1和0~0.4。结论该工艺条件下,细胞抑制率、总黄酮提取率及芒柄花素含有量均比较高,表明该方法合理、提取工艺稳定可行。 展开更多
关键词 鸡血藤 抗肝肿瘤 提取工艺 正交设计 总黄酮 芒柄花素
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车前草不同药用部位抗炎、抗肿瘤、抗氧化的活性研究 被引量:33
12
作者 崔琳琳 包永睿 +3 位作者 王帅 李天娇 刘金瑛 孟宪生 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2019年第3期395-400,共6页
目的:探究车前草不同药用部位抗炎、抗肿瘤及抗氧化作用活性差异,为进一步明确车前草不同药用部位的合理使用,扩大车前草临床用药,更好地开发利用车前草资源提供理论参考。方法:采用高效液相色谱法,以乙腈-0.2%甲酸水溶液为流动相进行... 目的:探究车前草不同药用部位抗炎、抗肿瘤及抗氧化作用活性差异,为进一步明确车前草不同药用部位的合理使用,扩大车前草临床用药,更好地开发利用车前草资源提供理论参考。方法:采用高效液相色谱法,以乙腈-0.2%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,建立车前根、车前叶、车前子及除去根、叶、子剩余部位的指纹图谱;采用脂多糖(LPS)诱导小鼠Raw 264.7细胞炎症模型,噻唑蓝(MTT)法测定细胞活力,Griess法测定细胞分泌一氧化氮(NO)的水平检测车前草不同药用部位抗炎活性;采用MTT法检测车前草不同药用部位抗肿瘤活性;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2’-联氮-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法检测车前草不同药用部位抗氧化活性。结果:车前草不同药用部位指纹图谱既有相似性,又存在一定差异性。药效学数据显示,车前草不同药用部位均具有较好的抗炎、抗肿瘤及抗氧化活性,其中抗炎和抗肿瘤活性车前叶活性最高,车前草剩余部位大于车前根,车前子活性相对较弱;抗氧化活性车前叶最高,车前根活性较低。结论:本研究明确了车前草不同药用部位醇提物指纹图谱及不同药用部位的抗炎、抗肿瘤及抗氧化活性差异,为进一步扩大车前草药材临床用药以及针对不同疾病合理利用不同药用部位精准用药研究提供一定的实验依据,为车前草药用资源的高效合理利用及药用新资源的开发提供理论依据。 展开更多
关键词 车前草 药用部位 指纹图谱 抗炎 抗肿瘤 抗氧化
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知母不同药用部位体外抗肿瘤、抗炎及抗氧化的作用研究 被引量:21
13
作者 张亚楠 王帅 +3 位作者 包永睿 李天娇 刘金瑛 孟宪生 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2019年第3期424-430,共7页
目的:比较知母药材不同药用部位体外抗肿瘤、抗炎及抗氧化的作用,为知母进一步的合理应用和开发提供参考。方法:采用HPLC色谱法建立知母药材不同药用部位的指纹图谱,并进行相似度评价;采用MTT法研究知母不同药用部位对人胃癌HGC-27细胞... 目的:比较知母药材不同药用部位体外抗肿瘤、抗炎及抗氧化的作用,为知母进一步的合理应用和开发提供参考。方法:采用HPLC色谱法建立知母药材不同药用部位的指纹图谱,并进行相似度评价;采用MTT法研究知母不同药用部位对人胃癌HGC-27细胞、人肝Hepg-2细胞和人结肠癌Caco-2细胞体外增值抑制作用的影响;采用LPS诱导Raw 264.7细胞炎症模型,MTT法测定细胞活力,Griess试剂盒测定细胞分泌一氧化氮(NO)的水平,探讨知母不同药用部位的体外抗炎活性;采用二苯基苦酰肼基(DPPH)、2,2′-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐(ABTS)自由基清除法观察知母不同药用部位的体外抗氧化作用。结果:HPLC指纹图谱显示,知母4个不同药用部位根、茎、叶、花的化学成分具有一定的差异性;体外药效结果显示,知母不同药用部位作用于不同肿瘤细胞后均呈现不同程度的增值抑制作用,具有一定的差异性;知母不同药用部位均能促进RAW264.7巨噬细胞的增殖,不同药用部位对LPS诱导的巨噬细胞分泌一氧化氮均有不同程度的抑制作用;知母花对DPPH及ABST的清除能力最强,其它部位活性顺序依次为知母叶、茎、根。结论:知母根、叶、花为抗肿瘤有效药用部位;知母不同药用部位均具有显著的抗炎、抗氧化作用,以知母茎抗炎作用最强,知母花抗氧化作用最强;本研究为知母不同药用部位针对不同疾病的合理使用提供实验依据和实验方法。 展开更多
关键词 知母 不同药用部位 抗肿瘤 抗炎 抗氧化
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用于肿瘤细胞三维培养的微流控芯片构建及培养条件研究 被引量:13
14
作者 徐为峰 王帅 +1 位作者 孟宪生 包永睿 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期581-585,共5页
目的设计制作用于肿瘤细胞三维培养的微流控芯片,以海藻酸钙凝胶为细胞支架,基于芯片研究适合的凝胶形成、溶解条件,利用该条件长期培养SMMC-7721细胞并检测其活力。方法利用CDR软件、软光刻技术、模塑法、等离子键合法等设计并制作出... 目的设计制作用于肿瘤细胞三维培养的微流控芯片,以海藻酸钙凝胶为细胞支架,基于芯片研究适合的凝胶形成、溶解条件,利用该条件长期培养SMMC-7721细胞并检测其活力。方法利用CDR软件、软光刻技术、模塑法、等离子键合法等设计并制作出微流控芯片并验证其适用性;在芯片中三维培养肝肿瘤细胞SMMC-7721,观察细胞形态,以IPP软件辅助计算细胞在72h的存活率。结果设计制作的微流控芯片适合于肿瘤细胞三维培养;芯片中培养的肝癌细胞72 h内生长状态良好,存活率达(96.1±4.5)%,细胞堆积排列紧密,出现肿瘤细胞聚集体(tumor cell spheroid,TCS)。结论该文设计构建用于肿瘤细胞三维培养的微流控芯片,并用于肝癌细胞SMMC-7721培养,细胞生长状态良好,且细胞生长与聚集状态表现出一定特殊性。利用该芯片进行肿瘤细胞三维培养,可以为肿瘤细胞生长状态研究及抗肿瘤药物筛选提供更有利的方式。 展开更多
关键词 微流控芯片 肿瘤细胞 肿瘤微环境 细胞三维培养 海藻酸钙凝胶 培养条件
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气滞胃痛颗粒治疗反流性胃炎药效学初步研究 被引量:6
15
作者 张跃飞 于婷 +2 位作者 王帅 孟宪生 包永睿 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2015年第8期1570-1572,I0006,共4页
目的:根据气滞胃痛颗粒处方组成,探讨气滞胃痛颗粒对大鼠实验性反流性胃炎的药效作用。方法:采用灌服自制反流液法复制反流性胃炎模型;将大鼠随机分为空白组、枸橼酸莫沙必利组、气滞胃痛颗粒高、中、低剂量组,考察各组中胃黏膜病理损... 目的:根据气滞胃痛颗粒处方组成,探讨气滞胃痛颗粒对大鼠实验性反流性胃炎的药效作用。方法:采用灌服自制反流液法复制反流性胃炎模型;将大鼠随机分为空白组、枸橼酸莫沙必利组、气滞胃痛颗粒高、中、低剂量组,考察各组中胃黏膜病理损伤程度及胃酸度,并采用ELISA法测定血清GAS、MTL、PGE2、尿素酶指标的含量。结果:模型组较空白组胃酸度降低,胃黏膜损伤严重,血清GAS、PGE2显著降低(P<0.05),MTL、尿素酶显著升高(P<0.05);气滞胃痛复方中、高剂量组,阳性对照组较模型组小,损伤程度低,血清GAS、PGE2含量升高,MTL、尿素酶含量降低,有显著性差异,且与空白对照组相近。结论:气滞胃痛颗粒通过调节GAS、MTL、PGE2、尿素酶含量,从保护胃黏膜,促进胃肠蠕动角度,发挥治疗反流性胃炎的药效作用,进而为临床的广泛应用及开发奠定基础。 展开更多
关键词 气滞胃痛颗粒 反流性胃炎 GAS MTL PGE2 尿素酶
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灰色关联度法研究红蓼抗肿瘤的药用部位研究 被引量:4
16
作者 张紫嫣 包永睿 +3 位作者 王帅 李天娇 刘金瑛 孟宪生 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2019年第3期419-423,共5页
目的:考察不同药用部位红蓼对肝癌细胞的增殖抑制作用;确定红蓼抗肝癌的最优药用部位。方法:采用高效液相色谱法建立多批次红蓼根、茎、叶、花的指纹图谱;采用MTT法分别对其抑制癌症细胞增值药效进行研究;并使用灰色关联软件计算贡献程... 目的:考察不同药用部位红蓼对肝癌细胞的增殖抑制作用;确定红蓼抗肝癌的最优药用部位。方法:采用高效液相色谱法建立多批次红蓼根、茎、叶、花的指纹图谱;采用MTT法分别对其抑制癌症细胞增值药效进行研究;并使用灰色关联软件计算贡献程度;计算多批次红蓼不同药用部位抗肝癌的平均值。结果:不同药用部位红蓼均能够抑制肝癌细胞生长;灰色关联度分析结果显示红蓼抑制肝细胞关联系数≥0.7的高效液相指纹峰为10(槲皮素)、13、14(山萘酚)、17号;6批红蓼根、茎、叶、花、果抗肝癌抑制率为32.23%、34.55%、38.48%、44.39%和42.27%。结论:红蓼各药用部位均有抗肝癌的作用,其中槲皮素和山萘酚为红蓼各药用部位发挥抗肝癌的物质基础。 展开更多
关键词 红蓼 精准生药学 抗肿瘤 灰色关联度 指纹图谱
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木蝴蝶挥发性成分对H_(22)荷瘤小鼠实体瘤抑制作用及其机制初步研究 被引量:10
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作者 李楠楠 孟宪生 +2 位作者 包永睿 王帅 李天骄 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1600-1605,共6页
目的探讨木蝴蝶挥发性成分抗肝肿瘤作用及其可能的作用机制。方法本研究采用H22实体瘤模型,随机分为空白组、模型组、阳性对照组(环磷酰胺100 mg·kg^(-1))、木蝴蝶挥发性成分低、中、高剂量(17.5、35、70 mg·kg^(-1))组,灌胃... 目的探讨木蝴蝶挥发性成分抗肝肿瘤作用及其可能的作用机制。方法本研究采用H22实体瘤模型,随机分为空白组、模型组、阳性对照组(环磷酰胺100 mg·kg^(-1))、木蝴蝶挥发性成分低、中、高剂量(17.5、35、70 mg·kg^(-1))组,灌胃给药12 d,计算肿瘤抑制率、胸腺及脾指数及血清中IL-2、IL-6的含量。HE染色法观察小鼠实体瘤生长情况。采用0~1.0 g·L^(-1)的木蝴蝶挥发性成分处理人肝癌SMMC-7721细胞,分别采用MTT法检测其对细胞增殖的影响,TUNEL法检测其对肝癌细胞凋亡的影响,RT-PCR法检测其对Bax、Bcl-2、caspase-3 mRNA表达的影响。结果木蝴蝶挥发性成分高剂量的抑瘤率为42.08%;与模型组相比,木蝴蝶挥发性成分能明显提高小鼠的胸腺指数、IL-2及IL-6水平。木蝴蝶挥发性成分体外能明显抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖,诱导细胞凋亡,减少Bcl-2 mRNA的表达,增加Bax、caspase-3 mRNA的表达。结论木蝴蝶挥发性成分具有明显的体内、体外抗肝肿瘤作用,其作用机制可能与增强机体免疫力、促进肿瘤细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 木蝴蝶挥发性成分 抗肝肿瘤 H22荷瘤小鼠 SMMC-7721 凋亡 作用机制
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基于ICP-MS法不同产地石膏中无机元素分析 被引量:16
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作者 田腾跃 包永睿 +2 位作者 孟宪生 王帅 常馨 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第4期1041-1043,I0020,共4页
目的:通过测定11个不同产地石膏中无机元素含量及对其无机元素进行分析,为建立一种以石膏解热药效为评价指标的质量控制方法提供依据。方法:使用微波消解法对石膏进行快速消解,采用电感耦合等离子体质谱对11个不同产地石膏无机元素进行... 目的:通过测定11个不同产地石膏中无机元素含量及对其无机元素进行分析,为建立一种以石膏解热药效为评价指标的质量控制方法提供依据。方法:使用微波消解法对石膏进行快速消解,采用电感耦合等离子体质谱对11个不同产地石膏无机元素进行半定量测定,运用MPP软件对结果进行聚类分析及主成分分析,找出11个不同产地石膏的亲缘关系以及差异元素。对11个不同产地石膏差异元素进行全定量测定,运用MPP软件对结果进行聚类分析,结合半定量测定结果,对11个不同产地石膏的差异元素及亲缘关系进行分析。结果:石膏中含有Na、Mg、Al、K、Ca、V、Cr、Fe(56)、Fe(57)等32种无机元素,产地山东与产地青海的石膏亲缘关系较近,产地江苏与产地四川的石膏相距较近,产地云南与产地安徽的石膏相距较近,11个产地石膏的差异元素为Mg、Al、K、Ca、V、Mn。结论:11个不同产地石膏中无机元素含量有较大的相似度,其差异元素共有6种,6种差异元素之间的差异可以代表不同产地石膏之间的差异,为建立一种以石膏的差异元素判定石膏质量、药效的方法提供了依据。 展开更多
关键词 石膏 无机元素 ICP-MS 主成分分析 聚类分析
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薏苡仁脂肪酸类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及细胞凋亡的影响 被引量:17
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作者 包永睿 王帅 +2 位作者 孟宪生 巩晓杰 杨欣欣 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期235-239,共5页
目的研究薏苡仁脂肪酸类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721增值的影响及作用机制初探。方法采用MTT法考察不同给药剂量,不同给药时间下薏苡仁脂肪酸类成分对SMMC-7721细胞的增值抑制作用及其与时间、剂量的关系;碘化丙啶PI单染色法检测薏苡... 目的研究薏苡仁脂肪酸类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721增值的影响及作用机制初探。方法采用MTT法考察不同给药剂量,不同给药时间下薏苡仁脂肪酸类成分对SMMC-7721细胞的增值抑制作用及其与时间、剂量的关系;碘化丙啶PI单染色法检测薏苡仁脂肪酸作用后,SMMC-7721细胞周期DNA水平变化;Annexin V-EGFP/PI双染法研究薏苡仁脂肪酸对SMMC-7721细胞凋亡率的影响。结果不同质量浓度的薏苡仁脂肪酸作用SMMC-7721细胞24、48、72 h后,均呈现出较好的细胞增殖抑制作用,且具有明显的时间-剂量-效应关系,差异有统计学意义(P<0.05);不同质量浓度的薏苡仁脂肪酸处理SMMC-7721细胞22 h后可显著增加肝癌细胞凋亡率,(P<0.001);作用36 h后,可显著降低G2/M期细胞比例,(P<0.001)。结论薏苡仁脂肪酸对人肝癌SMMC-7721细胞具有明显的抑制作用并可诱导其凋亡,其作用是通过抑制G2/M细胞周期实现的。 展开更多
关键词 薏苡仁脂肪酸类 人肝癌SMMC-7721细胞株 细胞周期 细胞凋亡
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川芎酚酸提取纯化及对缺氧神经细胞损伤的影响 被引量:10
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作者 包永睿 王帅 +2 位作者 杨欣欣 李天娇 孟宪生 《医药导报》 CAS 北大核心 2019年第9期1199-1203,共5页
目的优化川芎酚酸类成分提取纯化工艺条件,探讨其对缺氧损伤神经细胞的保护作用。方法采用L9(3^4)正交实验,以总酚酸含量为考察指标,对醇浓度、提取次数、提取时间、溶剂用量4个因素进行考察,优选最佳提取工艺条件;采用大孔吸附树脂纯... 目的优化川芎酚酸类成分提取纯化工艺条件,探讨其对缺氧损伤神经细胞的保护作用。方法采用L9(3^4)正交实验,以总酚酸含量为考察指标,对醇浓度、提取次数、提取时间、溶剂用量4个因素进行考察,优选最佳提取工艺条件;采用大孔吸附树脂纯化方法,通过静、动态吸附与解吸实验,对不同型号树脂、上样药液浓度、泄露曲线、上样pH值、洗脱醇浓度、洗脱醇用量、除杂体积进行考察,优选最佳纯化工艺条件;以连二亚硫酸钠(Na2S2O4)为造模剂,考察川芎酚酸类成分纯度高低对其缺氧神经细胞损伤保护作用的影响。结果最佳提取工艺为8倍量90%乙醇回流提取3次,每次2h;最佳纯化工艺为HPD-300大孔吸附树脂,上样浓度0.2g·mL^-1,树脂比上柱量为1g·mL^-1(药材/湿树脂),先用1倍柱体积(BV)水洗脱,弃去水洗液,再用90%乙醇洗脱8BV,经二次纯化得酚酸类成分最终纯度为70%。回收率为80%。纯化后,酚酸类成分对缺氧神经细胞的保护作用显著提高,半数抑制浓度(IC50)比纯化前降低48%。结论该工艺条件稳定可行,可为川芎酚酸类成分的临床合理应用与开发奠定基础。 展开更多
关键词 川芎酚酸类成分 提取工艺 纯化工艺 神经保护作用
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