能源植物柳枝稷基因工程研究进展 被引量：2

1

作者 曹慧颖 张立军 +3 位作者 阮燕晔 张敖 董小妹 张馨悦 《草业科学》 CAS CSCD 2019年第2期394-401,共8页

柳枝稷(Panicum virgatum)是C4暖季草本植物。具有许多优良的农艺性状,如广泛的地理适应性,耐贫瘠,生产成本低,水利用率高,生物质产量高,易于收获,因此被认为是重要的生物能源作物。通过生物技术对柳枝稷进行遗传改良,对于充分开发柳枝... 柳枝稷(Panicum virgatum)是C4暖季草本植物。具有许多优良的农艺性状,如广泛的地理适应性,耐贫瘠,生产成本低,水利用率高,生物质产量高,易于收获,因此被认为是重要的生物能源作物。通过生物技术对柳枝稷进行遗传改良,对于充分开发柳枝稷的生物质潜能,利用柳枝稷生产生物燃料具有重要意义。本文从柳枝稷遗传转化技术及改良性状的角度综述了柳枝稷的基因工程进展,为培育优良柳枝稷新品种提供参考。 展开更多

关键词 遗传转化 基因型 真空 农杆菌 MIRNA

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植物抗除草剂基因研究进展 被引量：5

2

作者 阮燕晔 薛寥莎 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期462-466,共5页

对抗除草剂基因的来源、抗除草剂作物的抗性机制及抗除草剂基因的应用进行了简要综述,并对抗除草剂基因和启动子选择的局限性及抗除草剂遗传转化中存在的问题进行了探讨。指出目前植物抗除草剂研究存在可转入的抗除草剂基因种类较少、... 对抗除草剂基因的来源、抗除草剂作物的抗性机制及抗除草剂基因的应用进行了简要综述,并对抗除草剂基因和启动子选择的局限性及抗除草剂遗传转化中存在的问题进行了探讨。指出目前植物抗除草剂研究存在可转入的抗除草剂基因种类较少、获得抗性稳定表达的植株比较困难等问题。提出选择抗性基因时,应重点考虑以降解除草剂为抗性机制的基因以减少代谢负担、加强对多价基因转入的研究等策略。 展开更多

关键词 杂草 抗除草剂基因 抗性机制 植物基因工程 研究进展 展望

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抗昆虫蝎毒素及其在植物遗传转化中的研究进展 被引量：1

3

作者 阮燕晔 王波 +1 位作者 崔振海 栾素荣 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期12-17,共6页

本文对抗昆虫蝎毒素的来源、种类、作用机理及其在植物遗传转化方面的研究现状做一简要介绍,并对其在植物遗传转化方面所面临的主要问题进行了探讨,为更好地利用抗昆虫蝎毒素基因提高植物抗虫性提供参考。

关键词 抗昆虫蝎毒素 抗虫性 植物基因工程

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玉米C4-PEPC基因RNAi植物表达载体的构建

4

作者 崔震海 蔡莹 张立军 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期88-91,共4页

玉米C4光合关键酶PEPC基因在玉米C4光合作用中起到重要作用,根据已测序的玉米C4-PEPC基因序列,设计2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以pBI121 C4-PEPC质粒DNA为模板,PCR扩增得到2个C4-PEPC基因片段。再将正向和反向两个片段分别经双... 玉米C4光合关键酶PEPC基因在玉米C4光合作用中起到重要作用,根据已测序的玉米C4-PEPC基因序列,设计2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以pBI121 C4-PEPC质粒DNA为模板,PCR扩增得到2个C4-PEPC基因片段。再将正向和反向两个片段分别经双酶切后插入植物表达载体pTA7002的XhoI和SpeI酶切位点之间,从而构建了以玉米C4-PEPC基因为靶标的RNAi植物表达载体p7002-Z-F。载体质粒经酶切鉴定正确后通过冻融法转入根癌农杆菌EHA105中,为后续探讨干扰载体的干涉PEPC基因表达效果奠定了基础。 展开更多

关键词 玉米 PEPC RNAI 植物表达载体

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叶绿体功能基因的工程改造 被引量：1

5

作者 徐昀 胡凯 +1 位作者 崔震海 张立军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1-4,14,共5页

主要介绍叶绿体功能基因工程改造的目的、受体材料、主要方法、转入外源基因细胞的筛选和鉴定等。

关键词 叶绿体功能 基因工程 同源重组 通用载体 筛选标记基因

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玉米C_4型PEPC全长基因的克隆与表达载体构建 被引量：2

6

作者 王雷 崔震海 张立军 《江苏农业科学》 北大核心 2014年第11期26-29,共4页

以玉米自交系郑58基因组DNA为模板,设计了2对特异性引物,分别PCR扩增玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)启动子及其全长编码序列,利用In-Fusion技术将两者定向克隆到载体p CAMBIA-1391Z上,并对重组子进行测序验证。结果表明,该PEPC... 以玉米自交系郑58基因组DNA为模板,设计了2对特异性引物,分别PCR扩增玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)启动子及其全长编码序列,利用In-Fusion技术将两者定向克隆到载体p CAMBIA-1391Z上,并对重组子进行测序验证。结果表明,该PEPC启动子序列与Gen Bank中的玉米自交系B73的同源性为97.70%,片段长1 200 bp;全长编码序列同源性为97.90%,片段长6 330 bp。通过HindⅢ和EcoRⅠ酶切载体p CAMBIA-1391Z,利用In-Fusion技术将线性载体与之前获得的2个PCR片段连接,测序结果与预期序列一致,表明成功构建了p CAMBIA-1391Z-PEPC植物表达载体。对克隆和载体构建中存在的问题进行了讨论,以期为该类型基因的高效克隆及表达载体的构建提供参考、为C4型PEPC基因功能研究和C3植物遗传转化提供可用的基因序列。 展开更多

关键词 玉米 PEPC 基因克隆 序列分析 表达载体构建

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玉米C_4型PPDK基因的分段PCR克隆及其表达载体构建

7

作者 崔震海 王雷 +3 位作者 阮燕晔 张立军 朱延姝 樊金娟 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期691-695,共5页

丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)是C4植物和景天科酸代谢(CAM)植物光合作用的关键酶,催化形成固定CO2的初始分子受体磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)。玉米的C4型PPDK基因序列较长,难以直接克隆。本研究设计多对引物,首先利用常规PCR扩增PPDK启动子,再利... 丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)是C4植物和景天科酸代谢(CAM)植物光合作用的关键酶,催化形成固定CO2的初始分子受体磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)。玉米的C4型PPDK基因序列较长,难以直接克隆。本研究设计多对引物,首先利用常规PCR扩增PPDK启动子,再利用分段PCR扩增PPDK基因全长编码序列;测序证实克隆序列正确无误,最后利用In-Fusion技术将各个片段定向克隆至载体p CAMBIA-1391Z,成功构建了玉米C4型PPDK基因的植物表达载体。最终为C4型PPDK基因功能研究和C3植物遗传转化提供可用的基因序列,为全长基因的高效克隆及表达载体构建提供参考。 展开更多

关键词 玉米 PPDK 分段PCR 克隆 In-Fusion技术 表达载体构建

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深冬季节油松针叶过剩光能的耗散及光氧化防御研究 被引量：3

8

作者 胡紫菱 崔震海 +3 位作者 秦萍 曹松屹 张立军 周广柱 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期555-559,共5页

以辽宁省沈阳地区（41°82’N,123°56’E）深冬季节（1月末）油松小枝基部和顶部针叶为材料,测定吸收光谱和反射光谱、快速叶绿素荧光诱导动力学参数、叶绿素含量、光合速率和呼吸速率、细胞膜透性、丙二醛和过氧化氢含量以及... 以辽宁省沈阳地区（41°82’N,123°56’E）深冬季节（1月末）油松小枝基部和顶部针叶为材料,测定吸收光谱和反射光谱、快速叶绿素荧光诱导动力学参数、叶绿素含量、光合速率和呼吸速率、细胞膜透性、丙二醛和过氧化氢含量以及抗氧化酶活性,探讨油松针叶在深冬低温下对过剩光能的耗散和光氧化保护机制。结果表明：深冬季节油松针叶的最大光化学量子产量（Fv/Fm）降低,仅达到0.11～0.12,单位横截面积捕获的光能（ABS/CS）和有活性的反应中心的密度（RC/CS）减少,热耗散成为过剩光能消耗的主要途径;光合作用停止,呼吸作用处于很低水平;相对电导率达到78%~85%,但丙二醛、过氧化氢含量和抗氧化酶活性都处于较低水平,因此,细胞膜透性增大可能不主要是活性氧引起的膜质过氧化作用的结果。研究发现,深冬季节的油松针叶生理状态难以满足目前所知的叶黄素循环运转所需要的生理条件。 展开更多

关键词 油松 深冬 过剩光能的耗散 光氧化防御

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发育时期和光诱导对拟南芥AtSUC2基因表达的影响 被引量：2

9

作者 肖红 张立军 +1 位作者 杜国华 崔震海 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期60-64,共5页

蔗糖是高等植物中碳水化合物最主要的转运形式,对于植物的生长发育至关重要。植物体内蔗糖的转运主要依赖蔗糖转运蛋白,因此对于蔗糖转运蛋白基因的研究具有重要意义。拟南芥蔗糖转运蛋白AtSUC2在蔗糖装载中起主要作用,通过半定量RT-PC... 蔗糖是高等植物中碳水化合物最主要的转运形式,对于植物的生长发育至关重要。植物体内蔗糖的转运主要依赖蔗糖转运蛋白,因此对于蔗糖转运蛋白基因的研究具有重要意义。拟南芥蔗糖转运蛋白AtSUC2在蔗糖装载中起主要作用,通过半定量RT-PCR测定拟南芥叶片不同发育时期和不同光强下AtSUC2基因的表达量,研究拟南芥特定发育阶段和光诱导作用下AtSUC2基因表达的影响。结果表明,在野生型拟南芥叶片中,AtSUC2基因在16 d幼叶、30 d营养期叶片、生殖期叶片中均表达,在16 d幼叶和生殖期叶片中表达强度较弱,在营养生长旺盛时(30 d叶龄)表达较高。同时,植株在暗处理12 h时,AtSUC2基因表达量降低,在强光处理12 h时,AtSUC2基因表达量与对照差异不显著,可能AtSUC2基因的表达受光诱导但与光强无关。 展开更多

关键词 拟南芥 AtSUC2基因 蔗糖转运蛋白 半定量PCR

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番茄micro-TOM活体再生体系的建立 被引量：2

10

作者 曹慧颖 王玉莹 +4 位作者 孙建坤 刘玲莉 张立军 阮燕晔 夏润玺 《中国蔬菜》 北大核心 2014年第12期27-29,共3页

番茄micro-TOM是生物学研究的模式植物,它的离体再生体系对遗传转化及发育生物学研究至关重要。但是microTOM组培再生体系费时费力,容易污染。本试验通过对活体植株进行去头去腋芽诱导,建立了高效快捷、不依赖外源激素的番茄micro-TOM... 番茄micro-TOM是生物学研究的模式植物,它的离体再生体系对遗传转化及发育生物学研究至关重要。但是microTOM组培再生体系费时费力,容易污染。本试验通过对活体植株进行去头去腋芽诱导,建立了高效快捷、不依赖外源激素的番茄micro-TOM活体再生体系,为简化番茄遗传转化奠定了基础,也为植物再生机理研究提供了良好的实验材料。 展开更多

关键词 植物再生 组织培养 再生机理 遗传转化 番茄micro-TOM

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玉米杂种优势育种——自交系群体循环相向选择的原理及途径 被引量：2

11

作者 张立军 关义新 +1 位作者 林凤 崔震海 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期643-648,共6页

杂种优势是一个复杂的生物学现象,由生理、生化和分子机制共同决定。在群体水平上,作物产量取决于作物与环境、个体与群体、个体各个器官之间的协调,杂交育种追求群体优势。在个体水平上追求在特定群体条件下有利于单株产量形成的性状集... 杂种优势是一个复杂的生物学现象,由生理、生化和分子机制共同决定。在群体水平上,作物产量取决于作物与环境、个体与群体、个体各个器官之间的协调,杂交育种追求群体优势。在个体水平上追求在特定群体条件下有利于单株产量形成的性状集合,该集合由优势性状、零优势性状和负优势性状组成。杂交导致后代发生遗传变化的机制可分3类:亲本等位基因一致、亲本等位基因不同、亲本含有不同的非等位基因。杂种优势是上述3类基因协调组合和表达的结果,可称为"协调基因表达谱"。该基因表达谱的创建涉及3个阶段的基因重组,即创造自交系选育群体的杂交、自交系选择时的自交和亲本自交系选配的杂交。根据杂种优势的分子机制,具有高配合力的亲本自交系之间,不仅在基因组成上具有一定的互补性,还应有一定的一致性,通过亲本自交系群体的循环相向选择,可以实现这一育种目标。同时,还需要进行协调基因表达谱的特点、形成规律及其与表现型关系的基础研究。注意研究自交系性状优势与基因群组成的一致性和互补性的关系,筛选出能够用于杂种优势预测的分子标记,提出新的杂种优势形成理论和利用途径,为更长远的杂种优势利用奠定基础。 展开更多

关键词 玉米杂种优势 亲本遗传组成的一致性 亲本遗传组成的互补性 协调基因表达谱 自交群体的相向选择

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甜高粱（辽甜系列）再生体系建立与比较

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作者 刘玲利 李丛 +5 位作者 樊金娟 朱延姝 崔震海 阮燕晔 宋波 郭志有 《南方农业》 2016年第32期97-98,共2页

建立了辽宁省能源专用甜高粱再生体系，筛选适合组织培养的辽甜系列品种，为遗传转化奠定基础。以辽甜系列甜高粱芽基部为外植体，在添加不同激素浓度的MS培养基上诱导愈伤组织，进而获得再生植株。辽甜4号和辽甜7号在添加500mg／L水解... 建立了辽宁省能源专用甜高粱再生体系，筛选适合组织培养的辽甜系列品种，为遗传转化奠定基础。以辽甜系列甜高粱芽基部为外植体，在添加不同激素浓度的MS培养基上诱导愈伤组织，进而获得再生植株。辽甜4号和辽甜7号在添加500mg／L水解酪蛋白和3mg／L2，4-D的MS培养基上能够诱导出生长状态良好的愈伤组织，愈伤组织诱导率达到92％和89％，辽甜4号愈伤组织分化能力比较强，在含有1mg／LIAA和0．5mg／L6-BA的MS培养基上分化率为76％；辽甜1号和辽甜5号出愈率相对较低，愈伤组织状态差，再生能力较弱。结果表明，能源用甜高粱辽甜系列品种中，辽甜4号更适用于组织培养和遗传转化。 展开更多

关键词 甜高粱 愈伤组织 成熟种子 芽基部 再生体系

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