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基于ROS-TXNIP-NLRP3信号通路研究电针对脑缺血再灌注大鼠星形胶质细胞活化的作用机制 被引量:1
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作者 江静 张小卿 +6 位作者 曹锐 陈怡然 周歆 胡楠 孙世婧 李佳欣 石蓉 《中华中医药学刊》 北大核心 2025年第7期162-167,I0048-I0050,共9页
目的 观察电针干预脑缺血再灌注损伤大鼠对其海马区星形胶质细胞活化的作用机制,及对活性氧(reactive oxygen species, ROS)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein, TXNIP)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3[nuc... 目的 观察电针干预脑缺血再灌注损伤大鼠对其海马区星形胶质细胞活化的作用机制,及对活性氧(reactive oxygen species, ROS)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein, TXNIP)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3[nucleotidebinding oligomerization domain(NOD)-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3]表达的影响。方法 48只成年雄性SD大鼠随机分为4组,假手术组、模型组、ROS抑制剂组与电针组,每组12只。通过Koizumi线栓法制备脑缺血再灌注损伤大鼠模型,采用Longa评分法对大鼠进行纳入与剔除,假手术组仅剥离颈动脉。抑制剂组需造模前3 d开始用ROS抑制剂n-乙酰-1-半胱氨酸溶液进行灌胃,共连续灌胃10 d,电针组选取百会、印堂以及双侧足三里进行干预,10 min/d,共7 d。圆筒实验观察神经功能恢复情况,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride, TTC)染色法检测脑梗死面积,免疫组化法检测海马区胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)的阳性表达,二氢乙啶(dihydroethidium, DHE)荧光探针检测海马区ROS含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马区GFAP、TXNIP、NLRP3蛋白表达,免疫荧光法测定海马区TXNIP与NLRP3共定位情况。结果 与假手术组比较,模型组不对称指数明显降低,神经功能损伤程度较重(P<0.01),脑梗死面积范围较大(P<0.01),GFAP阳性表达以及蛋白含量增多(P<0.01),星形胶质细胞增殖较少,胞体纤维突起程度较弱,ROS、TXNIP与NLRP3含量显著上升(P<0.01);与模型组比较,ROS抑制剂组与电针组不对称指数较高,神经功能损伤恢复情况良好(P<0.05,P<0.01),脑梗死面积范围缩小(P<0.01),GFAP阳性表达以及蛋白含量增多显著(P<0.01),星形胶质细胞增殖活化程度增多,排列紧密,细胞纤维突起程度增加,ROS、TXNIP与NLRP3含量均有下降(P<0.05,P<0.01),且电针组较抑制剂组更为显著。结论 电针干预可以恢复大鼠的神经功能损伤,其机制可能与促进星形胶质细胞增殖活化,抑制ROS-TXNIP-NLRP3信号通路有关,以减轻氧化应激及炎性反应,发挥脑保护作用。 展开更多
关键词 电针 脑缺血再灌注 星形胶质细胞 ROS-TXNIP-NLRP3信号通路
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基于Piezo1/YAP/Caspase3轴探讨针刺保护膝骨性关节炎模型大鼠股四头肌细胞的机制研究
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作者 郑曲 林星星 +4 位作者 张宇 关雪峰 韩易言 张昱 董宝强 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第8期2274-2283,共10页
目的 探讨基于Piezo1/YAP/Caspase3轴探讨针刺保护膝骨性关节炎模型大鼠股四头肌细胞的机制。方法 本研究选取40只SPF级Wistar大鼠,适应性饲养7天后进行分组,根据随机对照表分为假手术组、模型组、西药组、针刺组,各10只。模型组、西药... 目的 探讨基于Piezo1/YAP/Caspase3轴探讨针刺保护膝骨性关节炎模型大鼠股四头肌细胞的机制。方法 本研究选取40只SPF级Wistar大鼠,适应性饲养7天后进行分组,根据随机对照表分为假手术组、模型组、西药组、针刺组,各10只。模型组、西药组、针刺组采用改良Hulth方法构建膝关节骨性关节炎模型,假手术组仅切开关节腔后缝合。模型复制成功后,假手术组给予生理盐水灌胃,西药组给予塞来昔布溶液灌胃,针刺组针刺髌下、鹤顶次、血海次,各组每日干预1次,连续干预14天,治疗期间大鼠仍进行大鼠跑步机训练。干预结束后,苏木精-伊红染色法(HE)检测各种大鼠股四头肌组织、关节软骨形态变化;TUNEL法检测股四头肌肌细胞凋亡情况,免疫荧光法检测股四头肌细胞Piezo1、YAP、p-YAP蛋白表达,Western blot法检测股四头肌组织抗凋亡蛋白CTGF、AREG、Gli2、AFP表达,以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-xl、Bax、cytc、Caspase3表达水平。结果 与模型组相比,西药组与针刺组大鼠大腿围度、股四头肌湿重、湿重维持率及湿重体重比值较高(P<0.05),与西药组比较,针刺组大鼠大腿围度、股四头肌湿重、湿重维持率及湿重体重比值较高(P<0.05);与模型组相比,西药组与针刺组大鼠股四头肌凋亡指数较低,且针刺组股四头肌凋亡指数较低(P<0.05);与模型组相比,西药组与针刺组股四头肌组织Piezo1、p-YAP蛋白表达较高,YAP蛋白表达较低,CTGF、AREG、Gli2、AFP蛋白表达较高,Bcl-2、Bcl-xl蛋白表达较高,Bax、cytc、Caspase3蛋白表达较低(P<0.05);与西药组相比,针刺组股四头肌组织Piezo1、p-YAP蛋白表达较高,YAP蛋白表达较低,CTGF、AREG、Gli2、AFP蛋白表达较高,Bcl-2、Bcl-xl蛋白表达较高,Bax、cytc、Caspase3蛋白表达较低(P<0.05)。结论 针刺通过增加膝骨性关节炎模型大鼠股四头肌Piezo1蛋白表达,促进YAP的磷酸化入核,进而促进增殖、抗凋亡蛋白CTGF、AREG、Gli2与AFP蛋白的表达,抑制Caspase3依赖性线粒体凋亡,从而保护肌细胞。 展开更多
关键词 针刺 Piezo1 膝骨性关节炎 动物模型 股四头肌 关节软骨
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基于FGF2/FGFR1/p-ERK通路研究不同时间点电针对脑缺血再灌注大鼠反应性星形胶质细胞极化的影响
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作者 孙世婧 张小卿 +8 位作者 马贤德 陈怡然 周歆 胡楠 苏妆 林星星 江静 李佳欣 石蓉 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第6期183-188,I0002,I0003,共8页
目的观察不同时长电针干预对脑缺血再灌注大鼠成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF2)/成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)/磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular sign... 目的观察不同时长电针干预对脑缺血再灌注大鼠成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF2)/成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)/磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)信号通路的调控作用,以及该通路对反应性星形胶质细胞极化的影响。方法108只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组,再灌注后1、3、5、7 d模型组,再灌注后1、3、5、7 d电针组,每组12只。模型组和电针组使用Koizumi线拴法制作MCAO/R模型,假手术组仅剥离颈动脉,不进行栓塞,Zea-Longa法进行模型的筛选和评分。对电针组大鼠的百会、印堂、双侧足三里穴进行电针治疗,10 min/d,分别治疗1、3、5、7 d。使用YLS-13A大小鼠抓力测定仪进行前肢抓力测定;HE染色观察各组大鼠海马CA1区损伤情况;TTC染色计算模型组及电针组大鼠脑梗死体积;免疫荧光双标法检测C_(3)^(+)/GFAP^(+)、S100A10^(+)/GFAP^(+)共染情况;Western blot检测模型组及电针组FGF2、FGFR1、p-ERK的蛋白表达。结果同假手术比较,模型组大鼠前肢抓力减弱(P<0.01);相对脑梗死面积显著增加(P<0.01);海马CA1区细胞排列杂乱,神经细胞大量坏死;C_(3)^(+)GFAP^(+)/GFAP^(+)细胞数显著升高(P<0.01);S100A10^(+)GFAP^(+)/GFAP^(+)细胞数在MCAO/R后1 d下降(P<0.05),第3天开始逐渐升高,5、7 d显著升高(P<0.01);1 d模型组FGF2、FGFR1、p-ERK蛋白表达量均显著降低(P<0.05;P<0.01);3、7 d模型组FGF2蛋白表达量显著升高(P<0.05;P<0.01),3、5、7 d模型组FGFR1、p-ERK蛋白表达量显著升高(P<0.01)。同模型组比较,电针组前肢抓力增强(P<0.05;P<0.01);相对脑梗死面积显著减小(P<0.01);海马CA1区细胞相对整齐,细胞较为完整;电针3、7 d后C_(3)^(+)GFAP^(+)/GFAP^(+)细胞数显著下降(P<0.05);S100A10^(+)GFAP^(+)/GFAP^(+)阳性细胞率显著升高(P<0.05);电针3、5、7 d后FGF2蛋白表达量增高(P<0.05;P<0.01),1、5、7 d后FGFR1蛋白表达量增高(P<0.05;P<0.01),1、7 d后p-ERK蛋白表达量增高(P<0.05;P<0.01)。电针组组内比较,7 d电针组大鼠前肢抓力增加(P<0.01),海马CA1区细胞病理损伤较轻,FGF2、FGFR1、p-ERK蛋白相对表达量最高(P<0.01)。结论电针干预能够改善MCAO/R大鼠神经损伤,有助于运动功能恢复,再灌注后电针持续治疗7 d疗效更为显著,其机制可能促进FGF2/FGFR1/p-ERK通路,促进反应性星形胶质细胞向A2型极化有关。 展开更多
关键词 电针 脑缺血再灌注损伤 星形胶质细胞极化 FGF2/FGFR1/p-ERK通路
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针刺安全深度与针具标准化
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作者 王迦琳 李永明 +1 位作者 任路 张松兴 《中华中医药学刊》 北大核心 2025年第10期202-207,共6页
针刺技术已被196个国家应用于疾病治疗,安全性是影响针刺技术推广和发展的重要因素。针刺安全深度作为针刺安全的一部分,通过对以往的相关文献进行分析,发现研究者采用的测量手段不尽相同,且相同穴位的针刺安全深度研究结果存在不一致... 针刺技术已被196个国家应用于疾病治疗,安全性是影响针刺技术推广和发展的重要因素。针刺安全深度作为针刺安全的一部分,通过对以往的相关文献进行分析,发现研究者采用的测量手段不尽相同,且相同穴位的针刺安全深度研究结果存在不一致的现象。更重要的是,国际上针具的“寸制”没有统一标准,既不是标身寸,又不是同身寸,而是以英寸为基础,公制化后随意取整而来,导致针具规格混乱。由于针具寸的差异会影响刺法寸的度量,从而影响针刺的疗效与安全。针具长度的误差和针刺安全深度的误差叠加则会导致临床针刺安全风险上升。根据上述情况,提出在恢复汉寸的基础上,实现针灸寸制、针刺安全深度和针具标准化的统一,以提升针灸安全性与国际规范性。 展开更多
关键词 针刺 安全深度 针具 标准化
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青葙苷Ⅰ通过调节ROS介导的JNK/c-Jun信号通路增强视神经损伤模型视网膜神经节细胞的线粒体自噬
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作者 韩易言 郑曲 +3 位作者 赵磊 宁志豪 董宝强 左韬 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1898-1905,共8页
目的:探讨青葙苷Ⅰ通过调节活性氧(ROS)介导的c-Jun氨基末端激酶(JNK)/c-Jun信号通路增强视神经损伤模型视网膜神经节细胞(RGCs)线粒体自噬的作用机制。方法:选取24只SPF级新西兰大白兔,随机分为4组,每组6只,分别为假手术组、模型组、... 目的:探讨青葙苷Ⅰ通过调节活性氧(ROS)介导的c-Jun氨基末端激酶(JNK)/c-Jun信号通路增强视神经损伤模型视网膜神经节细胞(RGCs)线粒体自噬的作用机制。方法:选取24只SPF级新西兰大白兔,随机分为4组,每组6只,分别为假手术组、模型组、甲钴胺组、实验组。模型组、甲钴胺组、实验组复制视神经损伤模型,假手术组仅切开球结膜后缝合。模型复制成功后,甲钴胺组给与0.15 mg/kg甲钴胺水溶液灌胃,实验组30 mg/kg青葙苷Ⅰ溶液灌胃,假手术组与模型组给与等体积生理盐水灌胃,各组每日干预一次,连续干预28 d。干预结束后,采用内窥镜检测各组大白兔眼底;苏木精-伊红(HE)染色法检测各组视网膜形态学变化;TUNEL法检测各组RGCs凋亡;免疫荧光染色法检测各组视网膜ROS、parkin及P62表达,Western blot检测各组视网膜JNK、c-Jun、parkin、P62及微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达。结果:内窥镜结果显示,假手术组大白兔眼底表现正常,模型组可见眼底血供减少,视野呈现灰白色。与模型组比较,甲钴胺组与实验组可见眼底血流增加。HE结果显示,假手术组RGCs排列整齐,细胞形态规则,模型组可见RGCs数量减少、排列紊乱,与模型组相比,甲钴胺组与实验组RGCs形态改善,甲钴胺组仍存在部分RGCs形态异常,实验组RGCs总体数量较甲钴胺组多,RGCs形态异常少。与模型组相比,甲钴胺组与实验组视网膜凋亡指数较低(P<0.05),与甲钴胺组相比,实验组视网膜凋亡指数较低(P<0.05);免疫荧光法结果显示,与模型组相比,甲钴胺组与实验组视网膜组织中ROS、P62表达较低,parkin表达升高(P<0.05),与甲钴胺组比较,实验组视网膜组织中ROS、P62表达较低,parkin表达较高(P<0.05);Western blot结果显示,与模型组比较,甲钴胺组与实验组JNK、c-Jun、P62及LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白表达降低,parkin蛋白表达升高(P<0.05),与甲钴胺组比较,实验组JNK、c-Jun、P62蛋白表达及LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ较低,parkin表达较高(P<0.05)。结论:青葙苷Ⅰ能够减少视神经损伤模型RGCs中ROS产生,抑制JNK/c-Jun信号通路,进而增强线粒体自噬,减少细胞凋亡,对视神经损伤模型RGCs起到一定的保护作用。 展开更多
关键词 青葙苷Ⅰ 视神经损伤 视网膜神经节细胞 线粒体自噬
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听力损失的动物模型研究现状及展望
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作者 刘泽萱 王鑫乐 +1 位作者 郑曲 戴俭宇 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1463-1471,共9页
听力损失(hearing loss,HL)作为致病因素复杂、发病机制尚不明确的疾病,可以导致患者听力低下,严重影响患者的健康和生存质量。为了更好地探索听力损失发病机制,并为其治疗研究提供依据,建立出能够模拟人类听觉障碍的动物模型具有重要... 听力损失(hearing loss,HL)作为致病因素复杂、发病机制尚不明确的疾病,可以导致患者听力低下,严重影响患者的健康和生存质量。为了更好地探索听力损失发病机制,并为其治疗研究提供依据,建立出能够模拟人类听觉障碍的动物模型具有重要价值。现有经典的造模方法为药物注射,包含腹腔注射顺铂、庆大霉素、线粒体毒素、D-半乳糖、呋塞米和卡那霉素、新霉素以及先天性巨细胞病毒等;物理方式造模包含噪音、颈椎注射硬化剂、缺血再灌注、注射血管加压素等,此外还有基因改造技术等其他新颖造模方式。本文从上述听力损失造模方法优缺点的角度进行综述,希望能够为更加深入研究听力损失造模方式提供基础和依据。 展开更多
关键词 听力损失 动物模型 造模方式
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中医康复治疗缺血性卒中后认知障碍的临床研究证据图分析
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作者 马俊杰 胡哲 +5 位作者 马铁明 吴琼 王列 赵曦彤 张小卿 陈怡然 《辽宁中医杂志》 2025年第11期8-13,I0001,共7页
目的运用证据图系统梳理中医康复治疗缺血性卒中后认知障碍临床证据。方法计算机系统检索2020年1月—2024年5月中国知网、万方、维普、中国生物医学文献服务系统、PubMed、Cochrane Library、Web of Science数据库,纳入关于中医康复治... 目的运用证据图系统梳理中医康复治疗缺血性卒中后认知障碍临床证据。方法计算机系统检索2020年1月—2024年5月中国知网、万方、维普、中国生物医学文献服务系统、PubMed、Cochrane Library、Web of Science数据库,纳入关于中医康复治疗缺血性卒中后认知障碍的随机对照试验(randomized controlled trials,RCTs)、系统评价及Meta分析,采用文字、表格结合柱形图、折线图、气泡图的方式展示证据分布,运用Cochrane评估工具RoB1.0、AMSTAR-2量表对RCTs和系统评价/Meta分析进行质量评估。结果共纳入110篇文献,其中RCTs 93篇,系统评价/Meta分析17篇。该领域RCTs和系统评价/Meta分析发文量均呈上升趋势,文章质量普遍偏低。RCTs研究样本量较小,集中在50~100例,疗程较短,体针是关注度最高的中医康复手段,结局指标繁多,主要包括蒙特利尔评估量表、简易智力状态量表、日常生活活动能力评定、生化指标、中医证候积分。系统评价及Meta显示中医康复能改善缺血性卒中后认知障碍,但纳入文献质量较低,且均未阐述纳入研究的资金来源、报告研究方案以及生命利益冲突关系等信息。结论中医康复治疗缺血性卒中后认知障碍具有一定的优势,但也有不足之处,主要缺乏高质量的临床研究,系统评价整体方法学质量较低,未来仍需开展多中心、大样本、高质量的临床研究,以期为中医康复治疗缺血性卒中后认知障碍提供高级别的循证医学证据。 展开更多
关键词 中医康复 缺血性卒中 认知障碍 随机对照试验 系统评价 证据图
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