大豆色拉油中转基因成分检测技术研究 被引量：22

1

作者 金红 程奕 +1 位作者 赵昕 王永 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2004年第1期24-27,共4页

针对大豆色拉油中DNA较难提取的问题提出了充分乳化、延长醇沉淀时间和反复富集小片段DNA等措施,有效地从大豆色拉油中提取到DNA,并通过大豆特异内源基因扩增得以证明。从两个不同品种商品大豆色拉油中检测出35S启动子和NOS终止子外源... 针对大豆色拉油中DNA较难提取的问题提出了充分乳化、延长醇沉淀时间和反复富集小片段DNA等措施,有效地从大豆色拉油中提取到DNA,并通过大豆特异内源基因扩增得以证明。从两个不同品种商品大豆色拉油中检测出35S启动子和NOS终止子外源调控序列,并通过增加所用DNA模板用量检测出目的基因EPSPS序列,建立了大豆色拉油中转基因成分检测方法。 展开更多

关键词 大豆 色拉油 转基因成分 检测技术 醇沉淀时间

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高效液相色谱法同时测定化妆品中的4种禁用着色剂 被引量：12

2

作者 郭桂媛 林维宣 +2 位作者 金红利 于一茫 侯红漫 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期229-231,共3页

建立了高效液相色谱-紫外-可见光检测器(HPLC/UV-Vis)同时测定化妆品中4种禁用着色剂的检测方法。化妆品样品以乙醇为溶剂进行萃取,然后以萃取液作为检测对象,采用C18反相色谱柱,以乙腈-0.5% H3PO4溶液为流动相进行梯度洗脱,用紫外-可... 建立了高效液相色谱-紫外-可见光检测器(HPLC/UV-Vis)同时测定化妆品中4种禁用着色剂的检测方法。化妆品样品以乙醇为溶剂进行萃取,然后以萃取液作为检测对象,采用C18反相色谱柱,以乙腈-0.5% H3PO4溶液为流动相进行梯度洗脱,用紫外-可见光检测器检测,定量检测波长530 nm。方法的平均回收率(n=8)为86%～100%,相对标准偏差(RSD)为3.68%～8.02%;碱性紫1、颜料橙5、苏丹蓝2、苏丹红IV的检出限分别为0.05,0.5,0.5,0.2μg/mL。 展开更多

关键词 化妆品添加剂 高效液相色谱法 着色剂

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气相色谱-质谱法测定化妆品中3种防腐剂 被引量：17

3

作者 金红利 林维宣 +1 位作者 郭桂媛 徐伟 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期307-309,共3页

建立了同时测定化妆品中2-氯-4-甲氧基苯酚、4-溴-2-甲氧基苯酚和三氯生3种防腐剂含量的气相色谱-质谱法。采用Agilent 6890N-5975气相色谱-质谱联用仪,配DB-5MS色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25μm）,对3种型式的化妆品：口红（膏... 建立了同时测定化妆品中2-氯-4-甲氧基苯酚、4-溴-2-甲氧基苯酚和三氯生3种防腐剂含量的气相色谱-质谱法。采用Agilent 6890N-5975气相色谱-质谱联用仪,配DB-5MS色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25μm）,对3种型式的化妆品：口红（膏状）、香波（乳状）和化妆水（水状）的样品进行测试。结果表明,检测的相对标准偏差为0.86%~4.49%,平均回收率为92.2%~98.9%,对2-氯-4-甲氧基苯酚、4-溴-2-甲氧基苯酚和三氯生的检出限分别为0.1,0.5及0.1 mg/L。 展开更多

关键词 化妆品 防腐剂 气相色谱-质谱法

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玉米螟不同虫态发生期、发生量对第1,2代玉米螟发生程度的影响 被引量：10

4

作者 杨长城 丛斌 +2 位作者 宋亚坤 刘善斌 陶福深 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 2000年第5期435-438,共4页

通过对第1,2代玉米螟各虫态发生期、发生量和为害率的连续调查结果分析表明 :玉米螟各代的虫量基数只是影响当代发生程度的因素之一 ,并不能决定发生程度。玉米螟的发生程度与当代发生数量呈正相关 ,与田间落卵量关系更为密切 ,与发生... 通过对第1,2代玉米螟各虫态发生期、发生量和为害率的连续调查结果分析表明 :玉米螟各代的虫量基数只是影响当代发生程度的因素之一 ,并不能决定发生程度。玉米螟的发生程度与当代发生数量呈正相关 ,与田间落卵量关系更为密切 ,与发生时期关系不大。发生数量与发生历期呈正相关 ,第1,2代玉米螟的发生程度没有必然的联系 ,而表现为间断性和相对独立性。第2代玉米螟的田间产卵量是第1代玉米螟的3.75～7.1倍 ,造成玉米被害率成倍增加。 展开更多

关键词 玉米螟 死亡率 成虫数量 产卵量 为害率

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SYBR~ GreenI实时PCR鉴定检测转基因油菜RT73品系 被引量：3

5

作者 于莉 熊国华 +1 位作者 刘志恒 曹际娟 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第10期3010-3011,3138,共3页

利用特殊性引物,应用SYBR Green I实时PCR技术鉴定检测了商业化种植的转基因油菜RT73品系。结果表明,应用实时PCR技术,利用SYBR Green I染料能选择性结合双链DNA的特点,可检测到RT73品系特异性靶序列扩增所产生的荧光信号,且通过溶... 利用特殊性引物,应用SYBR Green I实时PCR技术鉴定检测了商业化种植的转基因油菜RT73品系。结果表明,应用实时PCR技术,利用SYBR Green I染料能选择性结合双链DNA的特点,可检测到RT73品系特异性靶序列扩增所产生的荧光信号,且通过溶解曲线确定其熔点值为(80.2±0.5)℃,而对其他油菜品系则检测不到荧光信号。SYBR Green I实时PCR能通过溶解曲线有效地区分了特异性产物、非特异性产物以及引物二聚体,是基因鉴定检测的新方法。 展开更多

关键词 SYBR Green Ⅰ实时PCR 转基因油菜 RT73品系 鉴定

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狐源犬瘟热病毒泰安株(CDV-FOX-TA)的分离与鉴定 被引量：3

6

作者 杨笃宝 吕品 +5 位作者 胡传伟 贾赟 谢之景 曹涤非 任月 刘海防 《西南农业学报》 CSCD 2008年第1期204-207,共4页

从具有疑似犬瘟热症状的病狐血液中分离到1株病毒,该病毒在MDCK细胞上生长良好,并能形成稳定的CPE。经电镜观察、理化特性、滴度测定、动物回归试验、RT-PCR和荧光定量RT-PCR鉴定,证实分离到的病毒为1株犬瘟热病毒强毒株,命名为CDV-FOX... 从具有疑似犬瘟热症状的病狐血液中分离到1株病毒,该病毒在MDCK细胞上生长良好,并能形成稳定的CPE。经电镜观察、理化特性、滴度测定、动物回归试验、RT-PCR和荧光定量RT-PCR鉴定,证实分离到的病毒为1株犬瘟热病毒强毒株,命名为CDV-FOX-TA。 展开更多

关键词 狐狸 犬瘟热病毒 分离 鉴定

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气相色谱法同时测定玉米中12种三嗪类除草剂的残留量 被引量：36

7

作者 张敬波 姜文凤 +2 位作者 董振霖 赵守成 卫锋 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期648-651,共4页

建立了气相色谱-氮磷检测器同时检测玉米中12种三嗪类除草剂（西玛通、西玛津、阿特拉津、扑灭津、特丁通、特丁津、环丙津、西草净、扑草净、特丁净、甲氧雨净、环嗪酮）残留量的方法。玉米样品用乙腈萃取，强阳离子交换（SCX）固相萃... 建立了气相色谱-氮磷检测器同时检测玉米中12种三嗪类除草剂（西玛通、西玛津、阿特拉津、扑灭津、特丁通、特丁津、环丙津、西草净、扑草净、特丁净、甲氧雨净、环嗪酮）残留量的方法。玉米样品用乙腈萃取，强阳离子交换（SCX）固相萃取柱净化后，用DB-5弹性石英毛细管柱（30m×0．25mmi．d．×0．25ixm）分离样品，氮磷检测器测定。12种三嗪类除草剂在0．01～2．0mg／L范围内线性关系关系良好。相关系数均大于0．998；最低检测限为0．01mg／kg；添加回收率为84．0％-106．8％；相对标准偏差为0．9％～4．7％。 展开更多

关键词 气相色谱法 氮磷检测器 三嗪类除草剂 多残留 玉米

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发酵法提取枸杞中多糖 被引量：6

8

作者 彭博 林维宣 王玉萍 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第10期53-56,共4页

研究了发酵法提取枸杞多糖的工艺。在枸杞粗提液中分别接入葡萄酒酵母和酒精酵母以利用其中的单糖,从而达到进一步纯化枸杞多糖的目的。研究了过滤条件、浸提时间、浸提次数等因素对提取枸杞多糖含量的影响。

关键词 枸杞多糖 分离 提取

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反相高效液相色谱法测定化妆品中的几种防晒剂 被引量：30

9

作者 马杰 林维宣 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期225-228,共4页

采用反相高效液相色谱法测定化妆品中的10种防晒剂,用色谱柱为Waters Symmetry shield C18柱（250 mm×4.6 mm i.d,5μm）,V（甲醇）∶V（水）=85∶15为流动相,检测波长310 nm,回收率为98.1%~101.0%,相对标准偏差小于5%。

关键词 化妆品 反相高效液相色谱法 防晒剂

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高毒力Bt菌株HB-3发酵条件研究 被引量：1

10

作者 徐宜宏 纪明山 于敬沂 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第2期57-58,59,共3页

利用正交试验方法,在摇瓶中对B t菌株HB-3进行最佳发酵培养基配方的筛选,采用国产15 L全自动智能发酵仪对该菌株的发酵条件进行优选。结果,在培养基各组分中,酵母粉对产孢数影响最大,得到的最佳培养基组合为玉米淀粉4.0%、黄豆饼粉2.0%... 利用正交试验方法,在摇瓶中对B t菌株HB-3进行最佳发酵培养基配方的筛选,采用国产15 L全自动智能发酵仪对该菌株的发酵条件进行优选。结果,在培养基各组分中,酵母粉对产孢数影响最大,得到的最佳培养基组合为玉米淀粉4.0%、黄豆饼粉2.0%、酵母粉2.0%、鱼粉2.0%、蛋白胨0.5%。最佳发酵条件为:起始pH值7.4、接种量7%、培养温度32℃。 展开更多

关键词 苏云金芽孢杆菌 发酵条件 培养基

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反向遗传操作技术在流感病毒研究中的应用进展 被引量：2

11

作者 彭永刚 耿庆华 李梅 《畜牧兽医科技信息》 2007年第12期8-10,共3页

流感病毒属于正粘病毒科,流感病毒属,为单股、负链、分段的RNA病毒.按照病毒核蛋白和基质蛋白的不同可分为A、B和C三个型.A型流感病毒又可根据病毒粒子血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的不同分为不同的亚型.尽管历史上对流感病毒进行了... 流感病毒属于正粘病毒科,流感病毒属,为单股、负链、分段的RNA病毒.按照病毒核蛋白和基质蛋白的不同可分为A、B和C三个型.A型流感病毒又可根据病毒粒子血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的不同分为不同的亚型.尽管历史上对流感病毒进行了大量的研究工作,但是关于流感病毒决定致病机理和宿主限制性的分子基础却知之甚少;另外流感病毒为什么能够跨越种间的障碍进行传播的机理也无从知晓. 展开更多

关键词 A型流感病毒 反向遗传操作技术 应用 致病机理 正粘病毒科 RNA病毒 神经氨酸酶 基质蛋白

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棒曲霉Asp-195v产蛋白酶条件的优化

12

作者 毕思远 陈嵘 +4 位作者 孙晓东 陈曦 吕国忠 辛鑫 孙晓燕 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第13期6637-6640,共4页

[目的]优化高产蛋白酶棒曲霉Asp-195v的发酵条件。[方法]利用正交设计方法研究培养基成分配比、含水量、初始pH值、培养时间、接种量和培养温度等发酵条件对棒曲霉Asp-195v产蛋白酶的影响。[结果]影响该菌株产酶的最主要因素是培养时间... [目的]优化高产蛋白酶棒曲霉Asp-195v的发酵条件。[方法]利用正交设计方法研究培养基成分配比、含水量、初始pH值、培养时间、接种量和培养温度等发酵条件对棒曲霉Asp-195v产蛋白酶的影响。[结果]影响该菌株产酶的最主要因素是培养时间,其次是温度,其他4个因素对该菌株产酶影响较小。该菌株最适产酶条件为:培养基成分中麸皮和豆粕比例为7∶3(总量为10g),含水量为90ml(250ml三角瓶),pH值为7,培养时间为72h,接种量为1.5ml,培养温度为24℃,摇床转数为120r/min。棒曲霉Asp-195v对盐有一定耐受力,其中24%NaCl中的蛋白酶与空白样品相比仍有47.6%的活性。[结论]该菌株在豆酱生产中具有良好的应用价值。 展开更多

关键词 Asp-195v 蛋白酶 正交设计 条件优化

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俄罗斯演绎马肠阻塞病例报告

13

作者 林颖 田宝中 +1 位作者 赵玉军 吴长德 《现代畜牧兽医》 2008年第7期45-45,共1页

肠阻塞又称肠便秘、肠秘结、肠内容物停滞。马属动物肠阻塞是由于多种因素引起的肠管运动机能和分泌机能紊乱，粪不能后移，致使某段或几段肠管完全或不完全阻塞的一种急性疝痛病，一般以大肠和小结肠阻塞最为多见。

关键词 肠阻塞 病例报告 俄罗斯 演绎 肠内容物 分泌机能 运动机能 马属动物

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三聚氰胺IgG型单克隆抗体的制备及鉴定

14

作者 耿庆华 盛明巍 +2 位作者 彭永刚 林颖 相文华 《畜牧兽医科技信息》 2011年第11期23-25,共3页

采用改进的重氮法合成三聚氰胺免疫抗原（三聚氰胺-BSA）和三聚氰胺包被抗原（三聚氰胺-OVA），以三聚氰胺-BSA免疫BALB／c小鼠，选取间接ELISA测定效价达8000以上的BALB／C小鼠进行融合，用HAT和HA选择性培养基筛选后，得到一株稳定分... 采用改进的重氮法合成三聚氰胺免疫抗原（三聚氰胺-BSA）和三聚氰胺包被抗原（三聚氰胺-OVA），以三聚氰胺-BSA免疫BALB／c小鼠，选取间接ELISA测定效价达8000以上的BALB／C小鼠进行融合，用HAT和HA选择性培养基筛选后，得到一株稳定分泌抗三聚氰胺抗体的杂交瘤细胞株命名为3G4，经多次传代培养和反复冻存复苏后能够稳定分泌抗体，在BALB／C小鼠体内诱生腹水，用辛酸一硫酸铵沉淀法纯化腹水。用间接ELISA方法测定杂交瘤培养上清效价为1：1600，腹水效价为1：2．048×10^6，抗体亚类为IgG2b。 展开更多

关键词 三聚氰胺 单克隆抗体 鉴定

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苹果球壳孢腐烂病菌DNA不同提取方法的比较 被引量：4

15

作者 贺羽 李鑫 +1 位作者 王有福 赵前程 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第6期38-40,共3页

在基因分析和分子生物学研究中,提取高质量的DNA是试验成功的关键。以苹果球壳孢腐烂病菌为例,采用3种DNA提取方法——CTAB法、E.Z.N.A SP Fungal DNA Kit试剂盒法和Prepman试剂法,研究了不同提取方法对所提取的DNA浓度、纯度、完整性及... 在基因分析和分子生物学研究中,提取高质量的DNA是试验成功的关键。以苹果球壳孢腐烂病菌为例,采用3种DNA提取方法——CTAB法、E.Z.N.A SP Fungal DNA Kit试剂盒法和Prepman试剂法,研究了不同提取方法对所提取的DNA浓度、纯度、完整性及PCR扩增效率的影响。结果表明,3种方法均可提到苹果球壳孢腐烂病菌的DNA,且利用真菌通用引物扩增效果无明显差异。其中,CTAB法提取的DNA完整性好,浓度高;E.Z.N.A SP FungalDNA Kit试剂盒法提取的DNA浓度较低,纯度高;Prepman试剂法提取的DNA完整性差,但浓度高。 展开更多

关键词 苹果球壳胞腐烂病菌 DNA提取 CTAB法 E.Z.N.A SP FUNGAL DNA Kit试剂盒法 Prepman试剂法

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微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定调味品中砷的含量 被引量：16

16

作者 王玉萍 庞艳华 +2 位作者 李军 董振林 周历 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第1期231-233,共3页

利用微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定调味食品中砷的含量。样品经过微波消解,在线加入内标校正基体效应,通过修正方程校正质量数干扰。测定砷元素校正曲线的相关系数0.9999,检出限为0.001mg/kg,样品分析结果的变异系数为1... 利用微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定调味食品中砷的含量。样品经过微波消解,在线加入内标校正基体效应,通过修正方程校正质量数干扰。测定砷元素校正曲线的相关系数0.9999,检出限为0.001mg/kg,样品分析结果的变异系数为1.2%～3.3%(n=6),加标回收率在78.4%～93.1%之间。同时采用国家标准方法氢化物-原子荧光光度法验证了方法的准确度,两种方法结果无显著性差异。实验结果表明,本方法具有简单、快速、检出限低等特点,可用于调味品中砷含量的测定和监控。 展开更多

关键词 电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS) 砷 微波消解 原子荧光 调味品

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湖羊及其杂交后代中双羔羔羊断奶期的生长发育研究 被引量：2

17

作者 任正平 管峰 +3 位作者 尹祺 程瑞禾 方永辉 杨利国 《家畜生态学报》 2005年第5期36-38,共3页

采用SAS8．2的GLM过程和ttest过程对同期出生、不同杂交组合方式的290头 湖羊杂交后代的体重和日增重进行分析。结果表明,不同杂交组合方式对子一代初出生重和二 月龄断奶重都有显著提高,但只有三元杂交对二月龄日增重有显著影响。不同... 采用SAS8．2的GLM过程和ttest过程对同期出生、不同杂交组合方式的290头 湖羊杂交后代的体重和日增重进行分析。结果表明,不同杂交组合方式对子一代初出生重和二 月龄断奶重都有显著提高,但只有三元杂交对二月龄日增重有显著影响。不同杂交组合间,美 利奴×夏洛来×湖羊组合效果最好,与其它三组都有显著差异。 展开更多

关键词 湖羊 杂交 体重

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Lamellarin H(LMH)的研究进展 被引量：1

18

作者 廖少寒 李德鹏 +1 位作者 刘冉 王爱玲 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期961-966,共6页

Lamellarin及其类似物是一类从海洋软体动物中分离出来的具有生物活性的吡咯生物碱,截至2008年已发现70多种,其中Lamellarin H(LMH)具有高效的抑制拓扑异构酶1,抑制HIV-1整合酶等活性,而且对各种肿瘤细胞特别是人类宫颈癌传代细胞(HeLa... Lamellarin及其类似物是一类从海洋软体动物中分离出来的具有生物活性的吡咯生物碱,截至2008年已发现70多种,其中Lamellarin H(LMH)具有高效的抑制拓扑异构酶1,抑制HIV-1整合酶等活性,而且对各种肿瘤细胞特别是人类宫颈癌传代细胞(HeLa)具有很好的细胞毒性,从而在医学上有很大的价值。本文综述了LMH的提取与分离,合成及生物活性。 展开更多

关键词 Lamellarin H 抑制拓扑异构酶 抑制HIV-1整合酶 细胞毒性 合成

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变性高效液相色谱高通量检测动物源性饲料中沙门氏菌和志贺氏菌 被引量：18

19

作者 曹际娟 徐君怡 +4 位作者 孙哲平 郑慧芳 裴轶君 赵昕 郑秋月 《饲料工业》 2008年第14期50-53,共4页

曹际娟徐君怡孙哲平郑慧芳裴轶君赵昕郑秋月摘要应用复合PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,通过通用增菌培养,建立动物源性饲料中沙门氏菌和志贺氏菌的快速高通量检测方法。根据沙门氏菌和志贺氏菌特异基因序列分别设计特异性引物,复... 曹际娟徐君怡孙哲平郑慧芳裴轶君赵昕郑秋月摘要应用复合PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,通过通用增菌培养,建立动物源性饲料中沙门氏菌和志贺氏菌的快速高通量检测方法。根据沙门氏菌和志贺氏菌特异基因序列分别设计特异性引物,复合PCR扩增的产物经DHPLC技术进行快速检测。以49株参考菌株做特异性试验,并开展了精密度检测试验。试验结果表明,该方法具有很好的特异性和精密度,经通用增菌和复合PCR-DHPLC技术可同时检测饲料中的沙门氏菌和志贺氏菌。该方法可以快速、准确、高通量检测,是动物源性饲料中致病菌高通量检测的新技术。 展开更多

关键词 DHPLC 动物源性饲料 通用增菌 沙门氏菌 志贺氏菌

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免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱法同时检测粮谷中的黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A 被引量：97

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作者 李军 于一茫 +4 位作者 田苗 王宏伟 卫锋 李莉 王雄 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期581-584,共4页

建立了同时检测粮谷中黄曲霉毒素（B1、B2、G1和G2）、玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒索A的免疫亲和桩净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱方法。样品经过甲醇-水（体积比为80：20）提取，通过免疫亲和柱富集和净化，采用Waters Nova-Pak。色谱柱... 建立了同时检测粮谷中黄曲霉毒素（B1、B2、G1和G2）、玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒索A的免疫亲和桩净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱方法。样品经过甲醇-水（体积比为80：20）提取，通过免疫亲和柱富集和净化，采用Waters Nova-Pak。色谱柱（3，9mm i，d．×150mm，4μm），以甲醇、乙腈和1％的磷酸溶液为流动相。梯度洗脱，柱后光化学衍生、改变波长荧光检测。黄曲霉毒素（B1、B2、G1和G2）、玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A检出限分别为0．24，4．0和0．5μg／kg，标准曲线的线性范围分别为0．24—6．0，4．0～100．0和0．5～40．0μg／L；在小麦、玉米、黑麦样品中，平均加标回收丰为70．8％～94.0％，相对标准偏差为2．79％～9．38％。 展开更多

关键词 免疫亲和柱 光化学衍生 高效液相色谱 真菌毒索 粮谷

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