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TAT-Apoptin融合蛋白分泌表达载体的构建及其活性检测
被引量：
9
1
作者
刘雪梅
崔剑
+2 位作者
侯伟健
李其久
贲松彬
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期45-48,共4页
目的构建具有自主跨膜能力的Apoptin融合蛋白表达载体,使其分泌表达,避开包涵体复性,简化制备工艺。方法人工合成反式激活蛋白(TAT)序列,与Apoptin序列融合,连接到pET22b+载体上,构建原核分泌表达载体pET22b+-TAT-Apoptin,IPTG诱导目的...
目的构建具有自主跨膜能力的Apoptin融合蛋白表达载体,使其分泌表达,避开包涵体复性,简化制备工艺。方法人工合成反式激活蛋白(TAT)序列,与Apoptin序列融合,连接到pET22b+载体上,构建原核分泌表达载体pET22b+-TAT-Apoptin,IPTG诱导目的蛋白分泌表达到大肠杆菌周质空间,提取蛋白行SDS-PAGE分析,MTT法检测分泌表达的融合蛋白对胃癌823细胞的抑制作用。结果重组TAT-Apoptin蛋白可分泌至大肠杆菌周质空间中,以可溶状态存在,对胃癌823细胞的最大抑制率为83.95%。结论成功构建重组TAT-Apoptin蛋白表达载体,分泌表达的可溶性融合蛋白具有生物活性。
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关键词
反式激活蛋白
凋亡素
分泌表达
凋亡
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职称材料
题名
TAT-Apoptin融合蛋白分泌表达载体的构建及其活性检测
被引量：
9
1
作者
刘雪梅
崔剑
侯伟健
李其久
贲松彬
机构
辽宁大学生命科学院生化与分子生物学教研室
中国医科
大学
基础医
学院
组织工程
教研室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期45-48,共4页
基金
辽宁省教育厅高校科研计划(2009A310)
辽宁省科学技术计划项目(2010225036)
沈阳市科技计划项目(2009-15)
文摘
目的构建具有自主跨膜能力的Apoptin融合蛋白表达载体,使其分泌表达,避开包涵体复性,简化制备工艺。方法人工合成反式激活蛋白(TAT)序列,与Apoptin序列融合,连接到pET22b+载体上,构建原核分泌表达载体pET22b+-TAT-Apoptin,IPTG诱导目的蛋白分泌表达到大肠杆菌周质空间,提取蛋白行SDS-PAGE分析,MTT法检测分泌表达的融合蛋白对胃癌823细胞的抑制作用。结果重组TAT-Apoptin蛋白可分泌至大肠杆菌周质空间中,以可溶状态存在,对胃癌823细胞的最大抑制率为83.95%。结论成功构建重组TAT-Apoptin蛋白表达载体,分泌表达的可溶性融合蛋白具有生物活性。
关键词
反式激活蛋白
凋亡素
分泌表达
凋亡
Keywords
TAT
Apoptin
secretory expression
apeptosis
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
TAT-Apoptin融合蛋白分泌表达载体的构建及其活性检测
刘雪梅
崔剑
侯伟健
李其久
贲松彬
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
9
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