利拉鲁肽通过抑制线粒体凋亡途径对大鼠脊髓损伤的保护作用 被引量：11

1

作者 李昊天 赵兴长 +4 位作者 李刚 王继权 孙平 吕刚 范仲凯 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期439-444,共6页

目的:研究利拉鲁肽注射液对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后线粒体氧化损伤、细胞色素C(Cyt-C)、caspase-3及细胞凋亡的影响。方法:将36只健康SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤组(SCI组,生理盐水50μg/kg,腹腔注射)、... 目的:研究利拉鲁肽注射液对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后线粒体氧化损伤、细胞色素C(Cyt-C)、caspase-3及细胞凋亡的影响。方法:将36只健康SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤组(SCI组,生理盐水50μg/kg,腹腔注射)、利拉鲁肽组(50μg/kg,腹腔注射),每组12只。采用Allen’s法制作SCI模型,假手术组仅行椎板切除,其余二组行椎板切除并打击。模型建立24 h后取受损脊髓,提取脊髓组织线粒体,分别检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的含量、Cyt-C与caspase-3表达,JC-1法测定线粒体膜电位的变化,TUNEL染色法检测细胞的凋亡情况。结果:利拉鲁肽组较SCI模型组脊髓组织线粒体中GSH的含量明显有所升高,而MDA的含量明显降低(P<0.01),JC-1法示利拉鲁肽组大鼠线粒体膜电位较SCI模型组明显有所提高(P<0.01)。Western Blot法和TUNEL法分别显示利拉鲁肽组大鼠脊髓内Cyt-C、caspase-3的表达和细胞凋亡数较SCI模型组明显有所减少(P<0.01)。结论:利拉鲁肽能够改善SCI后线粒体氧化损伤,保护线粒体膜电位,减少Cyt-C释放,降低caspase-3表达,抑制细胞凋亡,对SCI起到保护作用。 展开更多

关键词 脊髓损伤 利拉鲁肽 线粒体 氧化应激 细胞凋亡 大鼠

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BMP-2诱导肌源性干细胞转化为软骨样细胞的体外实验研究 被引量：7

2

作者 梅晰凡 袁亚江 +2 位作者 吕刚 郭占鹏 李全双 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期92-95,共4页

目的体外定向诱导大鼠肌源性干细胞(MDSCs)向软骨细胞转化,并对诱导细胞进行鉴定。方法用差速贴壁的方法对SD大鼠MDSCs进行分离和培养。用骨形态发生蛋白2(BMP2)将MDSCs进行诱导分化,9d后取出标本,行甲苯胺蓝染色检测软骨基质的分泌,免... 目的体外定向诱导大鼠肌源性干细胞(MDSCs)向软骨细胞转化,并对诱导细胞进行鉴定。方法用差速贴壁的方法对SD大鼠MDSCs进行分离和培养。用骨形态发生蛋白2(BMP2)将MDSCs进行诱导分化,9d后取出标本,行甲苯胺蓝染色检测软骨基质的分泌,免疫组织化学检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达。RT-PCR检测Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖(aggrecan)的mRNA表达。结果5d后镜下见细胞形态由梭形向多边多角形转化。9d后诱导组甲苯胺蓝染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化检测阳性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA呈阳性表达。结论BMP-2可诱导MDSC向软骨细胞转化。 展开更多

关键词 肌源性干细胞 软骨细胞 细胞分化

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人工肩关节假体设计与相关解剖学的研究进展 被引量：13

3

作者 胡柯军 王伟 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2007年第1期103-105,共3页

关键词 人工肩关节 假体设计 解剖学 复杂性肱骨近端骨折 肩关节置换 肩关节外科 肩关节功能 活动范围

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PTEN基因沉默对BMSC氧糖剥夺模型的保护作用及其对Bcl-2凋亡通路的影响 被引量：2

4

作者 陈毅 尹西盟 +3 位作者 董宝铁 范仲凯 刘丹平 屠冠军 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期600-604,共5页

目的研究RNA干扰沉默第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白(PTEN)基因对骨髓间充质干细胞(BMSC)氧糖剥夺模型的保护作用,并探讨其对Bcl-2敏感的凋亡通路的影响,分析其保护作用的机制。方法体外分离培养BMSC并鉴定,通过脂质体法转染PTE... 目的研究RNA干扰沉默第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白(PTEN)基因对骨髓间充质干细胞(BMSC)氧糖剥夺模型的保护作用,并探讨其对Bcl-2敏感的凋亡通路的影响,分析其保护作用的机制。方法体外分离培养BMSC并鉴定,通过脂质体法转染PTEN基因特异的siRNA沉默PTEN基因;RT-PCR检测PTEN基因的表达;制备体外氧糖剥夺模型观察PTEN基因的沉默对细胞的保护作用。Western blot检测Bcl-2蛋白表达的变化。结果成功培养BMSC并鉴定。RT-PCR检测结果显示siRNA成功干扰了PTEN基因的表达,流式细胞仪检测结果显示PTEN基因沉默后的细胞对氧糖剥夺模型有较强的耐受能力,Western blot检测结果显示Bcl-2蛋白明显增多。结论 PTEN基因的沉默使BMSC更能耐受氧糖剥夺的环境,增强了细胞的存活能力,其机制可能是通过Bcl-2敏感的凋亡通路抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 PTEN基因 RNA干扰 氧糖剥夺模型 BCL-2蛋白

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透明质酸钠对大鼠成肌细胞体外成骨分化的影响 被引量：3

5

作者 张玉强 李游 +2 位作者 王岩峰 王伟 吕刚 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期408-411,共4页

目的研究透明质酸钠对成肌细胞体外成骨诱导分化的影响。方法运用差速贴壁法和(或)酶消化法分离纯化的大鼠成肌细胞,将培养至第3代的细胞分为:(1)实验组:采用含0.1%的透明质酸钠和500 ng/mL的重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)的培养基进... 目的研究透明质酸钠对成肌细胞体外成骨诱导分化的影响。方法运用差速贴壁法和(或)酶消化法分离纯化的大鼠成肌细胞,将培养至第3代的细胞分为:(1)实验组:采用含0.1%的透明质酸钠和500 ng/mL的重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)的培养基进行培养;(2)对照组:以含500 ng/mL rhBMP-2的培养基进行培养。观察诱导过程中成肌细胞形态变化。第3周时对其进行成骨指标检测(碱性磷酸酶活性,I型胶原免疫组化,茜素红和碱性磷酸酶的钙结节染色)。结果实验组和对照组成肌细胞在诱导过程中形态学改变相似。实验组和对照组碱性磷酸酶活性均升高,2组间差异无统计学意义,I型胶原免疫组化均呈阳性,茜素红和碱性磷酸酶染色均可见大量钙结节。结论透明质酸钠不抑制成肌细胞体外成骨分化,与成肌细胞具有良好的生物相容性。 展开更多

关键词 透明质酸钠 成肌细胞 骨形态发生蛋白

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新生大鼠肌源性干细胞跨胚层分化为胰岛素分泌细胞的研究 被引量：2

6

作者 王滢丽 刘畅 +2 位作者 梅晰凡 郭占鹏 李全双 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期415-419,共5页

目的探讨新生大鼠肌源性干细胞(MDSCs)在体外跨胚层转分化为胰岛素分泌细胞(IPCs)的可能性。方法提取新生大鼠MDSCs原代细胞,差速贴壁培养后行Desmin免疫细胞化学鉴定。然后将细胞分为3组:胰腺提取液诱导组、化学方法诱导组、空白对照组... 目的探讨新生大鼠肌源性干细胞(MDSCs)在体外跨胚层转分化为胰岛素分泌细胞(IPCs)的可能性。方法提取新生大鼠MDSCs原代细胞,差速贴壁培养后行Desmin免疫细胞化学鉴定。然后将细胞分为3组:胰腺提取液诱导组、化学方法诱导组、空白对照组,分别诱导并同期观察细胞的生长形态,采用双硫腙(DTZ)染色鉴定胰岛素分泌细胞,RT-PCR方法检测诱导后细胞的基因表达情况。结果获得高纯度的MDSCs,且Desmin免疫细胞化学鉴定呈阳性。胰腺提取液诱导组诱导后4d,相差显微镜下可见细胞团结构,诱导后6d呈半贴壁状态,诱导后12d形成典型的胰岛样细胞团,较化学方法诱导组诱导时间缩短3d。RT-PCR检测显示:胰腺提取液诱导组诱导6d后可检测到胰岛前体细胞相关基因Ngn3、nestin、PDX-1的表达;诱导12d后可检测到胰岛素基因的表达,但未检测到Ngn3、nestin、PDX-1的表达。结论胰腺提取液可模仿胰岛细胞发育的微环境,并诱导大鼠MDSCs跨胚层分化为胰岛素分泌细胞。 展开更多

关键词 成体干细胞 转分化 胰岛素分泌细胞

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成肌干细胞在透明质酸凝胶载体中诱导分化为软骨细胞的研究 被引量：1

7

作者 李全双 梅晰凡 +2 位作者 郭占鹏 王滢丽 秦书俭 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期829-832,共4页

目的探讨以透明质酸钠凝胶作为组织工程软骨载体、以成肌干细胞作为种子细胞诱导分化形成软骨细胞的可行性。方法体外分离培养兔成肌干细胞,采用结蛋白(Desmin)细胞化学染色进行鉴定,并观察兔成肌干细胞在不同浓度透明质酸钠凝胶中的生... 目的探讨以透明质酸钠凝胶作为组织工程软骨载体、以成肌干细胞作为种子细胞诱导分化形成软骨细胞的可行性。方法体外分离培养兔成肌干细胞,采用结蛋白(Desmin)细胞化学染色进行鉴定,并观察兔成肌干细胞在不同浓度透明质酸钠凝胶中的生长状态。在5%透明质酸钠凝胶中以骨形态发生蛋白2(BMP-2)诱导兔成肌干细胞,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,并通过甲苯胺蓝染色、免疫细胞化学及RT-PCR技术对诱导后的细胞进行鉴定。结果原代培养兔成肌干细胞Desmin细胞化学染色呈阳性表达,且在不同浓度透明质酸钠凝胶中均生长良好。BMP-2诱导培养1d后,成肌干细胞即开始于透明质酸钠凝胶中伸展生长,诱导培养10d后,细胞形态由梭形向多边多角形转化,甲苯胺蓝染色阳性,Ⅱ型胶原免疫荧光检测阳性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和聚焦蛋白聚糖mRNA呈阳性表达。结论兔成肌干细胞可在适当浓度BMP-2诱导下分化为软骨样细胞,透明质酸钠凝胶可作为软骨组织工程的良好载体。 展开更多

关键词 成肌细胞 骨形态发生蛋白质类 透明质酸 细胞分化

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骨皮质剥脱术治疗骨不连的疗效观察 被引量：1

8

作者 王磊 吕刚 +6 位作者 曹阳 智晓东 王岩松 吴卓 孟杰 卜繁旺 董宽 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1298-1299,共2页

随着我国经济的快速发展，道路上车辆的不断增多，交通事故造成的四肢管状骨骨折不断出现，目前此类患者多采用手术内固定治疗，但是，随之骨折发生骨不连的情况也越来越多，本院采用骨皮质剥脱术（Decortication）法[1]治疗骨不连47例... 随着我国经济的快速发展，道路上车辆的不断增多，交通事故造成的四肢管状骨骨折不断出现，目前此类患者多采用手术内固定治疗，但是，随之骨折发生骨不连的情况也越来越多，本院采用骨皮质剥脱术（Decortication）法[1]治疗骨不连47例，效果肯定，现报道如下。 展开更多

关键词 固定治疗 骨不连 剥脱术 骨皮质 疗效观察 四肢管状骨骨折 交通事故

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Eph家族及其在脊髓损伤中作用的研究进展 被引量：1

9

作者 张玉强 吕刚 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期419-422,共4页

Eph家族（Eph受体和ephrin配体）是最大的受体酪氨酸蛋白激酶亚族,在胚胎期具有调节细胞粘连或排斥、细胞迁移、轴突导向、突触形成、骨稳态调节、血管形成等多种作用。近年来的研究发现,Eph家族蛋白在脊髓损伤后表达升高,可能参与神经... Eph家族（Eph受体和ephrin配体）是最大的受体酪氨酸蛋白激酶亚族,在胚胎期具有调节细胞粘连或排斥、细胞迁移、轴突导向、突触形成、骨稳态调节、血管形成等多种作用。近年来的研究发现,Eph家族蛋白在脊髓损伤后表达升高,可能参与神经再生活动[1]。 展开更多

关键词 EPH受体 家族蛋白 脊髓损伤 ephrin配体 酪氨酸蛋白激酶 稳态调节 细胞粘连 细胞迁移

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透明质酸凝胶中肌源性干细胞与透明软骨联合培养的实验研究

10

作者 沈兆亮 梅晰凡 +3 位作者 袁亚江 李全双 郭占鹏 张赫 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期224-227,共4页

目的探讨肌源性干细胞与软骨细胞混和培养体外成软骨的可行性。方法分离培养、扩增传代兔MDSCs及关节软骨细胞,二者按一定比例混和,6×1010/L密度接种于5%浓度的透明质酸凝胶为共培养组,以相同密度的单纯MDSCs和单纯软骨细胞作为阴... 目的探讨肌源性干细胞与软骨细胞混和培养体外成软骨的可行性。方法分离培养、扩增传代兔MDSCs及关节软骨细胞,二者按一定比例混和,6×1010/L密度接种于5%浓度的透明质酸凝胶为共培养组,以相同密度的单纯MDSCs和单纯软骨细胞作为阴性与阳性对照。倒置相差显微镜下观察,10 d后行甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学检测,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA表达。结果 5 d后镜下见共培养组MDSCs形态由梭形向多边多角形转化,10 d后细胞甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学检测与阳性对照组相同,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA呈阳性表达。阴性对照组在体外培养过程中未分化为软骨细胞。结论软骨微环境在MDSCs成软骨分化过程中具有重要作用,软骨细胞能有效地诱导MDSCs向软骨样细胞分化,透明质酸凝胶可以作为软骨组织工程的良好载体。 展开更多

关键词 肌源性干细胞 软骨样细胞 共同培养 透明质酸凝胶

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大鼠肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中Hes1蛋白的表达差异

11

作者 张赫 梅晰凡 +3 位作者 郭占鹏 李全双 袁亚江 刘世琼 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期652-656,共5页

目的:研究Hes1蛋白在大鼠肌源性干细胞(MDSCs)体外诱导分化为神经样细胞过程中的表达差异。方法:大鼠乳鼠骨骼肌消化后体外培养增殖,第5代传代后细胞分为两组:对照组完全培养基培养,实验组加入诱导剂培养。6d后观察两组细胞的形态变化,... 目的:研究Hes1蛋白在大鼠肌源性干细胞(MDSCs)体外诱导分化为神经样细胞过程中的表达差异。方法:大鼠乳鼠骨骼肌消化后体外培养增殖,第5代传代后细胞分为两组:对照组完全培养基培养,实验组加入诱导剂培养。6d后观察两组细胞的形态变化,并进行神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)免疫细胞化学鉴定。然后通过免疫荧光和Western Blot技术观察Hes1蛋白的表达差异。结果:实验组细胞呈NSE染色阳性,对照组基本不表达;免疫荧光和Western Blot结果显示,与对照组比较,实验组Hes1蛋白表达较强(P<0.05)。结论:在体外,大鼠肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中Hes1蛋白表达降低。 展开更多

关键词 肌源性干细胞 神经样细胞 Hes1蛋白 大鼠

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细胞共培养条件下大鼠肌源性干细胞对氧化应激损伤神经元的保护作用

12

作者 梅晰凡 刘世琼 +4 位作者 刘畅 董娜 袁亚江 郭占鹏 李全双 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期658-664,共7页

目的:研究肌源性干细胞(MDSCs)与氧化应激损伤神经元共培养条件下MDSCs对后者的保护作用。方法:分离新生SD大鼠的MDSCs及皮层神经元,以叔丁基过氧化氢损伤神经元,构建氧化应激损伤的神经元模型。实验分为2组,损伤组:将第5代MDSCs和损伤... 目的:研究肌源性干细胞(MDSCs)与氧化应激损伤神经元共培养条件下MDSCs对后者的保护作用。方法:分离新生SD大鼠的MDSCs及皮层神经元,以叔丁基过氧化氢损伤神经元,构建氧化应激损伤的神经元模型。实验分为2组,损伤组:将第5代MDSCs和损伤的神经元置于共培养系统中培养4 h;对照组:损伤神经元于共培养系统中单独培养4 h。培养7 d后通过Hoster33258及流式细胞仪检测第2、4、6 d各组神经元的存活率,并用RT-PCR对相关基因进行分析,探究差异的内在原因。结果:Hoster33258及流式细胞仪检测结果显示:在共培养2、4、6 d三个时间点损伤组的神经元的存活率要远远高于对照组(P<0.05),凋亡率明显低于对照组,RT-PCR检测到损伤组神经元在三个时间点Bcl-2的表达水平均较对照组强(P<0.05),而Bax的表达水平均较对照组低(P<0.05)。结论:在共培养条件下,MDSCS对氧化应激损伤神经元具有保护作用,而这与其可促使损伤神经元Bcl-2的表达水平升高以及抑制Bax的表达有关。 展开更多

关键词 肌源性干细胞 细胞培养 BCL-2 BAX 大鼠

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损伤脊髓组织提取液对大鼠肌源性干细胞向神经细胞诱导分化的实验研究

13

作者 杨彪 梅晰凡 +1 位作者 刘福强 秦书俭 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2008年第5期532-535,共4页

目的:探讨大鼠肌源性干细胞在损伤脊髓组织提取液中向神经细胞分化的可能性,为神经再生及脊髓损伤的治疗提供一种新方法。方法:从大鼠乳鼠骨骼肌中分离培养肌源性干细胞,将正常、伤后1d,伤后1周及伤后3周脊髓提取液加入细胞培养基中,观... 目的:探讨大鼠肌源性干细胞在损伤脊髓组织提取液中向神经细胞分化的可能性,为神经再生及脊髓损伤的治疗提供一种新方法。方法:从大鼠乳鼠骨骼肌中分离培养肌源性干细胞,将正常、伤后1d,伤后1周及伤后3周脊髓提取液加入细胞培养基中,观察细胞形态的变化,并采用免疫组织化学法检测诱导后的细胞表达NSE特异性标志物。结果:加入脊髓提取液诱导后24h,部分细胞的形态已发生改变,3d后大部分细胞不仅在形态上表现为神经元样特征,而且NSE等特异性抗体呈阳性表达。结论:损伤脊髓组织液能将肌源性干细胞诱导成神经元样细胞。 展开更多

关键词 肌源性干细胞 细胞分化 神经元样细胞

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乙酰左旋肉碱对急性脊髓损伤大鼠细胞自噬、凋亡及运动功能的影响 被引量：8

14

作者 孟庆峰 张明超 +2 位作者 卢伟 毕云龙 范仲凯 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2016年第7期754-758,共5页

目的旨在检测乙酰左旋肉碱(ALC)对大鼠急性脊髓损伤(SCI)后微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ、细胞凋亡及运动功能的影响。方法成年雌性Sprague-Dawley大鼠36只随机分为假手术组(Sham组)、单纯脊髓损伤组(SCI组)、ALC治疗组,每组12只。Allen... 目的旨在检测乙酰左旋肉碱(ALC)对大鼠急性脊髓损伤(SCI)后微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ、细胞凋亡及运动功能的影响。方法成年雌性Sprague-Dawley大鼠36只随机分为假手术组(Sham组)、单纯脊髓损伤组(SCI组)、ALC治疗组,每组12只。Allen法建立大鼠T10脊髓损伤模型。损伤后3 d行BBB运动评分;取脊髓组织,Western blotting和免疫荧光标记技术检测LC3-Ⅱ表达,TUNEL法观察细胞凋亡。结果与Sham组相比,SCI组LC3-Ⅱ明显升高(P<0.01),细胞凋亡显著增加(P<0.001),BBB评分显著降低(P<0.001);与SCI组相比,ALC组LC3-Ⅱ显著升高(P<0.001),细胞凋亡显著降低(P<0.001),BBB评分明显提高(P<0.01)。结论 ALC可能通过增强大鼠脊髓损伤后细胞自噬,减少细胞凋亡,促进大鼠运动功能恢复。 展开更多

关键词 急性脊髓损伤 乙酰左旋肉碱 自噬 凋亡 大鼠

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胰岛素样生长因子-1改善糖尿病大鼠骨质疏松及其机制的初步研究 被引量：8

15

作者 邓子阳 刘学政 +3 位作者 张德志 左中夫 付云杰 刘万鹏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第19期1987-1990,共4页

目的探讨胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factor-1,IGF-1）对糖尿病大鼠骨质疏松的影响及机制。方法取30只体质量220-250 g的雄性3月龄SD大鼠,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,按随机数字表法分为对照组（正常大鼠腹腔... 目的探讨胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factor-1,IGF-1）对糖尿病大鼠骨质疏松的影响及机制。方法取30只体质量220-250 g的雄性3月龄SD大鼠,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,按随机数字表法分为对照组（正常大鼠腹腔注射PBS）、糖尿病组（糖尿病大鼠腹腔注射PBS）及IGF-1治疗组（糖尿病大鼠腹腔注射IGF-1）,3个月后观察骨源性碱性磷酸酶（bone alkaline phosphatase,BALP）含量、胫骨钙磷含量、胫骨灰与胫骨质量之比、骨形态发生蛋白-2（bone morphogenetic protein-2,BMP-2）表达及胫骨骨密度。结果对照组、糖尿病组及IGF-1组BALP含量分别为（2.42±0.56）、（1.54±0.41）及（2.18±0.62）ng/L,钙含量分别为（5.89±1.21）、（5.41±0.75）及（5.75±1.05）mol/L,磷含量分别为（3.78±0.56）、（3.21±0.47）及（3.67±0.41）mol/L,胫骨灰与胫骨质量比值分别为（67.21±0.81）%、（63.13±0.63）%及（65.81±0.21）%。与对照组相比,糖尿病组BALP含量低,胫骨BMP-2表达少,钙磷含量、胫骨灰重与胫骨质量比值、胫骨密度均下降（P〈0.05）。与糖尿病组相比,IGF-1组BALP含量增加,胫骨BMP-2表达上调,胫骨钙磷含量、胫骨灰重与胫骨质量比值、胫骨骨密度均显著提高（P〈0.05）。结论 IGF-1可增加糖尿病大鼠胫骨钙磷含量、提高胫骨灰重与胫骨质量比值、防止糖尿病大鼠骨质疏松,其机制可能与IGF-1促进骨骼BMP-2表达、提高BALP含量有关。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子-1 糖尿病 骨质疏松

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远程缺血预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后脑源性神经营养因子表达的影响 被引量：3

16

作者 仝淞铭 曹阳 +2 位作者 于德水 王岩松 魏子健 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第21期2548-2554,共7页

目的研究远程缺血预处理（RIPC）对大鼠脊髓缺血再灌注损伤（SCII）后脑源性神经营养因子（BDNF）表达的影响。方法 2014年5—11月,将88只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组（Sham组,n=8）、缺血再灌注组（I/R组,n=40）和RIPC组（... 目的研究远程缺血预处理（RIPC）对大鼠脊髓缺血再灌注损伤（SCII）后脑源性神经营养因子（BDNF）表达的影响。方法 2014年5—11月,将88只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组（Sham组,n=8）、缺血再灌注组（I/R组,n=40）和RIPC组（n=40）。I/R组及RIPC组分别设再灌注0、6、12、24、72 h 5个观察时间点（分别记为1a组~1e组、2a组~2e组）,每个时间点8只大鼠。Sham组大鼠只分离肾动脉下腹主动脉,但不阻断;I/R组大鼠采用Zivin法建立SCII模型;RIPC组大鼠双下肢用驱血带短暂缺血10 min,放开10 min,重复2次,30 min后用Zivin法建立SCII模型。取材,苏木素-伊红（HE）染色观察脊髓病理变化,免疫组化法检测BDNF阳性表达细胞数,原位细胞凋亡（TUNEL）法检测细胞凋亡情况,Western blotting法检测BDNF表达水平,并进行大鼠后肢运动功能（BBB）评分。结果 Sham组脊髓未见明显病理学改变,I/R组脊髓病理学改变明显,RIPC组各时间点脊髓病理学改变均较I/R组轻。1a组~1e组、2a组~2e组BDNF阳性表达细胞数、BDNF表达水平均高于Sham组（P〈0.05）;1a组~1e组、2a组~2e组BBB评分均低于Sham组（P〈0.05）;1a组~1e组、2b组~2e组TUNEL阳性表达细胞数均高于Sham组（P〈0.05）;2b组~2e组BDNF阳性表达细胞数分别高于1b组~1e组（P〈0.05）;2a组~2e组BDNF表达水平、BBB评分分别高于1a组~1e组（P〈0.05）;2a组~2e组TUNEL阳性表达细胞数分别低于1a组~1e组（P〈0.05）;1b组~1e组BDNF阳性表达细胞数、TUNEL阳性表达细胞数、BDNF表达水平、BBB评分均高于1a组（P〈0.05）;2b组~2e组BDNF阳性表达细胞数、TUNEL阳性表达细胞数、BDNF表达水平、BBB评分均高于2a组（P〈0.05）。结论 RIPC可增加大鼠SCII后BDNF的表达水平,并可能通过增加BDNF的表达水平来达到脊髓保护作用。 展开更多

关键词 再灌注损伤 缺血预处理 脑源性神经营养因子 细胞凋亡

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Ephrin-B3沉默对大鼠脊髓损伤后功能修复及Gap-43表达的影响 被引量：3

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作者 杜鹏 吕刚 智晓东 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期307-310,共4页

目的观察Ephrin-B3基因沉默后对脊髓损伤（SCI）功能恢复的影响。方法构建3组针对Ephrin-B3基因的siRNA干扰质粒（用于实验组：A、B、C组）及1组乱序siRNA干扰质粒（用于对照组D组）,体外克隆并提取质粒后包装慢病毒颗粒。半横切法制作... 目的观察Ephrin-B3基因沉默后对脊髓损伤（SCI）功能恢复的影响。方法构建3组针对Ephrin-B3基因的siRNA干扰质粒（用于实验组：A、B、C组）及1组乱序siRNA干扰质粒（用于对照组D组）,体外克隆并提取质粒后包装慢病毒颗粒。半横切法制作成年大鼠SCI模型,将病毒颗粒注入SCI处。分别在注入1、2、4、8周后,采用BBB评分法比较大鼠肢体功能恢复情况;采用Real-time PCR法检测伤后各组脊髓组织Ephrin-B3 mRNA表达情况;采用免疫组化法观察脊髓组织Gap-43的表达变化。结果 Ephrin-B3 mRNA在正常大鼠脊髓内呈相对低表达,D组表达水平呈上升趋势,实验组大鼠出现Ephrin-B3沉默效果,B组尤为明显。转染后1～4周,B组大鼠BBB评分呈持续升高趋势,高于其他3组,D组明显低于实验组,4周时各组恢复效果都进入平台期。免疫组化结果显示,B组脊髓组织内Gap-43表达最明显,从转染后1周开始升高,4-8周时有所下降,而D组呈持续性弱表达。结论沉默Ephrin-B3能够促进大鼠SCI早期功能修复并上调脊髓组织内Gap-43的表达。 展开更多

关键词 脊髓损伤 大鼠 功能修复 Ephrin-B3 GAP-43

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大鼠ZnT1基因siRNA慢病毒载体构建及筛选 被引量：1

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作者 房师强 梅晰凡 +5 位作者 袁亚江 郭占鹏 郭跃 曾锦浩 王岩松 尹海楠 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期595-600,共6页

目的:构建并筛选针对SD大鼠锌离子转运体1(ZnT1)的siRNA慢病毒载体。并检测其在大鼠神经元中的作用。方法:设计并合成针对ZnT1基因的3条(A,B,C)siRNA序列与1条阴性对照序列,将以上序列退火与pFU-GW-iRNA质粒相连接,通过测序鉴定后,分别... 目的:构建并筛选针对SD大鼠锌离子转运体1(ZnT1)的siRNA慢病毒载体。并检测其在大鼠神经元中的作用。方法:设计并合成针对ZnT1基因的3条(A,B,C)siRNA序列与1条阴性对照序列,将以上序列退火与pFU-GW-iRNA质粒相连接,通过测序鉴定后,分别与慢病毒包装质粒共感染293T细胞,检测收获病毒滴度后感染体外培养的SD大鼠脑皮层神经细胞,设置感染复数(MOI)分别为1,3,6,8,于转染后72 h计算转染效率。在最佳MOI值下,设置未经病毒感染组(CON组)、阴性对照病毒感染组(NC组)和慢病毒阳性干扰组(ZnT1-siR-NA-A组,ZnT1-siRNA-B组,ZnT1-siRNA-C组),72 h后利用Western blot技术检测ZnT1的表达情况,确定对ZnT1蛋白的最有效的干扰序列与抑制效率。结果:测序证实目的干扰序列已被准确克隆到pFU-GW-iRNA质粒,收获的慢病毒颗粒滴度为8×108TU/ml,其在MOI=6时对神经细胞的转染效率最高(93%),并保持神经细胞良好的生存状态。转染后ZnT1的表达被不同程度的抑制,A,B,C三种干扰序列对ZnT1的抑制率分别为47.74%±1.40%,81.19%±1.36%,94.10%±2.41%。结论:成功构建了ZnT1-siRNA慢病毒载体,其在MOI=6时对神经细胞具有最佳的转染效率,并有效沉默神经细胞中ZnT1蛋白的表达。 展开更多

关键词 SIRNA 慢病毒载体 锌离子转运体1 GFP 大鼠

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δ阿片受体激活对血清饥饿致大鼠成骨细胞凋亡的影响及机制

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作者 杨宇 吕刚 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期316-319,324,共5页

目的利用体外培养大鼠成骨细胞,研究δ阿片受体激活对血清饥饿诱导成骨细胞凋亡的影响并探讨其机制。方法培养大鼠成骨细胞,分组给药作用48 h后,MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪分析细胞周期,Annexin V-FITC/PI双标记法测定细胞凋亡率,W... 目的利用体外培养大鼠成骨细胞,研究δ阿片受体激活对血清饥饿诱导成骨细胞凋亡的影响并探讨其机制。方法培养大鼠成骨细胞,分组给药作用48 h后,MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪分析细胞周期,Annexin V-FITC/PI双标记法测定细胞凋亡率,Western blot测定PKC和Caspase-3表达。结果给予δ阿片受体激动剂DADLE 1μmol.L-1处理可显著抑制由血清饥饿导致的成骨细胞凋亡,表现为细胞存活率增加,凋亡率降低,S+G2+M期百分比增加,Caspase-3表达下降,PKC表达增加;但这种现象可被Naltrindole所拮抗;并且给予10μmol.L-1 GF109203X亦可拮抗DADLE的这种抑制细胞凋亡的作用,表现为细胞存活率降低,凋亡率增加;S+G2+M期百分比降低;caspase-3表达增加;PKC表达下降。结论 DADLE激活δ阿片受体对血清饥饿诱导的成骨细胞凋亡起保护作用,且这种作用是通过PKC途径实现的。 展开更多

关键词 Δ阿片受体 血清饥饿 成骨细胞 凋亡 PKC

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α1肾上腺素受体亚型对脊髓损伤大鼠膀胱排空的调节作用

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作者 杨立民 李健夫 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第1期132-133,共2页

近年来，随着车祸等意外事故的增加，脊髓损伤（ spinal cord injury ，SCI）发生率逐年升高，尤其对于年轻患者，提高损伤后的生活质量成为目前亟待解决的问题。 SCI后，排尿中枢受到损害或中断，从而导致尿潴留及排尿功能障碍［1］，... 近年来，随着车祸等意外事故的增加，脊髓损伤（ spinal cord injury ，SCI）发生率逐年升高，尤其对于年轻患者，提高损伤后的生活质量成为目前亟待解决的问题。 SCI后，排尿中枢受到损害或中断，从而导致尿潴留及排尿功能障碍［1］，其中膀胱的并发症尤为困扰患者日常生活的难题。研究［2-5］发现，α1肾上腺素受体亚型a、b和d在尿道和膀胱均有分布，并对调节膀胱排空起着重要的作用。作者观察了α1肾上腺素受体亚型在大鼠SCI损伤模型膀胱组织中的表达变化，为用其治疗SCI后尿潴留及排尿困难提供理论支持。 展开更多

关键词 脊髓损伤 肾上腺素受体 膀胱 大鼠

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