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大鼠乳鼠肌源性干细胞体外诱导分化为神经样细胞 被引量：4
1
作者 郭占鹏 梅晰凡 +4 位作者 李全双 袁亚江 王岩松 张赫 刘世琼 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期211-213,226,共4页
目的：探讨神经生长因子（NGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导大鼠乳鼠肌源性干细胞（MDSCs）分化为神经样细胞的可行性.方法：取SD大鼠乳鼠骨骼肌,差速贴壁至第5代时培养液中加入诱导培养基培养,行神经元特异性烯醇化酶（NSE... 目的：探讨神经生长因子（NGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导大鼠乳鼠肌源性干细胞（MDSCs）分化为神经样细胞的可行性.方法：取SD大鼠乳鼠骨骼肌,差速贴壁至第5代时培养液中加入诱导培养基培养,行神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学鉴定和RT-PCR分析.结果：分化后细胞NSE染色阳性,RT-PCR结果显示,诱导后MDSCs样品中检测到NSE、GFAP特异性条带.结论：在一定条件下NGF和bFGF联合诱导法可以诱导MDSCs分化为神经样细胞. 展开更多
关键词 肌源性干细胞 神经样细胞 碱性成纤维细胞生长因子 神经生长因子
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大鼠胰腺提取液体外诱导肌源性干细胞分化为胰岛素分泌细胞 被引量：6
2
作者 刘福强 刘畅 +2 位作者 杨彪 梅晰凡 任甫 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期629-632,共4页
目的:探讨大鼠胰腺提取液(RPE)对大鼠肌源性干细胞(MDSCs)定向诱导分化为胰岛素分泌细胞的作用。方法:RPE诱导MDSCs通过形态学观察、双硫腙(DTZ)染色、免疫细胞化学显色、葡萄糖刺激实验和RT-PCR,对诱导细胞进行体外结构和功能鉴定。结... 目的:探讨大鼠胰腺提取液(RPE)对大鼠肌源性干细胞(MDSCs)定向诱导分化为胰岛素分泌细胞的作用。方法:RPE诱导MDSCs通过形态学观察、双硫腙(DTZ)染色、免疫细胞化学显色、葡萄糖刺激实验和RT-PCR,对诱导细胞进行体外结构和功能鉴定。结果:RPE诱导后第5日有胰岛样结构出现;免疫细胞化学显示,诱导后第12日细胞团表达胰岛素、胰高血糖素,而未诱导组细胞不表达上述蛋白;RT-PCR结果表明,诱导后第6日检测到PDX-1的表达,诱导后第12日检测到胰岛素1、胰岛素2、胰高血糖素和葡萄糖转运体2基因的表达。结论:体外经RPE诱导,大鼠肌源性干细胞可定向分化为胰岛素分泌细胞。 展开更多
关键词 肌源性干细胞 分化 大鼠胰腺提取液 胰岛素
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Detla1基因在肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中的表达 被引量：2
3
作者 郭占鹏 梅晰凡 +2 位作者 袁亚江 张赫 李全双 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期641-643,共3页
目的：研究Detla1基因在大鼠肌源性干细胞体外诱导分化为神经样细胞过程中的表达。方法：大鼠乳鼠骨骼肌体外培养增殖,分为对照组完全培养基培养，实验组加入诱导剂培养。通过RT-PCR、免疫荧光和免疫印迹法观察Detla1基因在诱导组和对... 目的：研究Detla1基因在大鼠肌源性干细胞体外诱导分化为神经样细胞过程中的表达。方法：大鼠乳鼠骨骼肌体外培养增殖,分为对照组完全培养基培养，实验组加入诱导剂培养。通过RT-PCR、免疫荧光和免疫印迹法观察Detla1基因在诱导组和对照组的表达差异。结果：对照组Detla1基因表达强阳性，实验组基本不表达。结论：大鼠肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中Detla1基因表达减低。 展开更多
关键词 Detla1基因 肌源性干细胞 神经样细胞
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雪旺细胞移植治疗脊髓损伤的研究现状 被引量：5
4
作者 智晓东 吕刚 《淮海医药》 CAS 2007年第3期281-282,共2页
关键词 雪旺细胞 细胞移植 脊髓损伤 综述文献
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双锁定钢板固定治疗肱骨髁间骨折疗效分析 被引量：2
5
作者 毕云龙 曹阳 《中国医学工程》 2012年第4期118-118,120,共2页
目的总结分析双锁定钢板固定治疗肱骨髁间骨折的临床疗效。方法选取肱骨髁间骨折患者22例,采用经肱三头肌舌形瓣入路双垂直锁定钢板固定。结果本组22例患者均获随访,术后随访6-14个月,复查X线见骨折处均愈合良好,无畸形愈合,采用Jupite... 目的总结分析双锁定钢板固定治疗肱骨髁间骨折的临床疗效。方法选取肱骨髁间骨折患者22例,采用经肱三头肌舌形瓣入路双垂直锁定钢板固定。结果本组22例患者均获随访,术后随访6-14个月,复查X线见骨折处均愈合良好,无畸形愈合,采用Jupiter评分标准评价肘关节功能,优14例,良5例,可2例,差1例,优良率为86.36%。结论经肱三头肌舌形瓣入路双垂直锁定钢板可为肱骨髁间骨折提供坚强的内固定,支持术后早期功能锻炼,有效防止骨折畸形愈合及肘关节功能受损。 展开更多
关键词 肱骨髁间骨折 双锁定钢板 舌形瓣入路
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共培养条件下大脑皮层神经元诱导肌源性干细胞成神经元样细胞
6
作者 刘世琼 梅晰凡 +2 位作者 任甫 刘畅 张赫 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期176-179,219,F0002,共6页
目的：研究使用共培养系统将肌源性干细胞（MDSCs）诱导为神经元样细胞的可行性及机制.方法：分离新生SD大鼠的MDSCs及皮层神经元,以叔丁基过氧化氢（终浓度为200μmol/L）损伤神经元,构建氧化应激损伤的神经元模型.当MDSCs差速贴壁至第... 目的：研究使用共培养系统将肌源性干细胞（MDSCs）诱导为神经元样细胞的可行性及机制.方法：分离新生SD大鼠的MDSCs及皮层神经元,以叔丁基过氧化氢（终浓度为200μmol/L）损伤神经元,构建氧化应激损伤的神经元模型.当MDSCs差速贴壁至第5代时,将其随机分为MDSCs和损伤的神经元置于共培养系统中培养（损伤组）、MDSCs和正常神经元共培养（未损伤组）以及MDSCs置于共培养系统中单独培养（MDSCs组）,培养7d后用神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学法鉴定诱导的结果,并用大鼠脑源性神经营养因子（BDNF） ELISA试剂盒检测不同时间点各组培养液中该因子的分泌情况.结果：共培养7d后检测到损伤组与未损伤组均有部分MDSCs分化为表达NSE的神经元样细胞,前者分化率高于后者,MDSCs组未见有细胞分化为神经元样细胞.第2天损伤组BDNF的分泌量高于未损伤组,同时,损伤组第2天BDNF的分泌量高于第4天和第6天的分泌量.在不同时间点损伤组与未损伤组培养液中BDNF的分泌量均高于MDSCs组.结论：在共培养条件下,大鼠皮层神经元可诱导MDSCs为神经元样细胞,这与神经元分泌的BDNF有着重要联系,MDSCs也可分泌BDNF. 展开更多
关键词 肌源性干细胞 神经元 神经元样细胞 插入式培养皿 脑源性神经营养因子
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白血病抑制因子及神经生长因子联合诱导大鼠肌源性干细胞向神经元样细胞分化
7
作者 梅晰凡 杨彪 +2 位作者 刘福强 刘畅 任甫 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期633-635,共3页
目的:探讨白血病抑制因子(LIF)和神经生长因子(NGF)联合诱导大鼠肌源性干细胞分化为神经细胞的可能性和条件。方法:从大鼠乳鼠骨骼肌中分离培养肌源性干细胞,LIF和NGF进行分化诱导,以MEM培养基同等条件培养作对照,相差显微镜下观察细胞... 目的:探讨白血病抑制因子(LIF)和神经生长因子(NGF)联合诱导大鼠肌源性干细胞分化为神经细胞的可能性和条件。方法:从大鼠乳鼠骨骼肌中分离培养肌源性干细胞,LIF和NGF进行分化诱导,以MEM培养基同等条件培养作对照,相差显微镜下观察细胞形态变化。免疫组织化学显色观察神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白的表达,测定细胞转化率。结果:肌源性干细胞经过LIF和NGF诱导12 h后,部分细胞分化,类似神经细胞;免疫组织化学显色观察神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白呈强阳性。结论:LIF和NGF联合应用能将肌源性干细胞诱导成神经元样细胞,为细胞移植治疗脊髓损伤提供一种高效种子细胞生产方法。 展开更多
关键词 白血病抑制因子 神经生长因子 肌源性干细胞 神经元样细胞
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绿色荧光蛋白腺病毒表达载体在大鼠肌源性干细胞标记中的应用
8
作者 杨彪 梅晰凡 +1 位作者 刘福强 任甫 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期332-335,共4页
目的:对大鼠肌源性干细胞转染携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒表达载体,为进一步行标记细胞移植治疗实验奠定基础。方法:复苏并培养人胚胎肾293细胞,进行包装重组及大规模扩增腺病毒;原代培养大鼠肌源性干细胞并进行GFP基因转染,荧光显微... 目的:对大鼠肌源性干细胞转染携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒表达载体,为进一步行标记细胞移植治疗实验奠定基础。方法:复苏并培养人胚胎肾293细胞,进行包装重组及大规模扩增腺病毒;原代培养大鼠肌源性干细胞并进行GFP基因转染,荧光显微镜观察转染情况并计算转染率。结果:人胚胎肾293细胞在普通培养条件下生长良好,加入Ad-GFP病毒液后48h荧光显微镜观察绝大多数细胞呈悬浮状态,带有较强的绿色荧光;转染肌源性干细胞后呈Desmin免疫组织化学显色阳性;48h荧光转染率为83.14%,4d为78.35%,8d为75.12%。结论:采用携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒表达载体标记肌源性干细胞的方法安全可靠、简便有效,且能保持肌源性干细胞原有生物学特性。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 肌源性干细胞 转染
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软骨细胞培养液诱导肌源性干细胞转化为软骨样细胞
9
作者 袁亚江 梅晰凡 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期451-454,共4页
目的：体外定向诱导大鼠肌源性干细胞（MDSCs）向软骨细胞转化，并对诱导细胞进行鉴定。方法：用差速贴壁的方法对SD大鼠MDSCs进行分离和培养。同时将软骨细胞进行体外培养，收集软骨细胞培养液作为MDSCs诱导液。将MDSCs进行诱导分化，9... 目的：体外定向诱导大鼠肌源性干细胞（MDSCs）向软骨细胞转化，并对诱导细胞进行鉴定。方法：用差速贴壁的方法对SD大鼠MDSCs进行分离和培养。同时将软骨细胞进行体外培养，收集软骨细胞培养液作为MDSCs诱导液。将MDSCs进行诱导分化，9d后取出标本，行甲苯胺蓝染色检测软骨基质的分泌，免疫组织化学检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达。RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA表达。结果：5d后镜下见细胞形态由梭形向多边多角形转化。9d后诱导组甲苯胺蓝染色阳性，Ⅱ型胶原免疫组织化学检测阳性，RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA呈阳性表达。结论：软骨细胞培养液可诱导MDSC向软骨细胞转化。 展开更多
关键词 肌源性干细胞 软骨细胞 细胞分化
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肌源性干细胞移植修复糖尿病胰岛功能的旁分泌机制研究 被引量：1
10
作者 孟林燕 刘畅 +3 位作者 王欣燕 祝文静 张秀云 梅晰凡 《中国医学工程》 2011年第5期35-36,39,共3页
目的阐明肌源性干细胞移植修复糖尿病小鼠胰岛功能的旁分泌机制及参与胰岛修复的信号通路。方法取6只大鼠的前肢肱三头肌与后肢腓肠肌,采用差速贴壁法纯化扩增大鼠肌源性干细胞,传至第4代用于移植。取40只大鼠,通过尾静脉注射链脲佐菌... 目的阐明肌源性干细胞移植修复糖尿病小鼠胰岛功能的旁分泌机制及参与胰岛修复的信号通路。方法取6只大鼠的前肢肱三头肌与后肢腓肠肌,采用差速贴壁法纯化扩增大鼠肌源性干细胞,传至第4代用于移植。取40只大鼠,通过尾静脉注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,32只成功造模,取24只随机均分为3组:实验a组胰腺被膜下移植肌源性干细胞约2×106个,实验b组胰腺被膜下移植(LY294002(10umol/L)+MD-SCs2×106),模型对照组同法给予等量不含细胞的培养液。余8只大鼠作为正常对照组。结果血糖变化:移植后1周,实验a组血糖出现显著下降并一直持续下降至第4周,与模型对照组比较差异有统计学意义。胰岛细胞和胰岛β细胞数变化:移植后4周模型对照组胰岛数目仍较少,胰岛β细胞也较少,实验a组小鼠胰岛数目增加,胰岛β细胞数目也增加,与模型对照组比较差异有显著统计学意义。Western Blotting检测发现实验a组pAKT表达显著上调,加入LY294002后即使加入MDSCs后也不能上调pAKT。结论肌源性干细胞移植在糖尿病大鼠胰腺被膜下对胰岛功能有修复作用。 展开更多
关键词 肌源性干细胞 糖尿病大鼠 移植 AKT
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