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黄芩苷对再灌注心肌细胞保护作用及与心肌细胞自噬的相关性 被引量:10
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作者 王鹏 马军军 杜亚明 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2016年第7期701-705,共5页
目的 :探讨黄芩苷对再灌注心肌细胞保护作用及与心肌细胞自噬的相关性。方法 :将48只大鼠随机分为4组(n=12):假手术组,假手术+黄芩苷组,缺血再灌注组,黄芩苷处理组。术前7天每日1次灌胃,建立各组模型。统计各组同时间点的血流动力学及... 目的 :探讨黄芩苷对再灌注心肌细胞保护作用及与心肌细胞自噬的相关性。方法 :将48只大鼠随机分为4组(n=12):假手术组,假手术+黄芩苷组,缺血再灌注组,黄芩苷处理组。术前7天每日1次灌胃,建立各组模型。统计各组同时间点的血流动力学及再灌注45 min后心肌梗死面积情况,免疫印迹试验(Western blot)测定再灌注30 min后心肌微管相关蛋白(LC3-Ⅱ)及自噬体膜标记蛋白(Becl-1)表达情况,再灌注30 min后检测线粒体膜通道转换孔(m PTP)开放情况。结果 :假手术组和假手术+黄芩苷组心肌梗死面积极小,不便进行比较。缺血再灌注组心肌梗死面积(41.32±1.85)%,黄芩苷处理组心肌梗死面积(23.30±1.60)%,两组差异有统计学意义(P<0.001)。再灌注30min后LC3-Ⅱ及Becl-1蛋白表达量,缺血再灌注组(LC3-Ⅱ:1.051±0.005,Becl-1:1.169±0.002)和黄芩苷处理组(LC3-Ⅱ:0.863±0.009,Becl-1:0.943±0.005)较假手术组(LC3-Ⅱ:0.763±0.007,Becl-1:0.647±0.014)明显增加(P<0.01);黄芩苷处理组较缺血再灌注组明显下降(P<0.01)。再灌注30 min后烟酰胺腺嘌呤=核苷酸(NAD+)含量(nmol/mg),缺血再灌注组(6.02±0.33)和黄芩苷处理组(9.56±0.53)较假手术组(11.28±0.37)明显下降(P<0.01);黄芩苷处理组较缺血再灌注组明显增加(P<0.01)。结论 :黄芩苷对正常心肌细胞自噬无影响,但能显著减少缺血再灌注心肌梗死面积,降低再灌注后的过度自噬发生,其机制可能通过抑制m PTP开放从而减少自噬的相关诱导因素发挥作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 心肌再灌注 保护 自噬
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shRNA下调BAG-1表达降低肺癌A549细胞对顺铂的耐药性 被引量:1
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作者 刘洋 刘志良 +1 位作者 哈敏文 王亚帝 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期706-710,共5页
目的:通过载体介导的shRNA下调BAG-1基因(Bcl-2 associated athanogene-1)表达,探讨其对肺癌A549细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药性的影响。方法:构建靶向BAG-1的shRNA干扰载体pGCsi-BAG-1,稳定转染A549细胞。实验组使用稳定转染pGCsi-BAG-... 目的:通过载体介导的shRNA下调BAG-1基因(Bcl-2 associated athanogene-1)表达,探讨其对肺癌A549细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药性的影响。方法:构建靶向BAG-1的shRNA干扰载体pGCsi-BAG-1,稳定转染A549细胞。实验组使用稳定转染pGCsi-BAG-1的细胞株(BAG-1-shRNA),阴性对照组使用无关序列质粒转染的细胞株(SC-shRNA),对照组使用未转染的亲本A549细胞株(Control)。Western blotting检测pGCsi-BAG-1转染对A549细胞BAG-1、Bcl-2表达的影响。MTT法、流式细胞术分别检测pGCsi-BAG-1转染对DDP处理后A549细胞的增殖和凋亡的影响。结果:成功构建稳定干扰BAG-1表达的A549细胞株,BAG-1-shRNA组细胞中BAG-1和Bcl-2蛋白表达显著低于SC-shRNA组和对照组(均P<0.05)。随DDP(2.5~40μg/ml)浓度增加,各组细胞增殖抑制率也随之升高,DDP浓度为2.5μg/ml时,BAG-1-shRNA组A549细胞的增殖抑制率即显著高于SC-shRNA组和对照组[(22.26±4.89)%vs(10.07±3.82)%,(8.12±4.09)%,均P<0.05]。与SC-shRNA组和对照组相比,DDP(2.5μg/ml)处理24 h后,BAG-1-shRNA组凋亡率显著升高[(37.8 4±3.62)%vs(16.80±2.81)%、(17.10±3.11)%,P<0.05]。结论:下调BAG-1表达可抑制DDP作用下的A549细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 BAG-1基因 肺癌 A549细胞 顺铂 耐药
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ABCE1基因siRNA稳定转染小细胞肺癌细胞株阳性克隆的筛选 被引量:1
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作者 黄波 王晓东 郎贤平 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期8-11,共4页
目的构建携带绿色荧光蛋白的ABCE1基因的siRNA表达载体,通过将载体转染入小细胞肺癌细胞株NCI-H446,筛选稳定转染细胞株。方法根据ABCE1的DNA序列设计3对siRNA引物,构建可用于筛选阳性克隆且带有绿色荧光的ABCE1基因siRNA表达载体ABCE1-... 目的构建携带绿色荧光蛋白的ABCE1基因的siRNA表达载体,通过将载体转染入小细胞肺癌细胞株NCI-H446,筛选稳定转染细胞株。方法根据ABCE1的DNA序列设计3对siRNA引物,构建可用于筛选阳性克隆且带有绿色荧光的ABCE1基因siRNA表达载体ABCE1-pRNAT-U6.1/Neo-siRNA-1、ABCE1-PRNAT-U6.1/Neo-siRNA-2及ABCE1-pRNAT-U6.1/Neo-siRNA-N,采用FUGENE-HD法将载体转染入NCI-H446细胞中,并以G418进行阳性克隆筛选,筛选ABCE1基因沉默的稳定转染细胞系。结果经酶切和DNA测序验证,证实ABCE1-pRNAT-U6.1/Neo-siRNA表达载体构建成功。将ABCE1基因siRNA表达载体成功转染小细胞肺癌细胞NCI-H446后,小细胞肺癌细胞内可见绿色荧光,通过G418筛选,获得了ABCE1基因沉默的小细胞肺癌细胞系,该细胞系的ABCE1水平明显低于未转染siRNA的小细胞肺癌细胞。结论成功的构建了ABCE1基因siRNA表达载体ABCE1-pRNAT-U6.1/Neo-siRNA。筛选出ABCE1基因沉默的稳定转染小细胞肺癌细胞系,为今后应用ABCE1基因siRNA表达载体研究ABCE1基因的作用机制提供实验基础。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 ABCE1基因 SIRNA
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手术治疗食管黏膜隆起性病变376例临床分析
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作者 张其刚 李文雅 +1 位作者 杜亚明 刘宏旭 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期394-395,共2页
回顾性总结376例食管黏膜隆起性病变患者病变部位及术后病理特点,探讨食管黏膜隆起性病变的特点及诊治经验。
关键词 食管黏膜隆起 临床特点
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多层螺旋CT及其三维重组对中央型肺癌的诊断价值
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作者 牛玉军 王忠彬 王志铭 《放射学实践》 2006年第11期1133-1136,共4页
目的:评价多层螺旋CT(MSCT)及其三维重组对中央型肺癌(CLC)的诊断价值。方法:58例CLC患者,经MSCT平扫,增强动、静脉期扫描,二维多平面及曲面重组(MPR及CPR),三维容积重组(VR)、最大密度投影(MIP)及仿真内窥镜重组(CTVE),同时均经支气管... 目的:评价多层螺旋CT(MSCT)及其三维重组对中央型肺癌(CLC)的诊断价值。方法:58例CLC患者,经MSCT平扫,增强动、静脉期扫描,二维多平面及曲面重组(MPR及CPR),三维容积重组(VR)、最大密度投影(MIP)及仿真内窥镜重组(CTVE),同时均经支气管镜及其病理检查,44例经术后病理证实。并将各种重组诊断结果与横断面扫描结果进行统计学对比分析。结果:58例CLC MSCT三维重组、支气管镜及手术分三型:腔内结节型5例,环状狭窄型19例,偏心狭窄截断型34例。MPR及CPR、MIP、CTVE诊断结果与横断面扫描相比,差异无显著性;VR差异则有显著性。结论:MSCT三维重组能准确分型诊断CLC,评价气管、支气管树肿瘤侵犯程度与范围,具有较好的临床应用价值。 展开更多
关键词 肺肿瘤 体层摄影术 X线计算机 成像 三组
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SATB1——核基质结合区结合蛋白质1的研究进展 被引量:3
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作者 程锋 肖旭阳 +1 位作者 殷南昌 王晓东 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第22期4220-4222,共3页
在真核生物的细胞核中.存在一种由非组蛋白的纤维蛋白和大分子量的RNA组成的三维网架体系.这就是核基质。结合在核基质上的特异DNA序列称为核基质结合区(matrix attachment regions S/MAR以下统称MAR)。核基质结合区结合蛋白质1 (... 在真核生物的细胞核中.存在一种由非组蛋白的纤维蛋白和大分子量的RNA组成的三维网架体系.这就是核基质。结合在核基质上的特异DNA序列称为核基质结合区(matrix attachment regions S/MAR以下统称MAR)。核基质结合区结合蛋白质1 (special AT-rich sequence binding proteinl, SATB1 ) 是一种组织特异性表达的核基质附着区(matrix attachment region,MAR)结合蛋白。 展开更多
关键词 核基质结合区 结合蛋白质 SATB1 组织特异性表达 DNA序列 三维网架 纤维蛋白 非组蛋白
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