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新生大鼠肌源性干细胞跨胚层分化为胰岛素分泌细胞的研究 被引量：2
1
作者 王滢丽 刘畅 +2 位作者 梅晰凡 郭占鹏 李全双 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期415-419,共5页
目的探讨新生大鼠肌源性干细胞(MDSCs)在体外跨胚层转分化为胰岛素分泌细胞(IPCs)的可能性。方法提取新生大鼠MDSCs原代细胞,差速贴壁培养后行Desmin免疫细胞化学鉴定。然后将细胞分为3组:胰腺提取液诱导组、化学方法诱导组、空白对照组... 目的探讨新生大鼠肌源性干细胞(MDSCs)在体外跨胚层转分化为胰岛素分泌细胞(IPCs)的可能性。方法提取新生大鼠MDSCs原代细胞,差速贴壁培养后行Desmin免疫细胞化学鉴定。然后将细胞分为3组:胰腺提取液诱导组、化学方法诱导组、空白对照组,分别诱导并同期观察细胞的生长形态,采用双硫腙(DTZ)染色鉴定胰岛素分泌细胞,RT-PCR方法检测诱导后细胞的基因表达情况。结果获得高纯度的MDSCs,且Desmin免疫细胞化学鉴定呈阳性。胰腺提取液诱导组诱导后4d,相差显微镜下可见细胞团结构,诱导后6d呈半贴壁状态,诱导后12d形成典型的胰岛样细胞团,较化学方法诱导组诱导时间缩短3d。RT-PCR检测显示:胰腺提取液诱导组诱导6d后可检测到胰岛前体细胞相关基因Ngn3、nestin、PDX-1的表达;诱导12d后可检测到胰岛素基因的表达,但未检测到Ngn3、nestin、PDX-1的表达。结论胰腺提取液可模仿胰岛细胞发育的微环境,并诱导大鼠MDSCs跨胚层分化为胰岛素分泌细胞。 展开更多
关键词 成体干细胞 转分化 胰岛素分泌细胞
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替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞因子及胰岛素敏感性的影响 被引量：10
2
作者 黄颖睿 刘畅 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期632-634,共3页
目的探讨替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的影响及其机制。方法选择30只雄性SD大鼠,将大鼠随机分为对照组(10只)和高脂组(20只),对照组给予常规饲料喂养,高脂组用高脂饲料喂养8周制备胰岛素抵抗模型。8周后再将成模大鼠随机分为... 目的探讨替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的影响及其机制。方法选择30只雄性SD大鼠,将大鼠随机分为对照组(10只)和高脂组(20只),对照组给予常规饲料喂养,高脂组用高脂饲料喂养8周制备胰岛素抵抗模型。8周后再将成模大鼠随机分为模型组和干预组。干预组大鼠给予替米沙坦5mg.kg-1.d-1灌胃6周。测定3组大鼠血糖等血清指标及内脏脂肪组织脂联素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平,用胰岛素敏感指数(ISI)评价胰岛素抵抗。结果模型制备成功后,模型组和干预组大鼠空腹胰岛素水平〔(30.1±3.6)mU/L和(30.3±3.5)mU/L〕及ISI〔(-5.14±0.35)和(-5.15±0.28)〕与对照组〔分别为(14.5±2.1)mU/L和(-4.35±0.27)〕比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。替米沙坦干预6周后干预组大鼠空腹胰岛素水平〔(23.3±2.9)mU/L〕及ISI(-4.86±0.30)与模型组〔分别为(33.1±3.6)mU/L和(-5.28±0.30)〕比较,差异有统计学意义(P<0.05)。干预组大鼠TNF-α及脂联素表达水平与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论替米沙坦能提高内脏脂肪组织脂联素水平,降低TNF-α表达,提高胰岛素的敏感性。 展开更多
关键词 替米沙坦 胰岛素抵抗 脂联素 肿瘤坏死因子Α
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胰岛素对糖尿病大鼠再灌注损伤性心肌的影响及可能机制 被引量：2
3
作者 刘畅 刘国良 +1 位作者 齐志敏 王滢丽 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期338-340,共3页
目的观察胰岛素对糖尿病和非糖尿病大鼠再灌注损伤性心肌的影响并探讨其可能机制。方法复制实验性糖尿病大鼠模型,造模9周,结扎左冠状动脉前降支复制心肌缺血/再灌注模型。动物随机分为6组,糖尿病组和非糖尿病组分别给予生理盐水、胰岛... 目的观察胰岛素对糖尿病和非糖尿病大鼠再灌注损伤性心肌的影响并探讨其可能机制。方法复制实验性糖尿病大鼠模型,造模9周,结扎左冠状动脉前降支复制心肌缺血/再灌注模型。动物随机分为6组,糖尿病组和非糖尿病组分别给予生理盐水、胰岛素或胰岛素+渥曼青霉素。观察心肌血清酶学、心律失常评分及心肌磷酸化蛋白激酶b(p-Akt)和磷酸化Bad(p-Bad)表达。结果与非糖尿病对照组比较,胰岛素组可以使血清肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)降低;胰岛素组心律失常评分降低;心肌组织p-Akt和p-Bad蛋白表达高于非糖尿病对照组,胰岛素的这种作用被渥曼青霉素取消。与糖尿病对照组比较,胰岛素组可以使血清CK和CK-MB降低;胰岛素组心律失常评分降低;心肌组织p-Akt和p-Bad蛋白表达增强,该变化可以被渥曼青霉素取消。胰岛素对糖尿病大鼠和非糖尿病大鼠的心肌再灌注损伤的影响的比较:糖尿病大鼠的血清CK和CK-MB高于非糖尿病大鼠;两者的心律失常评分比较无显著差异;非糖尿病胰岛素组心肌p-Akt表达高于糖尿病胰岛素组。结论胰岛素通过PI3K/Akt信号转导途径对于非糖尿病再灌注损伤心肌具有保护作用,胰岛素对于糖尿病再灌注损伤心肌同样具有保护作用,但保护作用效果弱于非糖尿病心肌。 展开更多
关键词 糖尿病 胰岛素 缺血再灌注 大鼠
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成肌干细胞在透明质酸凝胶载体中诱导分化为软骨细胞的研究 被引量：1
4
作者 李全双 梅晰凡 +2 位作者 郭占鹏 王滢丽 秦书俭 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期829-832,共4页
目的探讨以透明质酸钠凝胶作为组织工程软骨载体、以成肌干细胞作为种子细胞诱导分化形成软骨细胞的可行性。方法体外分离培养兔成肌干细胞,采用结蛋白(Desmin)细胞化学染色进行鉴定,并观察兔成肌干细胞在不同浓度透明质酸钠凝胶中的生... 目的探讨以透明质酸钠凝胶作为组织工程软骨载体、以成肌干细胞作为种子细胞诱导分化形成软骨细胞的可行性。方法体外分离培养兔成肌干细胞,采用结蛋白(Desmin)细胞化学染色进行鉴定,并观察兔成肌干细胞在不同浓度透明质酸钠凝胶中的生长状态。在5%透明质酸钠凝胶中以骨形态发生蛋白2(BMP-2)诱导兔成肌干细胞,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,并通过甲苯胺蓝染色、免疫细胞化学及RT-PCR技术对诱导后的细胞进行鉴定。结果原代培养兔成肌干细胞Desmin细胞化学染色呈阳性表达,且在不同浓度透明质酸钠凝胶中均生长良好。BMP-2诱导培养1d后,成肌干细胞即开始于透明质酸钠凝胶中伸展生长,诱导培养10d后,细胞形态由梭形向多边多角形转化,甲苯胺蓝染色阳性,Ⅱ型胶原免疫荧光检测阳性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和聚焦蛋白聚糖mRNA呈阳性表达。结论兔成肌干细胞可在适当浓度BMP-2诱导下分化为软骨样细胞,透明质酸钠凝胶可作为软骨组织工程的良好载体。 展开更多
关键词 成肌细胞 骨形态发生蛋白质类 透明质酸 细胞分化
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小型医用振动试验平台的设计研究 被引量：1
5
作者 陈晔 姜丁文 +1 位作者 何勍 刘畅 《机械设计与制造》 北大核心 2018年第4期211-213,共3页
针对现有振动试验台无法进行单独的振幅、激振频率的精准调节问题,研制了一种小型的医学用振动试验平台。介绍了该试验台的结构及设计难点,提出了解决方案:通过改变执行机构的原动件运动学尺寸调整振幅,通过对电机变频调速调整频率。介... 针对现有振动试验台无法进行单独的振幅、激振频率的精准调节问题,研制了一种小型的医学用振动试验平台。介绍了该试验台的结构及设计难点,提出了解决方案:通过改变执行机构的原动件运动学尺寸调整振幅,通过对电机变频调速调整频率。介绍了关键零部件的定位、固定原理。基于继电器控制设计了试验台的电气控制系统,并给出了电气系统结构图。对样机的应用证明:该试验台可针对所需的细胞振动试验对振幅和激振频率做出精准的调节,且结构简单、操作简明,能进行间歇试验的自动操作,且成本低廉。 展开更多
关键词 细胞振动 试验台 曲柄滑块 振幅调节 变频调速 自动控制
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细胞共培养条件下大鼠肌源性干细胞对氧化应激损伤神经元的保护作用
6
作者 梅晰凡 刘世琼 +4 位作者 刘畅 董娜 袁亚江 郭占鹏 李全双 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期658-664,共7页
目的:研究肌源性干细胞(MDSCs)与氧化应激损伤神经元共培养条件下MDSCs对后者的保护作用。方法:分离新生SD大鼠的MDSCs及皮层神经元,以叔丁基过氧化氢损伤神经元,构建氧化应激损伤的神经元模型。实验分为2组,损伤组:将第5代MDSCs和损伤... 目的:研究肌源性干细胞(MDSCs)与氧化应激损伤神经元共培养条件下MDSCs对后者的保护作用。方法:分离新生SD大鼠的MDSCs及皮层神经元,以叔丁基过氧化氢损伤神经元,构建氧化应激损伤的神经元模型。实验分为2组,损伤组:将第5代MDSCs和损伤的神经元置于共培养系统中培养4 h;对照组:损伤神经元于共培养系统中单独培养4 h。培养7 d后通过Hoster33258及流式细胞仪检测第2、4、6 d各组神经元的存活率,并用RT-PCR对相关基因进行分析,探究差异的内在原因。结果:Hoster33258及流式细胞仪检测结果显示:在共培养2、4、6 d三个时间点损伤组的神经元的存活率要远远高于对照组(P<0.05),凋亡率明显低于对照组,RT-PCR检测到损伤组神经元在三个时间点Bcl-2的表达水平均较对照组强(P<0.05),而Bax的表达水平均较对照组低(P<0.05)。结论:在共培养条件下,MDSCS对氧化应激损伤神经元具有保护作用,而这与其可促使损伤神经元Bcl-2的表达水平升高以及抑制Bax的表达有关。 展开更多
关键词 肌源性干细胞 细胞培养 BCL-2 BAX 大鼠
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损伤脊髓组织提取液对大鼠肌源性干细胞向神经细胞诱导分化的实验研究
7
作者 杨彪 梅晰凡 +1 位作者 刘福强 秦书俭 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2008年第5期532-535,共4页
目的:探讨大鼠肌源性干细胞在损伤脊髓组织提取液中向神经细胞分化的可能性,为神经再生及脊髓损伤的治疗提供一种新方法。方法:从大鼠乳鼠骨骼肌中分离培养肌源性干细胞,将正常、伤后1d,伤后1周及伤后3周脊髓提取液加入细胞培养基中,观... 目的:探讨大鼠肌源性干细胞在损伤脊髓组织提取液中向神经细胞分化的可能性,为神经再生及脊髓损伤的治疗提供一种新方法。方法:从大鼠乳鼠骨骼肌中分离培养肌源性干细胞,将正常、伤后1d,伤后1周及伤后3周脊髓提取液加入细胞培养基中,观察细胞形态的变化,并采用免疫组织化学法检测诱导后的细胞表达NSE特异性标志物。结果:加入脊髓提取液诱导后24h,部分细胞的形态已发生改变,3d后大部分细胞不仅在形态上表现为神经元样特征,而且NSE等特异性抗体呈阳性表达。结论:损伤脊髓组织液能将肌源性干细胞诱导成神经元样细胞。 展开更多
关键词 肌源性干细胞 细胞分化 神经元样细胞
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肝脏ChREBP在有氧运动预防C57BL/6小鼠非酒精性脂肪肝形成中的作用 被引量：5
8
作者 吴皓 刘畅 +2 位作者 管又飞 王春炅 李沙 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第4期446-450,共5页
目的探讨肝脏碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)基因及其下游靶基因在12周有氧运动预防C57BL/6小鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)中的作用。方法 8周龄C57BL/6小鼠随机分为正常饮食组(ND),正常饮食运动组(ND-Ex),高脂饮食组(HFD),高脂饮食运... 目的探讨肝脏碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)基因及其下游靶基因在12周有氧运动预防C57BL/6小鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)中的作用。方法 8周龄C57BL/6小鼠随机分为正常饮食组(ND),正常饮食运动组(ND-Ex),高脂饮食组(HFD),高脂饮食运动组(HFD-Ex)。高脂喂养进行非酒精性脂肪肝造模。有氧运动采用无负重游泳。检测各组小鼠肝脏、血甘油三脂及总胆固醇含量,空腹血糖,口服糖耐量,肝中脂质沉积情况,肝脏ChREBP基因及其下游靶基因表达变化,肝脏Akt磷酸化水平。结果与ND组相比,HFD组小鼠体重及血脂增加,肝甘油三酯增加并出现明显脂质沉积,血糖调节能力下降,ChREBP基因及其下游靶基因表达增加,Akt磷酸化水平下降。与HFD组相比,HFD-Ex组小鼠血脂下降,肝甘油三酯含量减少、脂质沉积减轻,未出现空腹血糖及糖耐量异常,ChREBP基因及其下游靶基因表达下降,Akt磷酸化水平增加。结论有氧运动对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝有预防作用,这可能与有氧运动抑制ChREBP基因表达有关。 展开更多
关键词 有氧运动 非酒精性脂肪肝 CHREBP FAS SCD1
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