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猪CFL2b基因cDNA克隆初步分析
被引量:
4
1
作者
赵微
曾瑞霞
+2 位作者
巴彩凤
宋慧娟
苏玉虹
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期388-392,共5页
利用基因表达谱芯片分析法筛选出与大白猪高肌肉产量-肌纤维形成有关的CFL2b基因.参考人和小鼠CFL2b基因序列,采用SMART-RACE技术结合EST序列拼接技术,从猪骨骼肌肌肉中首次克隆了猪CFL2b的全长cDNA序列(GenBank登录号EU561660,EU561661...
利用基因表达谱芯片分析法筛选出与大白猪高肌肉产量-肌纤维形成有关的CFL2b基因.参考人和小鼠CFL2b基因序列,采用SMART-RACE技术结合EST序列拼接技术,从猪骨骼肌肌肉中首次克隆了猪CFL2b的全长cDNA序列(GenBank登录号EU561660,EU561661),Northern杂交检测CFL2b基因mRNA.结果表明,猪CFL2b基因含有2个转录本,长转录本3012bp,短转录本1466bp.CFL2b基因在多种真核生物中都有表达,且编码区序列非常保守,开放式读码框501bp编码了166个氨基酸的蛋白质.氨基酸序列分析表明,猪CFL2b基因与人和小鼠氨基酸同源性分别为100%和99.1%.核苷酸序列相似性分别为88.1%和74.9%.
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关键词
猪
CFL2b
CDNA
SMART
RACE
肌纤维性状
序列分析
NORTHERN杂交
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职称材料
猪CFL2b/荧光蛋白融合基因在小鼠成肌细胞中的表达与定位
2
作者
赵微
李久纯
+2 位作者
巴彩凤
苏荣健
苏玉虹
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第35期15364-15366,共3页
[目的]了解猪CFL2b基因在成肌细胞中的表达与定位。[方法]用RT-PCR方法扩增得到猪CFL2b基因,连接到T载体上,双酶切后通过定向克隆将其与真核表达载体pEGFP-N1的绿色荧光蛋白基因融合,构建CFL2b-荧光蛋白融合基因表达载体。然后经真核表...
[目的]了解猪CFL2b基因在成肌细胞中的表达与定位。[方法]用RT-PCR方法扩增得到猪CFL2b基因,连接到T载体上,双酶切后通过定向克隆将其与真核表达载体pEGFP-N1的绿色荧光蛋白基因融合,构建CFL2b-荧光蛋白融合基因表达载体。然后经真核表达质粒-脂质体介导,导入C2C12细胞系。[结果]荧光显微镜观察显示:在空白载体pEGFP-N1转染的C2C12细胞中荧光布满整个细胞,而在转染阳性载体pEGFP-N1-CFL2b的C2C12细胞中荧光主要聚集在细胞质的肌动蛋白丝。表明转染的C2C12细胞系能够高效表达猪CFL2b蛋白,猪CFL2b基因表达的蛋白定位于细胞质中。[结论]该研究为CFL2b基因的功能及该基因与猪肉质性状的相关性的研究奠定了基础。
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关键词
猪
CFL2b基因
基因表达定位
C2C12细胞
pEGFP—N1
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职称材料
脐血来源的CD29^+细胞神经转分化的研究
3
作者
王玉彬
马云胜
巴彩凤
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期633-637,共5页
目的:脐血中分离CD29+细胞并诱导其转化为神经元样细胞,为神经损伤与修复提供种子细胞来源。方法:免疫磁珠法分离出脐血CD29+细胞,体外培养扩增。取2代细胞以BDNF、GDNF、PDGF为诱导因子对其进行神经诱导分化。观察细胞形态、生长情况,...
目的:脐血中分离CD29+细胞并诱导其转化为神经元样细胞,为神经损伤与修复提供种子细胞来源。方法:免疫磁珠法分离出脐血CD29+细胞,体外培养扩增。取2代细胞以BDNF、GDNF、PDGF为诱导因子对其进行神经诱导分化。观察细胞形态、生长情况,流式细胞仪检测细胞周期、表型及HLA相关抗原。诱导后免疫组织化学染色法检测Nestin、NSE、NF、GFAP表达。Western Blot检测β-tubulin、Tau的表达。结果:细胞贴壁生长,呈长梭形,细胞表型为CD29+、CD44+、CD166+。在诱导后,细胞逐渐增大并伸出明显突起。免疫组织化学染色结果显示,Nestin、NSE、NF、GFAP表达阳性。Western Blot显示了相应蛋白的表达。结论:脐血CD29+细胞在体外可以向神经元样细胞转化,有望成为异体修复神经损伤的种子细胞来源。
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关键词
脐血
CD29+
神经分化
种子细胞
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职称材料
猪附红细胞体病家兔感染模型的免疫指标检测
被引量:
4
4
作者
唐莲莲
潘叶
+4 位作者
于江红
曹蕾
王慧敏
巴彩凤
赵微
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009年第19期9009-9010,共2页
[目的]观察家兔人工感染猪附红细胞体后的免疫指标的变化。[方法]采用猪附红细胞体阳性血样,以腹腔注射的方式人工感染家兔。模型建立后,通过血液压片镜检及PCR方法检测。感染家兔进行红细胞免疫功能的测定、T淋巴细胞百分率检测,并利...
[目的]观察家兔人工感染猪附红细胞体后的免疫指标的变化。[方法]采用猪附红细胞体阳性血样,以腹腔注射的方式人工感染家兔。模型建立后,通过血液压片镜检及PCR方法检测。感染家兔进行红细胞免疫功能的测定、T淋巴细胞百分率检测,并利用淋转实验等对家兔感染后的免疫指标进行监测。[结果]家兔感染附红细胞体后,RBC-C3b和RBC-IC花环率明显下降,外周血ANA;E+T淋巴细胞百分率显著降低,淋巴细胞的转化功能差异不明显。[结论]猪附红细胞体人工感染家兔后可引起家兔的细胞免疫,造成红细胞免疫功能下降。
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关键词
附红细胞体
动物模型
红细胞免疫
T淋巴细胞
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职称材料
题名
猪CFL2b基因cDNA克隆初步分析
被引量:
4
1
作者
赵微
曾瑞霞
巴彩凤
宋慧娟
苏玉虹
机构
辽宁医学院实验动物教研室
辽宁医学院
高校分子细胞生物学与新药开发重点
实验
室
辽宁医学院
畜牧兽
医学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期388-392,共5页
基金
辽宁省自然科学基金(No.20072205)
辽宁省科技厅基金(No.2007408001-7)~~
文摘
利用基因表达谱芯片分析法筛选出与大白猪高肌肉产量-肌纤维形成有关的CFL2b基因.参考人和小鼠CFL2b基因序列,采用SMART-RACE技术结合EST序列拼接技术,从猪骨骼肌肌肉中首次克隆了猪CFL2b的全长cDNA序列(GenBank登录号EU561660,EU561661),Northern杂交检测CFL2b基因mRNA.结果表明,猪CFL2b基因含有2个转录本,长转录本3012bp,短转录本1466bp.CFL2b基因在多种真核生物中都有表达,且编码区序列非常保守,开放式读码框501bp编码了166个氨基酸的蛋白质.氨基酸序列分析表明,猪CFL2b基因与人和小鼠氨基酸同源性分别为100%和99.1%.核苷酸序列相似性分别为88.1%和74.9%.
关键词
猪
CFL2b
CDNA
SMART
RACE
肌纤维性状
序列分析
NORTHERN杂交
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
猪CFL2b/荧光蛋白融合基因在小鼠成肌细胞中的表达与定位
2
作者
赵微
李久纯
巴彩凤
苏荣健
苏玉虹
机构
辽宁医学院实验动物教研室
锦州市
动物
检疫站
辽宁医学院
畜牧兽
医学院
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第35期15364-15366,共3页
基金
辽宁自然科学基金(20072205)
辽宁省科技厅基金(200740-8001-7)
文摘
[目的]了解猪CFL2b基因在成肌细胞中的表达与定位。[方法]用RT-PCR方法扩增得到猪CFL2b基因,连接到T载体上,双酶切后通过定向克隆将其与真核表达载体pEGFP-N1的绿色荧光蛋白基因融合,构建CFL2b-荧光蛋白融合基因表达载体。然后经真核表达质粒-脂质体介导,导入C2C12细胞系。[结果]荧光显微镜观察显示:在空白载体pEGFP-N1转染的C2C12细胞中荧光布满整个细胞,而在转染阳性载体pEGFP-N1-CFL2b的C2C12细胞中荧光主要聚集在细胞质的肌动蛋白丝。表明转染的C2C12细胞系能够高效表达猪CFL2b蛋白,猪CFL2b基因表达的蛋白定位于细胞质中。[结论]该研究为CFL2b基因的功能及该基因与猪肉质性状的相关性的研究奠定了基础。
关键词
猪
CFL2b基因
基因表达定位
C2C12细胞
pEGFP—N1
Keywords
Pig
CFL2b gene
Gene expression and localization
C2C12 celI
pEGFP-N1
分类号
S865.13 [农业科学—野生动物驯养]
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职称材料
题名
脐血来源的CD29^+细胞神经转分化的研究
3
作者
王玉彬
马云胜
巴彩凤
机构
辽宁医学院
附属第一医院普外科
辽宁医学院
组织学与胚胎学
教研室
辽宁医学院
实验
动物
学
教研室
出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期633-637,共5页
基金
辽宁省教育厅基金(2008403)
文摘
目的:脐血中分离CD29+细胞并诱导其转化为神经元样细胞,为神经损伤与修复提供种子细胞来源。方法:免疫磁珠法分离出脐血CD29+细胞,体外培养扩增。取2代细胞以BDNF、GDNF、PDGF为诱导因子对其进行神经诱导分化。观察细胞形态、生长情况,流式细胞仪检测细胞周期、表型及HLA相关抗原。诱导后免疫组织化学染色法检测Nestin、NSE、NF、GFAP表达。Western Blot检测β-tubulin、Tau的表达。结果:细胞贴壁生长,呈长梭形,细胞表型为CD29+、CD44+、CD166+。在诱导后,细胞逐渐增大并伸出明显突起。免疫组织化学染色结果显示,Nestin、NSE、NF、GFAP表达阳性。Western Blot显示了相应蛋白的表达。结论:脐血CD29+细胞在体外可以向神经元样细胞转化,有望成为异体修复神经损伤的种子细胞来源。
关键词
脐血
CD29+
神经分化
种子细胞
Keywords
cord blood
CD29+
neural-differentiation
seed cells
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
猪附红细胞体病家兔感染模型的免疫指标检测
被引量:
4
4
作者
唐莲莲
潘叶
于江红
曹蕾
王慧敏
巴彩凤
赵微
机构
辽宁医学院
辽宁医学院实验动物教研室
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009年第19期9009-9010,共2页
基金
辽宁医学院奥鸿大学生科技活动基金(2008D07)
文摘
[目的]观察家兔人工感染猪附红细胞体后的免疫指标的变化。[方法]采用猪附红细胞体阳性血样,以腹腔注射的方式人工感染家兔。模型建立后,通过血液压片镜检及PCR方法检测。感染家兔进行红细胞免疫功能的测定、T淋巴细胞百分率检测,并利用淋转实验等对家兔感染后的免疫指标进行监测。[结果]家兔感染附红细胞体后,RBC-C3b和RBC-IC花环率明显下降,外周血ANA;E+T淋巴细胞百分率显著降低,淋巴细胞的转化功能差异不明显。[结论]猪附红细胞体人工感染家兔后可引起家兔的细胞免疫,造成红细胞免疫功能下降。
关键词
附红细胞体
动物模型
红细胞免疫
T淋巴细胞
Keywords
Eperythrozoon
Animal model
Erythrocyte immunity
T lymphocyte
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪CFL2b基因cDNA克隆初步分析
赵微
曾瑞霞
巴彩凤
宋慧娟
苏玉虹
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
猪CFL2b/荧光蛋白融合基因在小鼠成肌细胞中的表达与定位
赵微
李久纯
巴彩凤
苏荣健
苏玉虹
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
脐血来源的CD29^+细胞神经转分化的研究
王玉彬
马云胜
巴彩凤
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
猪附红细胞体病家兔感染模型的免疫指标检测
唐莲莲
潘叶
于江红
曹蕾
王慧敏
巴彩凤
赵微
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009
4
在线阅读
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职称材料
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