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缺氧条件下葫芦巴碱对ARPE-19细胞铁死亡信号通路的影响
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作者 岳欣欣 付洋 +1 位作者 尹晓燕 王敏 《眼科新进展》 北大核心 2025年第4期263-268,共6页
目的在缺氧条件下探讨和阐明葫芦巴碱(TRG)对ARPE-19细胞铁死亡信号通路的影响。方法常规培养ARPE-19细胞,用不同浓度的TRG干预ARPE-19细胞,确认TRG干预ARPE-19细胞的最佳浓度为40 mg·L^(-1),随后根据此浓度进行分组:NC组(细胞正... 目的在缺氧条件下探讨和阐明葫芦巴碱(TRG)对ARPE-19细胞铁死亡信号通路的影响。方法常规培养ARPE-19细胞,用不同浓度的TRG干预ARPE-19细胞,确认TRG干预ARPE-19细胞的最佳浓度为40 mg·L^(-1),随后根据此浓度进行分组:NC组(细胞正常培养24 h)、CoCl2组(150 mmol·L^(-1)CoCl2干预细胞24 h)、Fer-1组(1μmol·L^(-1)Fer-1处理细胞12 h,然后150 mmol·L^(-1)CoCl2干预细胞24 h)、TRG组(40 mg·L^(-1)的TRG处理细胞24 h,然后150 mmol·L^(-1)CoCl2干预细胞24 h)。采用检测试剂盒检测各组细胞中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)及Fe2+表达水平;流式细胞术检测各组细胞中活性氧(ROS)表达水平;Western blot检测各组细胞中缺氧诱导因子-1(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)及酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)的表达水平;免疫荧光染色观察各组细胞中VEGF与ACSL4蛋白表达水平。结果与CoCl2组相比,TRG组及Fer-1组细胞中ROS表达水平均下降,差异均有统计学意义(t=27.91、31.61,均为P<0.01)。各组细胞中MDA及Fe2+的表达水平变化情况与ROS变化趋势相似。与CoCl2组相比,Fer-1组及TRG组细胞中GSH表达水平均升高,差异均有统计学意义(t=15.95、12.76,均为P<0.01)。与CoCl2组相比,Fer-1组及TRG组细胞中HIF-1α与VEGF蛋白相对表达水平均减低,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。与NC组相比,CoCl2组细胞中ACSL4蛋白相对表达水平升高,而GPX4蛋白相对表达水平减低,差异均有统计学意义(t=31.05、13.18,均为P<0.01)。与CoCl2组相比,Fer-1组及TRG组细胞中ACSL4蛋白相对表达水平均减低,而GPX4蛋白相对表达水平均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。免疫荧光染色结果显示,与NC组相比,CoCl2组细胞中VEGF与ACSL4蛋白表达水平均增高。与CoCl2组相比,Fer-1组和TRG组细胞中VEGF与ACSL4蛋白表达水平均减低。结论TRG保护ARPE-19细胞免于缺氧诱导的氧化应激损伤是通过抑制铁死亡实现的。 展开更多
关键词 葫芦巴碱 铁死亡 HIF-1α/VEGF 糖尿病视网膜病变
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辽东地区犊牛肠道粪源性大肠杆菌多重耐药现状分析
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作者 张博 王海丰 +4 位作者 王正欣 张力国 郝婉懿 马晓威 宋满满 《畜禽业》 2025年第8期11-14,共4页
运用K-B纸片法开展药物敏感性试验,并构建耐药菌谱,针对辽东地区45株犊牛粪源性大肠杆菌分离菌株,进行了20种抗生素的耐药性检测,所有菌株均呈现耐药特性,且多数为多重耐药,为此成功建立25个抗菌谱,其中包含1个单一耐药菌谱与24个多重... 运用K-B纸片法开展药物敏感性试验,并构建耐药菌谱,针对辽东地区45株犊牛粪源性大肠杆菌分离菌株,进行了20种抗生素的耐药性检测,所有菌株均呈现耐药特性,且多数为多重耐药,为此成功建立25个抗菌谱,其中包含1个单一耐药菌谱与24个多重耐药菌谱。结果表明:辽东地区粪源性大肠杆菌耐药情况较为严重,并具有多重耐药的特征,耐药菌谱具有多样性,对亚胺培南、阿奇霉素和米诺环素相对敏感,可优先作为临床上使用的抗生素。 展开更多
关键词 犊牛 大肠杆菌 多重耐药性
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辽宁省居民鸡肉消费数量降低影响因素调查 被引量:4
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作者 丁娜 潘春玲 +1 位作者 王苍林 王春平 《中国家禽》 北大核心 2018年第22期67-72,共6页
为解析导致2008年以来辽宁省城市居民鸡肉消费数量逐年递减的关键因素,认识辽宁省消费者的鸡肉消费行为特征,本研究以问卷调查方式,对辽宁省沈阳、大连、鞍山、本溪四个城市居民进行鸡肉及其制品的消费情况展开分析。结果显示,引致鸡肉... 为解析导致2008年以来辽宁省城市居民鸡肉消费数量逐年递减的关键因素,认识辽宁省消费者的鸡肉消费行为特征,本研究以问卷调查方式,对辽宁省沈阳、大连、鞍山、本溪四个城市居民进行鸡肉及其制品的消费情况展开分析。结果显示,引致鸡肉消费数量下降的主要原因:从肉类消费结构上看猪肉消费增长迅速取代了部分鸡肉消费,可能是当地居民消费偏好所致;更为要害的是鸡肉食品质量安全事件时有发生,令消费者对鸡肉食品安全性产生忧虑,降低了消费者食用鸡肉的次数;此外,与猪、牛、羊肉比较,鸡肉烹饪口感略差,消费升级时代引起此消彼长亦属不可忽视因素。 展开更多
关键词 鸡肉 消费数量 消费特征 影响因素 辽宁
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抗periostin人源化单克隆抗体的制备及鉴定
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作者 李雪娇 赵航 +6 位作者 张朔 康慧颖 周艳楠 贾爽 路旭 赵洪礼 海洋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2628-2633,共6页
目的:制备抗periostin人源化单克隆抗体,建立稳定的细胞株。方法:以本实验室自主研发的抗periostin鼠单抗为基础,提取细胞总RNA,经RT-PCR扩增VH和VL基因测序获得可变区序列,将小鼠抗体CDR区域移植到人源抗体框架受体区域,基因合成后亚... 目的:制备抗periostin人源化单克隆抗体,建立稳定的细胞株。方法:以本实验室自主研发的抗periostin鼠单抗为基础,提取细胞总RNA,经RT-PCR扩增VH和VL基因测序获得可变区序列,将小鼠抗体CDR区域移植到人源抗体框架受体区域,基因合成后亚克隆到表达载体PATX-GS2,稳定转染CHO细胞,经MSX加压筛选、有限稀释获得单克隆细胞株。结果:经RT-PCR扩增V_(H)和V_(L)基因,确定轻重链可变区序列,通过CDR移植方法,成功对鼠源单抗进行人源化改造,并构建了真核质粒载体,经转染至CHO细胞表达,成功获得人源化抗periostin抗体,ELISA和Western blot结果证明,制备的人源化抗体具有良好的活性和亲和力。结论:本研究成功制备了抗periostin人源化单克隆抗体,且该人源化抗体可以与体内periostin蛋白特异性结合,具有生物学活性,为精准治疗视网膜纤维化病变、组织器官纤维化病变及恶性肿瘤提供了科学数据。 展开更多
关键词 PERIOSTIN 人源化单克隆抗体 视网膜纤维化
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曲安奈德/聚乳酸己内酯载药静电纺丝膜的抗兔眼滤过泡瘢痕化作用 被引量:9
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作者 郑玉强 王卓实 +3 位作者 徐玲 吴建国 赵军 何伟 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期585-590,共6页
背景青光眼滤过术后滤过道的瘢痕形成是手术失败的主要原因,近年来多采用小梁切除术中局部使用抗瘢痕形成药物的方法来保持滤过道的开放,但药物可引起并发症。研究证实,聚乳酸己内酯(PLCA)材料制作的静电纺丝膜可作为负药载体以达... 背景青光眼滤过术后滤过道的瘢痕形成是手术失败的主要原因,近年来多采用小梁切除术中局部使用抗瘢痕形成药物的方法来保持滤过道的开放,但药物可引起并发症。研究证实,聚乳酸己内酯(PLCA)材料制作的静电纺丝膜可作为负药载体以达到药物缓释的目的,但其在青光眼滤过术中的作用尚未证实。目的探讨小梁切除术联合巩膜层间填充负载曲安奈德(TA)静电纺丝膜在兔眼穿透性小梁切除术中抗瘢痕化的作用及可行性。方法利用静电纺丝技术制备TA/PLCA载药静电纺丝膜,扫描电子显微镜下检测其表面超微结构,采用高效液相色谱仪检测体外药物缓释性能。采用前房注射卡波姆法制备单眼青光眼动物模型,将造模成功的40只新西兰白兔均行穿透性小梁切除术并采用随机数字表法分为5个组,每组8只眼。TA/PLCA载药静电纺丝膜组、PLCA静电纺丝膜组和羊膜组在术中于巩膜瓣下分别植入TA/PLCA载药静电纺丝膜、PLCA静电纺丝膜或羊膜。TA组术眼术毕在结膜下注射40mg/mlTA溶液而术中不植入任何植片,单纯小梁切除术组仅行小梁切除术。分别于术后1…248和12周测量术眼眼压,并采用裂隙灯显微镜观察滤过泡的形态变化;于术后12周制备术眼滤过泡组织切片,采用苏木精一伊红染色法检查各组术眼滤过泡的组织病理学变化。结果制备的PLCA静电纺丝纤维直径为0.5~1.5p,m,呈空间立体网状结构,而TA/PLCA静电纺丝膜结构与PLCA静电纺丝膜相近,可体外缓释药物14d。单纯小梁切除组术眼滤过泡于术后8周前全部消失,术后12周TA/PLCA载药静电纺丝膜组8只眼均存在功能性滤过泡,PLCA静电纺丝膜组中维持功能性滤过泡者5只眼,羊膜组和TA组中分别为4只眼。术后12周各组术眼的眼压明显不同,TA/PLCA载药静电纺丝膜组术眼眼压最低,而单纯小梁切除术组术眼眼压最高,各组间比较差异均有统计学意义(均P=0.000)。组织病理学检查显示,术后12周TA/PLCA载药静电纺丝膜组术眼滤过道存在,滤过腔表面上皮化;PLCA静电纺丝膜组、羊膜组、TA组术眼滤过腔存在微小空隙,可见周围组织增生,而单纯小梁切除术组滤过腔消失,组织增生呈瘢痕化。结论TA/PLCA载药静电纺丝膜具有纳米级微观结构,体外药物缓释性能较好。小梁切除术中联合巩膜瓣下TA/PLCA载药静电纺丝膜植入可明显抑制手术区滤过腔瘢痕化,可能是TA抑制瘢痕作用与静电纺丝膜支架作用共同作用的结果。 展开更多
关键词 青光眼/治疗 小梁切除术 聚乳酸己内酯/化学 曲安奈德/药物 增生 药物缓释系统 TA/PLCA载药静电纺丝膜
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黄连解毒汤对小鼠S_(180)移植性肿瘤的抑制作用 被引量:9
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作者 孙燕 王俊平 +3 位作者 张玉丽 苏龙 张丽娟 于春鑫 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期63-67,共5页
为研究黄连解毒汤(HLJDT)体内抗肿瘤作用,将健康雌性昆明种小鼠50只(体重18~22 g),随机分为对照组,环磷酰胺组(CTX),黄连解毒汤大、中、小剂量组(22.0、11.0、5.5 g·kg-1)。通过建立小鼠S180肉瘤模型,观察黄连解毒汤对小鼠生存质... 为研究黄连解毒汤(HLJDT)体内抗肿瘤作用,将健康雌性昆明种小鼠50只(体重18~22 g),随机分为对照组,环磷酰胺组(CTX),黄连解毒汤大、中、小剂量组(22.0、11.0、5.5 g·kg-1)。通过建立小鼠S180肉瘤模型,观察黄连解毒汤对小鼠生存质量、胸腺指数、脾脏指数和肿瘤细胞形态影响,并测定荷瘤小鼠生存期、生存率。结果表明,黄连解毒汤大剂量组抑瘤作用显著(P<0.05),可延长荷瘤小鼠寿命,改善生存质量;黄连解毒汤大、中、小剂量组脾脏(胸腺)指数与对照组相比没有显著差异;细胞形态学观察显示黄连解毒汤大、中剂量组肿瘤细胞变形严重;中剂量组与大剂量组小鼠生存率明显高于对照组。 展开更多
关键词 黄连解毒汤 S180 体内 抗肿瘤作用
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黄连解毒汤对小鼠S_(180)肉瘤血管生成抑制作用的试验研究 被引量:7
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作者 孙燕 万冰 +4 位作者 金戈 张玉丽 郭丽 马铃铃 张梦月 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期31-35,共5页
研究黄连解毒汤(HLJDT)对肿瘤生长的抑制作用及其对肿瘤组织COX-2、VEGF、bFGF的影响。将健康雌性昆明种小鼠50只(体重18-22 g)随机分为对照组,环磷酰胺组(CTX),黄连解毒汤大、中、小剂量组(22.0、11.0、5.5 g·kg^-1)。... 研究黄连解毒汤(HLJDT)对肿瘤生长的抑制作用及其对肿瘤组织COX-2、VEGF、bFGF的影响。将健康雌性昆明种小鼠50只(体重18-22 g)随机分为对照组,环磷酰胺组(CTX),黄连解毒汤大、中、小剂量组(22.0、11.0、5.5 g·kg^-1)。通过皮下注射S180细胞悬液建立小鼠S180肉瘤模型,观察抑瘤率,并采用免疫组化的方法研究黄连解毒汤对肿瘤组织COX-2、VEGF、bFGF的作用。结果表明,黄连解毒汤大剂量组对小鼠S180肉瘤具有明显的抑制作用,免疫组化染色显示黄连解毒汤各剂量组对肿瘤组织中COX-2、bFGF表达有明显抑制作用,同时大、中剂量组对VEGF表达有明显抑制作用。说明黄连解毒汤对S180肉瘤具有抑制作用,其可抑制肿瘤组织中血管生成相关因子COX-2、VEGF、bFGF的表达,抑制肿瘤血管生长,抑制肿瘤生长,抗血管生成可能是其发挥治疗作用的另一种机制。 展开更多
关键词 黄连解毒汤 S180 环氧合酶-2 血管内皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子
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基于BP神经网络的无约束优化方法 被引量:11
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作者 董志贵 王福林 +1 位作者 宋庆凤 吴志辉 《统计与决策》 CSSCI 北大核心 2019年第1期79-82,共4页
针对具有黑箱特性的无约束优化问题,在BP神经网络函数拟合的基础上,提出基于双曲正切传递函数BP神经网络的无约束优化方法。文章以网络输出极小化数学模型为例,阐述了无约束优化方法的基本思路,推导了网络的输出对输入的一阶导数(梯度)... 针对具有黑箱特性的无约束优化问题,在BP神经网络函数拟合的基础上,提出基于双曲正切传递函数BP神经网络的无约束优化方法。文章以网络输出极小化数学模型为例,阐述了无约束优化方法的基本思路,推导了网络的输出对输入的一阶导数(梯度),给出了初始试验步长计算公式和优化方法的终止准则,在此基础上,阐述了优化方法的实现流程。最后,将优化方法应用到两个典型的无约束优化问题进行示例验证,优化结果表明该方法是解决黑箱优化问题的一种稳定可行算法。 展开更多
关键词 BP神经网络 无约束优化 黑箱问题 试验步长
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壳聚糖静电纺丝膜对兔球结膜损伤的促修复作用 被引量:2
9
作者 郑玉强 王卓实 +2 位作者 徐玲 王连嵩 何伟 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期102-106,共5页
目的评价壳聚糖/明胶静电纺丝膜对球结膜损伤后组织的促修复作用及抗瘢痕化作用。方法利用静电纺丝技术制备壳聚糖/明胶静电纺丝膜,采用钨灯丝扫描电子显微镜观察静电纺丝膜纤维表征。采用随机数字表法将30只新西兰白兔随机分为模型组... 目的评价壳聚糖/明胶静电纺丝膜对球结膜损伤后组织的促修复作用及抗瘢痕化作用。方法利用静电纺丝技术制备壳聚糖/明胶静电纺丝膜,采用钨灯丝扫描电子显微镜观察静电纺丝膜纤维表征。采用随机数字表法将30只新西兰白兔随机分为模型组、羊膜修复组和静电纺丝膜修复组,每组10只。各组实验兔右眼均接受手术切除6 mm×8 mm的球结膜,用弱酸灼伤损伤部位和角膜缘,制备兔球结膜损伤动物模型,羊膜修复组和静电纺丝膜修复组均于术中在伤口处结膜与巩膜之间平铺生物膜。分别于术后4、8、14、28 d行裂隙灯显微镜检查,观察兔眼手术伤口炎症反应及球结膜修复情况。结果扫描电子显微镜下可见静电纺丝膜纤维呈立体网状结构,与生物羊膜空间结构相似,纺丝直径均匀,为0.1~0.5 μm。裂隙灯显微镜下观察发现,术后4 d各组兔实验眼均未见明显炎症反应;术后8 d模型组兔眼球结膜水肿、糜烂,黏性分泌物较多,羊膜修复组和静电纺丝膜修复组兔球结膜轻度充血;术后14 d模型组兔球结膜水肿、充血,羊膜修复组和静电纺丝膜修复组兔球结膜均未见炎症反应;术后28 d模型组兔球结膜可见新生血管,羊膜修复组和静电纺丝膜修复组兔球结膜完全修复。组织病理学观察结果显示,模型组兔眼在术后4 d时伤口处球结膜组织游离,术后8 d球结膜根部贴附巩膜,术后14 d球结膜组织增厚,术后28 d大量纤维组织填充伤口,结膜上皮化。羊膜修复组兔眼术后4 d羊膜贴附于巩膜与球结膜之间,术后8 d羊膜开始消融,术后14 d纤维组织生长且球结膜上皮化,术后28 d球结膜组织修复,瘢痕组织填充较少。术后4 d静电纺丝膜修复组可见静电纺丝膜孵育于结膜与巩膜之间,静电纺丝膜消融,术后8 d球结膜上皮沿巩膜长入损伤部位,术后14 d结膜下组织生长,术后28 d结膜完全修复。结论与单纯球结膜损伤缝合相比,羊膜或壳聚糖/明胶静电纺丝膜修补对损伤的球结膜有促进修复的作用,且可减轻组织瘢痕化,壳聚糖/明胶静电纺丝膜的促组织修复作用优于羊膜。 展开更多
关键词 球结膜损伤 结膜重建 生物材料 壳聚糖 明胶 静电纺丝膜 羊膜 动物模型
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Cd胁迫诱导拟南芥幼苗DNA损伤分析 被引量:6
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作者 宋婕 王鹤潼 +9 位作者 崔伟娜 孙梨宗 曹霞 何蕾 姜丽思 成智博 惠秀娟 台培东 杨悦锁 刘宛 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期635-642,共8页
以拟南芥为供试植物,通过基于随机引物扩增多态性(RAPD)法的DNA损伤分析,酶联免疫吸附(ELISA)法的DNA甲基化分析以及Real-time PCR的DNA损伤修复与细胞周期相关基因的表达分析,研究了Cd(0、0.125、0.25、1.0、2.5 mg·L^(-1))胁迫5 ... 以拟南芥为供试植物,通过基于随机引物扩增多态性(RAPD)法的DNA损伤分析,酶联免疫吸附(ELISA)法的DNA甲基化分析以及Real-time PCR的DNA损伤修复与细胞周期相关基因的表达分析,研究了Cd(0、0.125、0.25、1.0、2.5 mg·L^(-1))胁迫5 d的拟南芥幼苗DNA损伤、DNA损伤修复系统以及细胞周期对胁迫的响应。结果显示,随Cd浓度的增加DNA损伤加剧,全基因组甲基化水平较对照组显著增加(P<0.01或P<0.05),细胞周期调控基因PCNA1、PCNA2,错配修复(MMR)基因MLH1、MSH_2、MSH6,非同源末端连接(NHEJ)标志基因KU70、MRE11、GR1,同源重组(HR)标志基因RAD51、BRCA1的表达均与Cd胁迫浓度呈明显的倒U型剂量效应关系,DNA修复系统对Cd胁迫的敏感性依次为MMR>HR>NHEJ。该结果表明:轻度Cd胁迫主要引起DNA错配损伤,并且该损伤易修复;随着Cd胁迫的增强,会引起DNA断裂与染色体损伤,损伤较难修复。另外,对Cd胁迫响应最敏感的MSH6、MLH1基因可作为表征Cd胁迫对于拟南芥遗传毒性效应的有效生物标记物。 展开更多
关键词 CD DNA损伤修复 DNA修复 细胞周期
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近视程度与黄斑部神经节细胞-内丛状层(GCIPL)厚度的相关性研究 被引量:8
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作者 蔺云霞 夏阳 徐玲 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第11期1075-1078,共4页
目的分析视网膜黄斑区神经节细胞-内丛状层(ganglion cell and inner plexiform layer,GCIPL)厚度与不同近视人群眼轴及屈光度的相关性,以期为合并近视青光眼人群GCIPL厚度分析提供指导。方法选取2015年10月至2016年9月在我院就诊的18~3... 目的分析视网膜黄斑区神经节细胞-内丛状层(ganglion cell and inner plexiform layer,GCIPL)厚度与不同近视人群眼轴及屈光度的相关性,以期为合并近视青光眼人群GCIPL厚度分析提供指导。方法选取2015年10月至2016年9月在我院就诊的18~36岁的不同程度近视患者95例(190眼)。记录所有患者性别、年龄、眼轴、医学验光屈光度(等效球镜)、GCIPL的厚度,包括平均、最小、上方、下方、颞上、颞下、鼻上、鼻下共8个参数。根据屈光度分为A组(-0.25^-3.00 D)、B组(-3.25^-6.00 D)、C组(>-6.00 D)。根据眼轴长度分为A1组(22~24 mm)、B1组(>24~26 mm)、C1组(>26 mm),进行所有参数的比较。各组的性别及年龄差异均无统计学意义(均为P>0.05)。但各组平均屈光度和眼轴长度差异均有统计学意义(F=523.963,P=0.000;F=57.452,P=0.000)。采用SPSS 20.0软件单因素方差分析3组间GCLIP厚度参数的差异及Pearson相关性分析不同屈光度、眼轴长度与GCIPL厚度的相关性。结果眼轴长度和屈光度之间呈显著负相关(r=-0.707,P=0.000)。不同屈光度分组8个厚度参数之间差异均有统计学意义(F=3.231~16.500,均为P<0.05)。不同眼轴长度分组8个厚度参数之间差异均有统计学意义(F=5.234~19.999,均为P<0.05)。GCIPL厚度与屈光度均呈负相关(r=-0.419^-0.153,均为P<0.05),与眼轴长度均呈负相关(r=-0.407^-0.241,均为P<0.05),随着屈光度增大及眼轴增长,GCLIP厚度逐渐变薄。结论近视人群随着屈光度和眼轴的增长,GCLIP厚度也逐渐变薄。采用GCLIP厚度评估合并近视青光眼人群时要考虑眼轴长度的影响。 展开更多
关键词 黄斑部神经节细胞-内丛状层厚度 眼轴长度 Cirrus频域光学相干断层扫描 近视
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植物位点特异性甲基化研究的引物设计及PCR体系优化 被引量:2
12
作者 王鹤潼 宋婕 +7 位作者 崔伟娜 曹霞 何蕾 贾春云 惠秀娟 台培东 成智博 刘宛 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1686-1693,共8页
通过设计大量引物,探索在植物甲基化引物设计中长、短引物的设计方法及其相应的PCR条件,同时比较不同Taq酶对甲基化率影响。结果表明:17~30 bp短引物适合使用Touch-down程序PCR,但特异性差、成功率低;31~50 bp长引物使用55℃退火60℃... 通过设计大量引物,探索在植物甲基化引物设计中长、短引物的设计方法及其相应的PCR条件,同时比较不同Taq酶对甲基化率影响。结果表明:17~30 bp短引物适合使用Touch-down程序PCR,但特异性差、成功率低;31~50 bp长引物使用55℃退火60℃延伸的PCR条件成功率最高,其中反向引物的长度及Tm小于正向引物较佳;高保真酶因其3′→5′外切酶活性不宜用于甲基化研究,而Epi TaqTMHS在PCR结果中表现最佳。 展开更多
关键词 植物甲基化 引物设计 Taq酶 PCR条件
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基于HIF-1α/自噬途径探讨二氯化钴调控3T3-L1脂肪细胞炎症反应及胰岛素抵抗的机制 被引量:3
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作者 岳欣欣 付洋 +3 位作者 李怡然 尹晓燕 于飞 傅全威 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期33-38,共6页
目的探讨低氧诱导剂二氯化钴(CoCl_(2))调控3T3-L1脂肪细胞自噬活性从而改善脂肪细胞炎症反应和胰岛素抵抗的机制。方法常规培养和诱导分化3T3-L1脂肪细胞成为成熟的脂肪细胞,CoCl_(2)作为低氧诱导剂在不同时间、不同浓度条件下干预成... 目的探讨低氧诱导剂二氯化钴(CoCl_(2))调控3T3-L1脂肪细胞自噬活性从而改善脂肪细胞炎症反应和胰岛素抵抗的机制。方法常规培养和诱导分化3T3-L1脂肪细胞成为成熟的脂肪细胞,CoCl_(2)作为低氧诱导剂在不同时间、不同浓度条件下干预成熟的脂肪细胞,确认CoCl_(2)干预脂肪细胞自噬活性的最佳时间和浓度,随后根据此时间和浓度分组,分为0 h(对照组)、12 h、24 h、48 h CoCl_(2)处理组,收集细胞样本进行相关指标测定。MTT法评价各组细胞存活情况;Western blot分析各组细胞HIF-1α及其下游蛋白葡萄糖转运蛋白Glut-1、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达情况;免疫荧光法检测各组细胞的自噬水平;ELISA法检测各组细胞上清液中炎症因子TNF-α和IL-6分泌情况。结果150μmol/L CoCl_(2)是调控3T3-L1脂肪细胞自噬水平的最佳干预浓度;150μmol/L CoCl_(2)干预成熟的脂肪细胞24 h时,自噬活性水平增高,细胞存活率无显著的减低,脂肪细胞中HIF-1α、LC3-Ⅱ、Beclin-1、Glut-1蛋白的表达水平也显著升高,但炎症因子TNF-α和IL-6分泌水平无明显增加;48 h时自噬水平减低,细胞存活率出现显著减低,脂肪细胞中HIF-1α、LC3-Ⅱ、Beclin-1、Glut-1蛋白的表达水平减低,炎症因子TNF-α和IL-6分泌水平出现增加趋势。结论150μmol/L CoCl_(2)可以调控脂肪细胞自噬水平增加,自噬水平的增加以依赖HIF-1α的方式活化,从而使自噬发挥保护脂肪细胞的作用使其免受炎症损伤和改善脂肪细胞胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 HIF-1Α 自噬 3T3-L1细胞 炎症反应 胰岛素抵抗
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脾阴虚模型大鼠回肠的蛋白质组学差异性研究 被引量:6
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作者 宋雪娇 王彩霞 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第10期2363-2365,I0003,共4页
目的:探讨基于蛋白质组学技术的脾阴虚模型大鼠回肠组织的差异性蛋白表达。方法:SPF级SD大鼠23只,随机分为健康对照组和脾阴虚实验组。采用饮食不节加劳倦过度结合耗伤阴液的方法塑造脾阴虚证大鼠模型。经模糊数学评价方式判定后,分离... 目的:探讨基于蛋白质组学技术的脾阴虚模型大鼠回肠组织的差异性蛋白表达。方法:SPF级SD大鼠23只,随机分为健康对照组和脾阴虚实验组。采用饮食不节加劳倦过度结合耗伤阴液的方法塑造脾阴虚证大鼠模型。经模糊数学评价方式判定后,分离出回肠组织,应用蛋白质组学技术,鉴定健康对照组与实验组回肠组织蛋白表达差异,经MASCOT搜库鉴定差异蛋白质。结果:脾阴虚实验组回肠组织发现6个差异表达蛋白点(P<0.05)。结论:脾阴虚证的发生与热休克蛋白90表达下调密切相关。 展开更多
关键词 脾阴虚证 蛋白质组学 回肠
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GR82334对电刺激大鼠隐神经增加扣带回前部多巴胺含量的影响 被引量:1
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作者 银欢 陈魁敏 +1 位作者 马积昊 吴敏范 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期426-428,共3页
目的研究尾静脉、蛛网膜下腔注射NK-1受体拮抗剂GR82334对强电流刺激大鼠隐神经(SN)增加扣带回前部(ACG)多巴胺含量的影响。方法将雄性Wistar大鼠42只随机分为空白对照组、假刺激对照组、SN刺激组、GR82334(ith)组、NS(ith)组、GR82334(... 目的研究尾静脉、蛛网膜下腔注射NK-1受体拮抗剂GR82334对强电流刺激大鼠隐神经(SN)增加扣带回前部(ACG)多巴胺含量的影响。方法将雄性Wistar大鼠42只随机分为空白对照组、假刺激对照组、SN刺激组、GR82334(ith)组、NS(ith)组、GR82334(iv)组及NS(iv)组。将各组大鼠断头后,取出右侧ACG,称质量,加入适量冰冷的0.1 mol/L高氯酸溶液,匀浆,4℃、10 000 r/min离心20 min。取上清液20μL,应用高效液相色谱—电化学检测技术检测ACG多巴胺含量。结果强电流刺激SN引起ACG多巴胺含量显著增高;尾静脉或蛛网膜下腔注射GR82334拮抗了强电流刺激SN引起的ACG多巴胺含量的显著增高。蛛网膜下腔注射GR82334未能完全阻断强电流刺激SN引起的ACG多巴胺含量的显著增高。结论外周NK-1受体和中枢NK-1受体参与SN传入信息引起的ACG多巴胺含量显著增高的过程;还存在其它递质和受体参与的中枢通路引起ACG多巴胺含量的显著增高。 展开更多
关键词 GR82334 多巴胺 NK-1受体 扣带回前部 高效液相色谱
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百瓦级同位素温差电池浅析 被引量:2
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作者 侯旭峰 郭健 任保国 《电源技术》 CAS 北大核心 2019年第10期1722-1725,共4页
在月夜无光、火星尘暴等极端环境,同位素温差电池是深空探测的首选电源。作为深空探测的主电源,百瓦级的同位素温差电池既能满足探测用电能和热能需求,同时在电池的高比功率、高电压、高可靠性设计等方面也具有量级优势。针对百瓦级同... 在月夜无光、火星尘暴等极端环境,同位素温差电池是深空探测的首选电源。作为深空探测的主电源,百瓦级的同位素温差电池既能满足探测用电能和热能需求,同时在电池的高比功率、高电压、高可靠性设计等方面也具有量级优势。针对百瓦级同位素温差电池用热源、温差电换能器设计和安全性设计等方面进行了分析,对于推动百瓦级温差电池技术发展,及其在我国载人登月和深空探测中的应用给出参考。 展开更多
关键词 载人登月 深空探测 百瓦级同位素温差电池 设计
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传播媒介进化的阶段性特征 被引量:1
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作者 马弋飞 韩有业 《重庆社会科学》 CSSCI 2016年第11期97-103,共7页
本文首先从历史与现实、个人与社会角度分析了媒介进化与发展的意义。其次,通过关于媒介发展分期提出的动因及逻辑,即学科建设需要及历史论述逻辑的考查,对目前关于媒介发展分期的论述进行反思。再次,基于"媒介环境学派"代表... 本文首先从历史与现实、个人与社会角度分析了媒介进化与发展的意义。其次,通过关于媒介发展分期提出的动因及逻辑,即学科建设需要及历史论述逻辑的考查,对目前关于媒介发展分期的论述进行反思。再次,基于"媒介环境学派"代表性学者关于媒介发展论述的思考,提出媒介进化与发展分期的目的是揭示媒介发展规律。最后,提出新的媒介进化与发展分期,即原点时代、半超原点时代、超原点时代、回归原点时代。 展开更多
关键词 传播媒介 新媒体建设 媒体融合
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基于BOPPPS模型与雨课堂平台的大学英语混合式教学模式构建与应用 被引量:18
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作者 赵瑞雪 《黑龙江生态工程职业学院学报》 2022年第4期153-156,共4页
混合式教学是指在教学形式上将在线教学和传统课堂教学相结合的一种教学模式。基于BOPPPS模型,利用雨课堂平台,通过教学实验构建一种适合大学英语教学的混合式教学模式,是对混合式教学的一种新的探索。这次实验按照技能模块及话题单元... 混合式教学是指在教学形式上将在线教学和传统课堂教学相结合的一种教学模式。基于BOPPPS模型,利用雨课堂平台,通过教学实验构建一种适合大学英语教学的混合式教学模式,是对混合式教学的一种新的探索。这次实验按照技能模块及话题单元进行前测及后测,按照SMART原则进行教学目标设计,采用对分教学法组织参与式学习,从而构建适合大学英语课的混合式教学模式。通过教学实验可以看出,在这一教学模式下,学生经历一段时间的学习后,英语语言综合运用能力及自主学习能力都有明显的提升。 展开更多
关键词 混合式教学 BOPPPS 对分教学法 雨课堂
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探讨畜牧养殖的动物疾病病因及其控防措施 被引量:16
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作者 张英俊 《吉林畜牧兽医》 2014年第7期50-51,共2页
畜牧业是我国的一个传统行业,近年来,我国畜牧养殖业取得了跨越式的发展,但是随着时代的发展,在发展过程中难免遇到这样或那样的问题,这些问题的出现将极大的困扰畜牧业的可持续发展。本文正是基于这一背景,以畜牧养殖过程中的动物疾病... 畜牧业是我国的一个传统行业,近年来,我国畜牧养殖业取得了跨越式的发展,但是随着时代的发展,在发展过程中难免遇到这样或那样的问题,这些问题的出现将极大的困扰畜牧业的可持续发展。本文正是基于这一背景,以畜牧养殖过程中的动物疾病这一棘手的问题为例,就动物疾病的病因进行了分析,并提出了相应的防控措施,旨在与同行进行业务之间的交流,以更好地确保动物疾病得到有效的控制,进一步促进畜牧养殖业的可持续发展。 展开更多
关键词 畜牧养殖 动物疾病 病因 防控措施
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猫扣带回前部内脏与躯体伤害感受神经元膜电学特性的对比研究
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作者 吴敏范 张勇 +3 位作者 杨宇 姚阳 马积昊 商丽宏 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期888-890,共3页
目的对比研究猫扣带回前部内脏伤害感受神经元与躯体伤害感受神经元膜电学特性,从膜电学方面为阐明内脏痛与躯体痛具有不同感受特性的机制提供实验依据。方法选择成龄猫77只,体质量2.0~3.5 kg,雄雌不限。根据在体微电极记录的扣带回前... 目的对比研究猫扣带回前部内脏伤害感受神经元与躯体伤害感受神经元膜电学特性,从膜电学方面为阐明内脏痛与躯体痛具有不同感受特性的机制提供实验依据。方法选择成龄猫77只,体质量2.0~3.5 kg,雄雌不限。根据在体微电极记录的扣带回前部神经元对电刺激内脏大神经或隐神经产生的诱发反应的特点及吗啡对该诱发反应的影响,检出具有长潜伏期(≥50 ms)的内脏伤害感受神经元或躯体伤害感受神经元。应用在体微电极向内脏伤害感受神经元或躯体伤害感受神经元内注入波宽50 ms、不同强度(-5 n A^+5 n A)的一系列极化电流,记录神经元膜电学反应,计算膜电学参数。结果在扣带回前部记录了254个内脏伤害感受神经元和172个躯体伤害感受神经元。内脏伤害感受神经元的内脏大神经诱发反应阈值比躯体伤害感受神经元的隐神经诱发反应阈值高;与躯体伤害感受神经元相比,内脏伤害感受神经元的膜电阻、膜电容、时间常数较大。结论扣带回前部内脏伤害感受神经元与躯体伤害感受神经元的膜电学特性存在差异,可能是内脏痛与躯体痛具有不同感受特性的膜电学基础。 展开更多
关键词 伤害感受神经元 扣带回前部 膜电学特性
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