目的探讨乌索酸(UA)对高糖诱导人系膜细胞损伤的保护作用。方法人系膜细胞复苏后,用MCM 4201完全培养基常规培养,置于37℃、饱和湿度5%CO_2的孵箱内贴壁传代培养,隔天换液1次,取5~9代对数生长期细胞,分为正常糖组(5.5mmol·L^(-1)...目的探讨乌索酸(UA)对高糖诱导人系膜细胞损伤的保护作用。方法人系膜细胞复苏后,用MCM 4201完全培养基常规培养,置于37℃、饱和湿度5%CO_2的孵箱内贴壁传代培养,隔天换液1次,取5~9代对数生长期细胞,分为正常糖组(5.5mmol·L^(-1)葡萄糖),高糖组(30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖),高渗对照组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖+24.5 mmol·L^(-1)甘露醇),乌索酸治疗A、B、C组(30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖,A、B、C组分别给予0.5、1.0、2.0μmol·L^(-1)乌索酸)。6组均给药48 h。利用MTT比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测系膜细胞凋亡,采用实时PCR及Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-x L、Bax、survivin m RNA及蛋白表达,细胞损伤相关蛋白TGF-β1、FN m RNA及蛋白表达。结果 0.5μmol·L^(-1)乌索酸治疗组与正常糖组、高渗对照组系膜细胞增殖程度差异无统计学意义(P>0.05),2.0μmol·L^(-1)乌索酸治疗组大部分系膜细胞已经死亡。1.0μmol·L^(-1)乌索酸组抑制高糖诱导的系膜细胞增殖和TGF-β1、FN、Bcl-xl、survivin m RNA及蛋白表达,增强促凋亡基因Bax m RNA及蛋白表达,促进系膜细凋亡。结论乌索酸通过促进系膜细胞早期凋亡抑制系膜细胞增殖,抑制TGF-β1表达和FN聚集,减轻系膜细胞损伤。展开更多
文摘目的探讨乌索酸(UA)对高糖诱导人系膜细胞损伤的保护作用。方法人系膜细胞复苏后,用MCM 4201完全培养基常规培养,置于37℃、饱和湿度5%CO_2的孵箱内贴壁传代培养,隔天换液1次,取5~9代对数生长期细胞,分为正常糖组(5.5mmol·L^(-1)葡萄糖),高糖组(30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖),高渗对照组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖+24.5 mmol·L^(-1)甘露醇),乌索酸治疗A、B、C组(30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖,A、B、C组分别给予0.5、1.0、2.0μmol·L^(-1)乌索酸)。6组均给药48 h。利用MTT比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测系膜细胞凋亡,采用实时PCR及Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-x L、Bax、survivin m RNA及蛋白表达,细胞损伤相关蛋白TGF-β1、FN m RNA及蛋白表达。结果 0.5μmol·L^(-1)乌索酸治疗组与正常糖组、高渗对照组系膜细胞增殖程度差异无统计学意义(P>0.05),2.0μmol·L^(-1)乌索酸治疗组大部分系膜细胞已经死亡。1.0μmol·L^(-1)乌索酸组抑制高糖诱导的系膜细胞增殖和TGF-β1、FN、Bcl-xl、survivin m RNA及蛋白表达,增强促凋亡基因Bax m RNA及蛋白表达,促进系膜细凋亡。结论乌索酸通过促进系膜细胞早期凋亡抑制系膜细胞增殖,抑制TGF-β1表达和FN聚集,减轻系膜细胞损伤。
