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部分纯化的牛心细胞质提取物对心肌细胞膜“run-down”L-型钙通道活性的恢复作用
1
作者
赵金生
赵妍
+3 位作者
赵美眯
刘书源
侯平
郝丽英
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第12期1060-1064,共5页
目的研究牛心细胞质部分纯化提取物及钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)对大鼠心肌细胞膜L-型钙通道活性的调节作用。方法采用常规的蛋白提取方法制备牛心细胞质提取物,离子交换方法进行部分纯化。应用膜片钳制技术的细胞贴附和膜内向外记录模式...
目的研究牛心细胞质部分纯化提取物及钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)对大鼠心肌细胞膜L-型钙通道活性的调节作用。方法采用常规的蛋白提取方法制备牛心细胞质提取物,离子交换方法进行部分纯化。应用膜片钳制技术的细胞贴附和膜内向外记录模式记录大鼠心室肌细胞单通道钙电流,观察牛心细胞质部分纯化提取物和CaMKⅡ对"run-down"L-型钙通道活性的恢复作用。Western blot方法验证活性蛋白。结果膜内向外记录模式下,L-型钙通道出现"run-down"现象,活性下降至细胞贴附记录模式的(0.46±0.15)%;牛心细胞质部分纯化提取物使"run-down"的通道活性恢复至细胞贴附记录模式的(44.29±13.51)%(P<0.01),加入CaMKⅡ抑制剂KN-62(1μmol/L)后活性仅恢复至(1.30±0.94)%,与未加抑制剂组相比差异有统计学意义(P<0.05);Western blot方法验证牛心细胞质部分纯化提取物中含有CaMKⅡ;基因重组融合蛋白法制备的CaMKⅡ也可将"run-down"后的钙通道活性恢复至细胞贴附记录模式的(71.59±14.76)%(P<0.05)。结论牛心细胞质部分纯化提取物对"run-down"钙通道活性具有恢复作用,该作用可能与CaMKⅡ密切相关。
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关键词
L-型钙通道
钙调蛋白激酶Ⅱ
膜片钳制技术
单通道记录模式
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职称材料
转化生长因子β信号在内皮细胞中通过上调ULK1蛋白抑制细胞周期
被引量：
3
2
作者
康伊
张艳
张伟
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期783-787,共5页
目的探讨转化生长因子β(TGF-β)信号通路在血管内皮细胞中上调ULK1蛋白的作用机制,并观察ULK1对血管内皮细胞细胞周期的影响。方法利用TGF-β配体蛋白刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人微血管内皮细胞(HMEC-1),利用免疫印迹分析检验ULK...
目的探讨转化生长因子β(TGF-β)信号通路在血管内皮细胞中上调ULK1蛋白的作用机制,并观察ULK1对血管内皮细胞细胞周期的影响。方法利用TGF-β配体蛋白刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人微血管内皮细胞(HMEC-1),利用免疫印迹分析检验ULK1蛋白的表达;在HMEC-1细胞系构建稳定敲低ULK1蛋白表达的细胞系,利用流式细胞术检测野生型和敲低型细胞对TGF-β信号的响应和细胞周期的变化。结果 TGF-β信号能够在血管内皮细胞中特异性地上调ULK1蛋白的表达水平,而且是通过促进合成而非抑制降解来实现的;ULK1蛋白在血管内皮细胞中促进细胞周期G1期阻滞,敲低ULK1可导致血管内皮细胞增殖加快。结论 TGF-β信号可在血管内皮细胞中特异性地上调ULK1蛋白的表达水平;ULK1蛋白能抑制血管内皮细胞的细胞周期进展。
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关键词
血管内皮细胞
转化生长因子Β
ULK1
细胞周期
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职称材料
题名
部分纯化的牛心细胞质提取物对心肌细胞膜“run-down”L-型钙通道活性的恢复作用
1
作者
赵金生
赵妍
赵美眯
刘书源
侯平
郝丽英
机构
中国医科
大学
药学院药物毒理学教研室
中国医科
大学
药学院药剂学教研室
辽宁中医药大学附属医院心血管内科
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第12期1060-1064,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30870907
31071004)
文摘
目的研究牛心细胞质部分纯化提取物及钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)对大鼠心肌细胞膜L-型钙通道活性的调节作用。方法采用常规的蛋白提取方法制备牛心细胞质提取物,离子交换方法进行部分纯化。应用膜片钳制技术的细胞贴附和膜内向外记录模式记录大鼠心室肌细胞单通道钙电流,观察牛心细胞质部分纯化提取物和CaMKⅡ对"run-down"L-型钙通道活性的恢复作用。Western blot方法验证活性蛋白。结果膜内向外记录模式下,L-型钙通道出现"run-down"现象,活性下降至细胞贴附记录模式的(0.46±0.15)%;牛心细胞质部分纯化提取物使"run-down"的通道活性恢复至细胞贴附记录模式的(44.29±13.51)%(P<0.01),加入CaMKⅡ抑制剂KN-62(1μmol/L)后活性仅恢复至(1.30±0.94)%,与未加抑制剂组相比差异有统计学意义(P<0.05);Western blot方法验证牛心细胞质部分纯化提取物中含有CaMKⅡ;基因重组融合蛋白法制备的CaMKⅡ也可将"run-down"后的钙通道活性恢复至细胞贴附记录模式的(71.59±14.76)%(P<0.05)。结论牛心细胞质部分纯化提取物对"run-down"钙通道活性具有恢复作用,该作用可能与CaMKⅡ密切相关。
关键词
L-型钙通道
钙调蛋白激酶Ⅱ
膜片钳制技术
单通道记录模式
Keywords
L-type Ca2＋ channel
calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ
patch-clamp technique
single channel recording
分类号
R961 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
转化生长因子β信号在内皮细胞中通过上调ULK1蛋白抑制细胞周期
被引量：
3
2
作者
康伊
张艳
张伟
机构
辽宁中医药大学
研究生学院
辽宁中医药大学附属医院心血管内科
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期783-787,共5页
基金
国家自然科学基金(81774157)
文摘
目的探讨转化生长因子β(TGF-β)信号通路在血管内皮细胞中上调ULK1蛋白的作用机制,并观察ULK1对血管内皮细胞细胞周期的影响。方法利用TGF-β配体蛋白刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人微血管内皮细胞(HMEC-1),利用免疫印迹分析检验ULK1蛋白的表达;在HMEC-1细胞系构建稳定敲低ULK1蛋白表达的细胞系,利用流式细胞术检测野生型和敲低型细胞对TGF-β信号的响应和细胞周期的变化。结果 TGF-β信号能够在血管内皮细胞中特异性地上调ULK1蛋白的表达水平,而且是通过促进合成而非抑制降解来实现的;ULK1蛋白在血管内皮细胞中促进细胞周期G1期阻滞,敲低ULK1可导致血管内皮细胞增殖加快。结论 TGF-β信号可在血管内皮细胞中特异性地上调ULK1蛋白的表达水平;ULK1蛋白能抑制血管内皮细胞的细胞周期进展。
关键词
血管内皮细胞
转化生长因子Β
ULK1
细胞周期
Keywords
vascular endothelial cell
TGF-βsignaling
ULK1
cell cycle
分类号
R34 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
部分纯化的牛心细胞质提取物对心肌细胞膜“run-down”L-型钙通道活性的恢复作用
赵金生
赵妍
赵美眯
刘书源
侯平
郝丽英
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
在线阅读
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职称材料
2
转化生长因子β信号在内皮细胞中通过上调ULK1蛋白抑制细胞周期
康伊
张艳
张伟
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
3
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职称材料
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