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布鲁氏菌超快速荧光PCR方法建立与临床应用
1
作者
徐振娜
吴志鹏
+9 位作者
洪伟彬
管知深
林其明
莫钻兰
叶毅飞
谢海燕
李敏
朱燕秋
李小军
张险朋
《中国人兽共患病学报》
北大核心
2025年第3期278-283,共6页
目的 建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,应用于临床样品的快速检测。方法 以外源性重组质粒为内参,选取布鲁氏菌重要毒力因子T4SS分泌系统为靶基因设计引物、探针,建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法。评价该方法的灵敏度、特异性、...
目的 建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,应用于临床样品的快速检测。方法 以外源性重组质粒为内参,选取布鲁氏菌重要毒力因子T4SS分泌系统为靶基因设计引物、探针,建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法。评价该方法的灵敏度、特异性、重复性,绘制标准曲线,与荧光PCR方法检测临床样品比较符合率。结果 该方法检测时间短,10 min即可完成。标准曲线Y=-3.410 7x+38.357,R^(2)=0.998 5,线性关系良好,最低检测限为10 copies/μL。该方法具有良好的特异性,对布鲁氏菌以外的几个临床常见细菌均无特异性扩增。检测3种浓度的阳性质粒,CV值为0.20%~0.91%,说明该方法具有极好的重复性。与荧光PCR方法同时检测140份临床样品,结果完全一致,符合率100%。结论 本研究建立了一种用时短、特异性强、灵敏度高、重复性好布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,可用于布鲁氏菌临床检测和疫情紧急排查,对布鲁氏菌早期诊断具有重要意义。
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关键词
布鲁氏菌
超快速荧光PCR
外源性内参
实时荧光PCR
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职称材料
题名
布鲁氏菌超快速荧光PCR方法建立与临床应用
1
作者
徐振娜
吴志鹏
洪伟彬
管知深
林其明
莫钻兰
叶毅飞
谢海燕
李敏
朱燕秋
李小军
张险朋
机构
东莞市动物疫病预防控制中心
东莞市人兽共患病重点实验室
超
快
生物技术
(
广州
)
有限公司
出处
《中国人兽共患病学报》
北大核心
2025年第3期278-283,共6页
基金
东莞市2021年省乡村振兴战略专项资金(“大专项+任务清单”)项目(No.20211800400112)。
文摘
目的 建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,应用于临床样品的快速检测。方法 以外源性重组质粒为内参,选取布鲁氏菌重要毒力因子T4SS分泌系统为靶基因设计引物、探针,建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法。评价该方法的灵敏度、特异性、重复性,绘制标准曲线,与荧光PCR方法检测临床样品比较符合率。结果 该方法检测时间短,10 min即可完成。标准曲线Y=-3.410 7x+38.357,R^(2)=0.998 5,线性关系良好,最低检测限为10 copies/μL。该方法具有良好的特异性,对布鲁氏菌以外的几个临床常见细菌均无特异性扩增。检测3种浓度的阳性质粒,CV值为0.20%~0.91%,说明该方法具有极好的重复性。与荧光PCR方法同时检测140份临床样品,结果完全一致,符合率100%。结论 本研究建立了一种用时短、特异性强、灵敏度高、重复性好布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,可用于布鲁氏菌临床检测和疫情紧急排查,对布鲁氏菌早期诊断具有重要意义。
关键词
布鲁氏菌
超快速荧光PCR
外源性内参
实时荧光PCR
Keywords
Brucella
ultra-fast quantitative PCR
exogenous reference
real-time PCR
分类号
R382.2 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
布鲁氏菌超快速荧光PCR方法建立与临床应用
徐振娜
吴志鹏
洪伟彬
管知深
林其明
莫钻兰
叶毅飞
谢海燕
李敏
朱燕秋
李小军
张险朋
《中国人兽共患病学报》
北大核心
2025
0
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