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江西省结核分枝杆菌耐二线抗结核药的分子学特征 被引量:3
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作者 袁小亮 张天托 +5 位作者 朱家馨 郑文争 雷建平 涂少华 罗一钧 刘惟优 《中国防痨杂志》 CAS 2013年第9期649-654,共6页
目的初步明确江西省耐二线抗结核药相关基因突变的特征,评价等位基因特异性多重PCR(multiplex allele-specific polymerase chain reaction,MAS-PCR)检测二线抗结核药耐药性的可行性。方法采用DNA测序方法和MAS-PCR技术,对江西省52株耐... 目的初步明确江西省耐二线抗结核药相关基因突变的特征,评价等位基因特异性多重PCR(multiplex allele-specific polymerase chain reaction,MAS-PCR)检测二线抗结核药耐药性的可行性。方法采用DNA测序方法和MAS-PCR技术,对江西省52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌进行耐药相关基因突变位点检测。结果DNA测序分析:39株耐氧氟沙星(Ofx)菌株中,32株存在gyrA基因错义突变,2株发生gyrB基因错义突变。29株耐卡那霉素(Km)或卷曲霉素(Cm)菌株中,22株为rrs1401位点A→G突变。52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌,40株为北京基因型(76.92%,40/52),其中17株北京基因型菌株发生gyrA-GAC94GGC突变(42.50%,17/40),19株北京基因型菌株发生rrs-A1401G突变(47.50%,19/40)。北京基因型与基因突变类型gyrA-GAC94GGC和rrs-A1401G无明显相关性(χ2=1.16、1.92,P值均>0.05)。MAS-PCR检测Ofx耐药株的敏感度为61.54%(24/39),检测Km或Cm耐药株的敏感度为79.31%(23/29)。结论gyrA基因94位密码子突变是江西省结核分枝杆菌Ofx耐药的主要机制;rrs-A1401G突变则是Km或Cm耐药的主要原因。MAS-PCR方法对于快速检测二线抗结核药的耐药性有一定的临床应用价值。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗药性 细菌 抗生素类 抗结核 卡那霉素 卷曲霉素硫酸盐 聚合酶链反应 江西
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多西环素减轻小鼠内毒素性急性肺损伤的作用及机制研究 被引量:4
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作者 刘永平 曾治平 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第10期1133-1136,共4页
目的:探讨多西环素对内毒素性急性肺损伤的影响及机制。方法:将昆明小鼠随机分为:生理盐水对照组、多西环素组、内毒素脂多糖(LPS)急性肺损伤模型组及多西环素干预组。注射LPS24h后处死动物,行支气管肺泡灌洗(BALF),计数灌洗液中白细胞... 目的:探讨多西环素对内毒素性急性肺损伤的影响及机制。方法:将昆明小鼠随机分为:生理盐水对照组、多西环素组、内毒素脂多糖(LPS)急性肺损伤模型组及多西环素干预组。注射LPS24h后处死动物,行支气管肺泡灌洗(BALF),计数灌洗液中白细胞数量及测定总蛋白含量。用ELISA分别测定肺组织匀浆上清液中TNF-a、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的含量。同时取肺组织进行病理学观察,测定肺组织湿/干重比值。结果:多西环素显著减少LPS所致BALF中白细胞数量、总蛋白浓度和肺组织湿/干重比值(P<0.01)。多西环素能降低肺组织匀浆上清液中TNF-a和MMP-9含量(P<0.01),轻度上调TIMP-1的含量。多西环素能显著减轻LPS所致肺组织出血、肺水肿及炎性细胞浸润等肺损伤改变。结论:多西环素可减轻LPS所致急性肺损伤,其机制可能与抑制TNF-α等促炎因子释放及下调MMP-9/TIMP-1比值有关。 展开更多
关键词 多西环素 急性肺损伤 基质金属蛋白酶-9 金属蛋白酶组织抑制剂-1 脂多糖
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结核分枝杆菌对异烟肼耐药的分子机制研究进展 被引量:4
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作者 杨寿慧 刘惟优 袁小亮 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第10期1086-1090,共5页
结核病是由结核分枝杆菌引起的一种威胁全球健康的传染性疾病。异烟肼是结核病治疗应用最广泛的药物之一。前体异烟肼通过过氧化氢-过氧化物酶(Kat G)激活,活化的异烟肼可抑制靶蛋白Inh A。异烟肼耐药的分子机制涉及多个基因,其中kat G... 结核病是由结核分枝杆菌引起的一种威胁全球健康的传染性疾病。异烟肼是结核病治疗应用最广泛的药物之一。前体异烟肼通过过氧化氢-过氧化物酶(Kat G)激活,活化的异烟肼可抑制靶蛋白Inh A。异烟肼耐药的分子机制涉及多个基因,其中kat G基因突变是异烟肼耐药主要的原因,另外还有inh A、kas A、oxyR基因等。外排泵系统在异烟肼耐药方面也起着重要作用。了解异烟肼抗结核分枝杆菌作用机制及结核分枝杆菌耐异烟肼的分子机制将有助于异烟肼耐药结核病的诊治。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 异烟肼 耐药机制
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结核分枝杆菌KatG-ACT271CCT(Thr271Pro)突变与异烟肼耐药关系的研究 被引量:1
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作者 杨寿慧 刘惟优 +1 位作者 吴龙火 袁小亮 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期487-492,497,共7页
目的 探讨结核分枝杆菌katG ACT271CCT(Thr271Pro)基因点突变对异烟肼耐药性的影响。方法 应用基因克隆技术合成野生型katG、突变型katG(AGC315ACC)和katG(ACT271CCT)基因片段,分别重组至质粒pET22b(+),转入表达菌BL21(DE3)pLySs,IPTG... 目的 探讨结核分枝杆菌katG ACT271CCT(Thr271Pro)基因点突变对异烟肼耐药性的影响。方法 应用基因克隆技术合成野生型katG、突变型katG(AGC315ACC)和katG(ACT271CCT)基因片段,分别重组至质粒pET22b(+),转入表达菌BL21(DE3)pLySs,IPTG诱导目的蛋白表达,亲和层析法对目的蛋白分离纯化。最终检测重组katG蛋白过氧化物酶及过氧化氢酶活性。此外,通过软件AutoDock4.0采用半柔性对接方式分别模拟野生型katG蛋白、Thr271Pro突变型katG蛋白与异烟肼相互作用。结果 成功获得纯化katG重组蛋白。相比野生型katG蛋白(过氧化氢酶活性361.5 U/mg和过氧化物酶活性77.6 U/mg),Thr271Pro突变型katG蛋白过氧化氢酶和过氧化物酶活性分别下降56%和63%(158.8 U/mg和28.7 U/mg),而Ser315Thr突变型katG蛋白过氧化氢酶和过氧化物酶活性分别下降74%和75%(96.2 U/mg和19.7 U/mg)。分子对接结果提示,异烟肼与Thr271Pro突变型katG蛋白结合自由能较野生型升高,Thr271Pro突变蛋白与异烟肼结合的亲和性降低。271位氨基酸突变后,Thr271Pro突变型katG蛋白氧化反应活性空腔发生一定的变形。结论 katG Thr271Pro基因突变引起katG蛋白酶活性部分缺失和氧化反应活性空腔发生变形,导致异烟肼耐药。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 KATG基因 异烟肼 耐药性
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