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靶向泛素连接酶SIAH2的shRNA对人肝癌细胞株HepG2细胞周期和凋亡的影响
被引量：
4
1
作者
肖海
贺兴波
+1 位作者
黄才斌
刘瑶
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第8期1406-1411,共6页
目的:探讨shRNA介导的泛素连接酶SIAH2(seven in absentia homolog 2)基因表达抑制对人肝癌细胞株HepG2细胞周期和凋亡的影响。方法:用已构建的pGenesil-SIAH2重组质粒转染HepG2细胞,荧光显微镜下观察转染效率。采用RT-PCR和Western blo...
目的:探讨shRNA介导的泛素连接酶SIAH2(seven in absentia homolog 2)基因表达抑制对人肝癌细胞株HepG2细胞周期和凋亡的影响。方法:用已构建的pGenesil-SIAH2重组质粒转染HepG2细胞,荧光显微镜下观察转染效率。采用RT-PCR和Western blotting技术检测重组质粒对SIAH2 mRNA和蛋白表达的影响,MTS比色法测定重组质粒转染对细胞体外增殖能力的影响,流式细胞术检测重组质粒转染后细胞周期和凋亡的变化。结果:与对照组相比,pGenesil-SIAH2能显著抑制SIAH2 mRNA和蛋白的表达水平;pGenesil-SIAH2转染组细胞增殖速度明显减慢;pGenesil-SIAH2组细胞明显阻滞于G1期,细胞凋亡率明显升高。结论:pGenesil-SIAH2能有效抑制HepG2增殖,使细胞周期阻滞在G1期,并诱导其早期凋亡。上述研究为以SIAH2为靶点的肝癌基因治疗提供实验依据。
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关键词
RNA干扰
泛素连接酶
HEPG2细胞
细胞增殖
细胞凋亡
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职称材料
缺氧环境下高迁移率族蛋白B1对线粒体生物合成的影响
被引量：
8
2
作者
许荣
贺兴波
+1 位作者
华宗荣
刘瑶
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2017年第3期245-250,共6页
目的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)通过影响线粒体自噬参与肿瘤细胞能量代谢,文中旨在探讨缺氧环境下HMGB1对线粒体生物合成以及细胞能量代谢的影响。方法 HepG2细胞设常氧对照组(细胞在含5%CO_2的正常培养箱中培养)、缺氧对照组(细胞在1%O2+...
目的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)通过影响线粒体自噬参与肿瘤细胞能量代谢,文中旨在探讨缺氧环境下HMGB1对线粒体生物合成以及细胞能量代谢的影响。方法 HepG2细胞设常氧对照组(细胞在含5%CO_2的正常培养箱中培养)、缺氧对照组(细胞在1%O2+5%CO_2+94%N_2三气培养箱中培养)、HMGB1siRNA缺氧组(细胞转染HMGB1siRNA后于1%O2+5%CO_2+94%N_2三气培养箱中培养)和siRNA缺氧对照组(细胞转染阴性对照siRNA后于1%O2+5%CO_2+94%N_2三气培养箱中培养)。MTS法检测各组细胞增殖的速度,RT-PCR和Western blot检测各组细胞线粒体生物合成相关分子表达变化,透射电镜观察细胞内线粒体形态和数量,ATP试剂盒检测细胞内ATP含量。结果 HMGB1siRNA缺氧组细胞在48 h、72 h的吸光度值明显低于缺氧对照组和siRNA缺氧对照组(P<0.05)。当HMGB1表达被抑制后,PGC1α、NRF1和TFAM的相对表达量明显低于缺氧对照组和siRNA缺氧对照组(P<0.05)。Western blot结果显示,在缺氧培养24 h后,PGC1α、NRF1和TFAM蛋白的相对表达量明显高于常氧对照组(0.494±0.210 vs 0.090±0.020,1.080±0.470 vs 0.581±0.190,1.585±0.340 vs 0.792±0.350,P<0.05)。当HMGB1表达被抑制后,PGC1α、NRF1和TFAM蛋白的相对表达量明显低于缺氧对照组和siRNA缺氧对照组(P<0.05)。与缺氧对照组相比,HMGB1 siRNA缺氧组细胞内ATP含量明显下降,以缺氧12 h和24 h最为明显(P<0.05)。结论 HMGB1通过调控线粒体生物合成,维持细胞能量代谢,使细胞在不利于自身生长的缺氧环境下继续增殖。
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关键词
肝癌
缺氧
线粒体生物合成
高迁移率族蛋白B1
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职称材料
题名
靶向泛素连接酶SIAH2的shRNA对人肝癌细胞株HepG2细胞周期和凋亡的影响
被引量：
4
1
作者
肖海
贺兴波
黄才斌
刘瑶
机构
赣南
医学院
病理学教研室
赣南医学院第一附属医院医务科
赣南
医学院
第一
附属
医院
消化
科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第8期1406-1411,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81160257)
文摘
目的:探讨shRNA介导的泛素连接酶SIAH2(seven in absentia homolog 2)基因表达抑制对人肝癌细胞株HepG2细胞周期和凋亡的影响。方法:用已构建的pGenesil-SIAH2重组质粒转染HepG2细胞,荧光显微镜下观察转染效率。采用RT-PCR和Western blotting技术检测重组质粒对SIAH2 mRNA和蛋白表达的影响,MTS比色法测定重组质粒转染对细胞体外增殖能力的影响,流式细胞术检测重组质粒转染后细胞周期和凋亡的变化。结果:与对照组相比,pGenesil-SIAH2能显著抑制SIAH2 mRNA和蛋白的表达水平;pGenesil-SIAH2转染组细胞增殖速度明显减慢;pGenesil-SIAH2组细胞明显阻滞于G1期,细胞凋亡率明显升高。结论:pGenesil-SIAH2能有效抑制HepG2增殖,使细胞周期阻滞在G1期,并诱导其早期凋亡。上述研究为以SIAH2为靶点的肝癌基因治疗提供实验依据。
关键词
RNA干扰
泛素连接酶
HEPG2细胞
细胞增殖
细胞凋亡
Keywords
RNA interference
Ubiquitin ligases
HepG2 cells
Cell proliferation
Apeptosis
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
缺氧环境下高迁移率族蛋白B1对线粒体生物合成的影响
被引量：
8
2
作者
许荣
贺兴波
华宗荣
刘瑶
机构
赣南
医学院
第一
附属
医院
内分泌
科
赣南医学院第一附属医院医务科
赣南
医学院
第一
附属
医院
消化
科
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2017年第3期245-250,共6页
基金
国家自然科学基金(81660406)
江西省卫生计生委科技计划项目(20161096)
+1 种基金
赣州市指导性科技计划(社会发展)项目(GZ2015ZSF072)
赣南医学院校级重点科研课题(ZD201601)
文摘
目的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)通过影响线粒体自噬参与肿瘤细胞能量代谢,文中旨在探讨缺氧环境下HMGB1对线粒体生物合成以及细胞能量代谢的影响。方法 HepG2细胞设常氧对照组(细胞在含5%CO_2的正常培养箱中培养)、缺氧对照组(细胞在1%O2+5%CO_2+94%N_2三气培养箱中培养)、HMGB1siRNA缺氧组(细胞转染HMGB1siRNA后于1%O2+5%CO_2+94%N_2三气培养箱中培养)和siRNA缺氧对照组(细胞转染阴性对照siRNA后于1%O2+5%CO_2+94%N_2三气培养箱中培养)。MTS法检测各组细胞增殖的速度,RT-PCR和Western blot检测各组细胞线粒体生物合成相关分子表达变化,透射电镜观察细胞内线粒体形态和数量,ATP试剂盒检测细胞内ATP含量。结果 HMGB1siRNA缺氧组细胞在48 h、72 h的吸光度值明显低于缺氧对照组和siRNA缺氧对照组(P<0.05)。当HMGB1表达被抑制后,PGC1α、NRF1和TFAM的相对表达量明显低于缺氧对照组和siRNA缺氧对照组(P<0.05)。Western blot结果显示,在缺氧培养24 h后,PGC1α、NRF1和TFAM蛋白的相对表达量明显高于常氧对照组(0.494±0.210 vs 0.090±0.020,1.080±0.470 vs 0.581±0.190,1.585±0.340 vs 0.792±0.350,P<0.05)。当HMGB1表达被抑制后,PGC1α、NRF1和TFAM蛋白的相对表达量明显低于缺氧对照组和siRNA缺氧对照组(P<0.05)。与缺氧对照组相比,HMGB1 siRNA缺氧组细胞内ATP含量明显下降,以缺氧12 h和24 h最为明显(P<0.05)。结论 HMGB1通过调控线粒体生物合成,维持细胞能量代谢,使细胞在不利于自身生长的缺氧环境下继续增殖。
关键词
肝癌
缺氧
线粒体生物合成
高迁移率族蛋白B1
Keywords
Hepatocellular carcinoma
Hypoxia
Mitochondrial biogenesis
High mobility group box-1 protein
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向泛素连接酶SIAH2的shRNA对人肝癌细胞株HepG2细胞周期和凋亡的影响
肖海
贺兴波
黄才斌
刘瑶
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
缺氧环境下高迁移率族蛋白B1对线粒体生物合成的影响
许荣
贺兴波
华宗荣
刘瑶
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2017
8
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