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肺癌患者血清中miR-23a的表达及临床意义 被引量:5
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作者 李杰 罗耀玲 +2 位作者 刘惟优 袁小亮 赖庆文 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第14期2297-2300,共4页
目的:探讨肺癌患者血清中miR-23a的表达情况及其与病例临床特征的关系。方法:提取63例肺癌患者和60例健康体检人血清中总mRNA,采用qRT-PCR方法检测miR-23a的相对表达量;统计分析miR-23a的表达与肺癌侵袭转移和患者耐药的关系。结果... 目的:探讨肺癌患者血清中miR-23a的表达情况及其与病例临床特征的关系。方法:提取63例肺癌患者和60例健康体检人血清中总mRNA,采用qRT-PCR方法检测miR-23a的相对表达量;统计分析miR-23a的表达与肺癌侵袭转移和患者耐药的关系。结果:与健康人相比,miR-23a在肺癌患者血清中表达增高(P〈0.01);miR-23a在淋巴结转移患者血清中的表达量显著高于未转移患者(P〈0.01);miR-23a在临床I~Ⅱ期肺癌患者血清中的表达低于Ⅲ~Ⅳ期患者(P〈0.05);miR-23a在非小细胞肺癌患者中的表达高于小细胞肺癌患者(P〈0.05);miR-23a的表达量在不同年龄、性别、吸烟及不同分化程度的患者中表达差异不显著(P〉0.05)。miR-23a的表达量随患者化疗次数的增多而表达增强。结论:血清miR-23a有可能作为肺癌患者转移及耐药判断的分子标志物。 展开更多
关键词 肺肿瘤 血清miR-23a 侵袭转移 耐药性
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化痰活血扶正方及拆方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖凋亡的影响
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作者 郑保平 罗耀玲 +3 位作者 喻道舫 张婉晴 黄青 苏腾伟 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第5期149-152,I0004,I0005,共6页
目的化痰活血扶正方及拆方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖凋亡的影响。方法通过制备化痰活血扶正方及其拆方含药血清和对照组血清。总方及拆方含药血清处理HSC-T6细胞24 h后,采用MTT法检测细胞活力,Edu标记法检测细胞增殖能力,Anne... 目的化痰活血扶正方及拆方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖凋亡的影响。方法通过制备化痰活血扶正方及其拆方含药血清和对照组血清。总方及拆方含药血清处理HSC-T6细胞24 h后,采用MTT法检测细胞活力,Edu标记法检测细胞增殖能力,Annexin V/PI双染法及JC-10染色法检测细胞凋亡;Western Blot检测Bcl-2和Bax蛋白表达。结果MTT结果显示10%的总方、活血化瘀方、化痰方含药血清对HSC-T6生长有明显抑制作用(P<0.05)。Edu标记实验结果表明总方和活血化瘀方与对照组相比细胞增殖数显著减少(P<0.05)。Annexin V/PI和JC-10检测结果显示化痰方、活血化瘀方和总方含药血清可显著促进细胞凋亡(P<0.01)。Western blot结果显示活血化瘀方和总方可降低Bcl-2蛋白表达(P<0.05),增加Bax蛋白表达(P<0.05)。结论化痰活血扶正方含药血清能够抑制大鼠肝星状细胞系HSC-T6增殖,并通过线粒体应激来诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 化痰活血扶正方 含药血清 大鼠肝星状细胞HSC-T6 增殖 凋亡
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低表达miR-21对苦参碱诱导的肝癌HepG2细胞凋亡的影响 被引量:9
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作者 罗耀玲 黄铀新 +1 位作者 赖平 张敏鸿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期284-288,共5页
目的:探讨miR-21低表达能否增强苦参碱(matrine,MAT)对肝癌细胞的促凋亡作用。方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测不同浓度MAT作用HepG2细胞后miR-21的表达情况。流式细胞术检测miR-21低表达对MAT诱导的细胞凋亡的影响;RT-qPCR和Western... 目的:探讨miR-21低表达能否增强苦参碱(matrine,MAT)对肝癌细胞的促凋亡作用。方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测不同浓度MAT作用HepG2细胞后miR-21的表达情况。流式细胞术检测miR-21低表达对MAT诱导的细胞凋亡的影响;RT-qPCR和Western blot检测miR-21低表达对MAT诱导的细胞凋亡中Bc1-2和Bax mRNA和蛋白表达水平的影响。结果:miR-21表达量随MAT作用浓度的增加而增加;miR-21低表达可促进MAT诱导的细胞凋亡,并促进Bax mRNA和蛋白的表达(P<0.05),而抑制Bcl-2 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论:miR-21低表达可通过抑制Bcl-2和促进Bax的表达来增强MAT诱导的HepG2细胞凋亡。 展开更多
关键词 MIR-21 苦参碱 HEPG2细胞 细胞凋亡
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木姜子提取物通过促进E-cadherin表达抑制人高转移肺癌95-D细胞的侵袭转移
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作者 罗耀玲 黄铀新 +1 位作者 杨建琼 李杰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第21期3472-3475,共4页
目的:观察木姜子乙醇提取物(litsea pungens ethanol extract,LPEE)对人高转移肺癌95-D细胞侵袭转移能力的影响,以及对E-cadherin表达的影响。方法:不同浓度LPEE作用95-D细胞,MTT法测定细胞增殖抑制率;transwell迁移实验和Matrigel侵袭... 目的:观察木姜子乙醇提取物(litsea pungens ethanol extract,LPEE)对人高转移肺癌95-D细胞侵袭转移能力的影响,以及对E-cadherin表达的影响。方法:不同浓度LPEE作用95-D细胞,MTT法测定细胞增殖抑制率;transwell迁移实验和Matrigel侵袭实验检测LPEE对95-D细胞迁移和侵袭能力的影响;PCR和Western Blot检测LPEE作用后E-cadherin基因和蛋白水平的表达变化。结果 :LPEE(≥50μg/m L)可显著抑制95-D细胞穿过transwell小室和Matrigel基质胶的数量(P<0.01);PCR和Western Blot结果表明LPEE(≥50μg/m L)可促进E-cadherin m RNA和蛋白的表达量(P<0.05)。结论:LPEE可通过促进Ecadherin的表达来抑制肝癌细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 肺肿瘤 木姜子 95-D 侵袭转移 E—cadherin
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TALENs介导MSTN基因突变山羊的制备及性能分析 被引量:5
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作者 宋绍征 何正义 +3 位作者 成勇 于宝利 张婷 李丹 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期531-542,共12页
肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是一种骨骼肌生长发育的负调控因子,可以抑制成肌细胞的增殖,是动物品种改良的重要候选基因,该基因突变能够引起骨骼肌的广泛性增生与肥大,产生“双肌”症状,导致动物脂肪分化减少、肌肉含量增加,从而满... 肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是一种骨骼肌生长发育的负调控因子,可以抑制成肌细胞的增殖,是动物品种改良的重要候选基因,该基因突变能够引起骨骼肌的广泛性增生与肥大,产生“双肌”症状,导致动物脂肪分化减少、肌肉含量增加,从而满足市场动物肉品质消费的需求。为了获得“双肌”表型的MSTN基因突变克隆山羊,本研究在山羊MSTN基因第一外显子序列设计并构建TALENs表达载体,转染山羊胎儿成纤维细胞,经嘌呤霉素筛选获得抗性细胞株,通过PCR检测和基因测序筛选MSTN基因突变细胞株作为供核细胞进行山羊体细胞核移植,并鉴定MSTN基因突变类型;通过组织切片分析MSTN基因突变山羊肌肉组织形态结构,监测不同月龄克隆山羊体重并分析其不同生长发育阶段的体重增长趋势。结果表明,共获得109株MSTN基因突变细胞株,突变效率达到79.0%(109/138),其中46株为双等位基因突变,占细胞株总数的33.3%(46/138)。选取4株生长状态较好的MSTN基因突变细胞株(1株为双等位基因纯合突变,3株为非纯合突变)进行体细胞核移植至12只受体山羊,30 d时B超检查出受孕母羊4只,受孕率为33.3%(4/12),妊娠到期分娩2只克隆山羊,测序结果表明M-1克隆山羊MSTN双等位基因中的一个等位基因未产生突变,另一个等位基因缺失3 bp;M-2克隆山羊MSTN双等位基因中的一个等位基因产生1 bp碱基插入,另一个等位基因缺失13 bp,两种突变均造成MSTN在突变位点之后的蛋白序列丢失。此外,M-1克隆山羊肌纤维排列紧密且粗大,每月体重均高于普通野生型山羊,但与普通野生型山羊生长趋势一致,且能够健康发育至成年。本研究利用TALENs技术成功介导山羊MSTN基因定点修饰,并获得MSTN基因突变的山羊胎儿成纤维细胞,将其作为供核细胞成功生产MSTN基因突变克隆山羊,为培育“双肌”表型山羊新品系奠定了技术基础,也为将来其他转基因动物的制备提供了参考方法。 展开更多
关键词 肌肉生长抑制素 基因突变 山羊 TALENs 体细胞核移植
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GH/tPA双转基因小鼠的制备及其表达分析
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作者 宋绍征 李丹 +3 位作者 何正义 张婷 成勇 周鸣鸣 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1649-1656,共8页
目的旨在获得GH/tPA双转基因小鼠,并比较分析小鼠乳腺中人组织纤溶酶原激活剂(tPA)的表达水平和个体生长发育状况。方法利用2只tPA单转基因雄性小鼠(P03、P05)与经超数排卵处理的正常非转基因雌性小鼠交配,受精卵显微注射线性化的GH质... 目的旨在获得GH/tPA双转基因小鼠,并比较分析小鼠乳腺中人组织纤溶酶原激活剂(tPA)的表达水平和个体生长发育状况。方法利用2只tPA单转基因雄性小鼠(P03、P05)与经超数排卵处理的正常非转基因雌性小鼠交配,受精卵显微注射线性化的GH质粒、胚胎移植而获得后代小鼠,PCR检测基因整合情况,ELISA和Western blotting检测比较单、双基因表达tPA水平,监测转基因小鼠不同生长阶段的体质量来分析GH基因对小鼠生长发育的影响。结果P03系小鼠共获得286枚受精卵,移植受体母鼠后,顺利产仔77只,经PCR检测获得16只tPA单转基因小鼠(7♂,9♀),13只GH/tPA双转基因小鼠(8♂,5♀),双基因整合率为16.9%;P05系小鼠共获得175枚受精卵,移植受体母鼠后,顺利产仔34只,经PCR检测获得12只tPA单转基因小鼠(5♂,7♀),7只GH/tPA双转基因小鼠(3♂,4♀),双基因整合率为20.6%。单、双转基因小鼠乳腺中表达tPA的最高量分别为82.5μg/mL、674μg/mL,GH/tPA双转基因小鼠乳腺中表达tPA的量明显高于tPA单转基因(P<0.05)。在小鼠的整个生长周期内,单、双转基因与正常非转基因小鼠的体质量增长均没有显著的差异(P>0.05)。结论本实验成功地制备了GH/tPA双转基因小鼠,结果表明GH基因导入小鼠体内能够显著地提高目的基因tPA的表达水平,且不会对转基因小鼠的生长发育造成任何明显的影响,这为将来制备高表达转基因动物生产医药蛋白及其育种奠定了基础。 展开更多
关键词 双转基因小鼠 表达 超数排卵 显微注射 整合
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