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用柱层析法检测中国龙虾主要变应原的研究
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作者 陈同强 郭丹 +3 位作者 李腾杉 李佳 廖剑霖 李立明 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期108-111,共4页
为分离、纯化和鉴定中国龙虾的主要变应原,采用硫酸铵沉淀法和等电点沉淀法对变应原粗浸液进行初分,在蛋白核酸检测仪检测控制下,用DEAE-52离子交换层析柱进行阶段洗脱和葡聚糖凝胶G-100柱层析,斑点ELISA确定其免疫活性。结果表明:中国... 为分离、纯化和鉴定中国龙虾的主要变应原,采用硫酸铵沉淀法和等电点沉淀法对变应原粗浸液进行初分,在蛋白核酸检测仪检测控制下,用DEAE-52离子交换层析柱进行阶段洗脱和葡聚糖凝胶G-100柱层析,斑点ELISA确定其免疫活性。结果表明:中国龙虾变应原蛋白的硫酸铵沉淀范围在35%~60%之间,pH等于4.7、4.5时的等电点沉淀蛋白质有明显的变应原活性;离子交换层析中具变应原活性蛋白质峰含分子质量为15 000、20 700、34 000、60 000、83 200 u的蛋白质;葡聚糖凝胶G-100层析后具变应原活性蛋白峰SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳显示只有34 000 u相对分子质量的蛋白条带,纯度为91.5%。本试验分离、纯化鉴定出中国龙虾相对分子质量为34 000 u的主要变应原,对于变应原的标准化、提高食物变态反应性疾病诊断和治疗水平具重要意义。 展开更多
关键词 中国龙虾 变应原 分离纯化
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