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miR⁃30b在低氧环境中调控兔骨髓间充质干细胞成软骨分化
被引量：
3
1
作者
汪仡骁
吴恒鹏
+3 位作者
万雪
陈方
石超
瓦庆德
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2021年第24期3113-3118,共6页
目的针对软骨缺损难以自行修复的临床难题,探讨miR⁃30b调控兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨分化中的作用及潜在机制,为软骨修复提供新思路。方法密度梯度离心法分离BMSCs;流式细胞术和双向诱导分化实验鉴定细胞;CCK⁃8和Western blot检...
目的针对软骨缺损难以自行修复的临床难题,探讨miR⁃30b调控兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨分化中的作用及潜在机制,为软骨修复提供新思路。方法密度梯度离心法分离BMSCs;流式细胞术和双向诱导分化实验鉴定细胞;CCK⁃8和Western blot检测细胞在不同CoCl_(2)浓度下增殖能力和HIF⁃1α表达变化情况;构建稳定表达miR⁃30b的细胞株,Western blot检测其靶基因SOX9和Wnt/β⁃catnein信号通路的表达;在低氧环境中成软骨诱导分化,21 d后Western blot和免疫组化染色检测CollagenⅡ与SOX9的表达。结果流式检测和双向分化实验结果显示细胞高表达CD29和CD34,低表达CD44和CD45,同时具有良好的分化能力。CCK⁃8结果表明CoCl2溶液诱导的低氧环境可促进BMSCs增殖(P<0.05),且低氧可促进细胞表达HIF⁃1α。稳定表达miR⁃30b的细胞在低氧环境中成软骨诱导21 d后,免疫组化和Western blot结果显示CollagenⅡ与SOX9的表达较对照组、空载组及低氧组均明显下调(P<0.01)。结论miR⁃30b能降低BMSCs在低氧环境中成软骨分化,为表观遗传学调控干细胞修复软骨缺损提供参考。
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关键词
软骨缺损
miR⁃30b
骨髓间充质干细胞
成软骨分化
低氧
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职称材料
题名
miR⁃30b在低氧环境中调控兔骨髓间充质干细胞成软骨分化
被引量：
3
1
作者
汪仡骁
吴恒鹏
万雪
陈方
石超
瓦庆德
机构
遵义医科大学第二附属
医院
骨科
遵义医科大学附属
医院
贵州省细胞工程重点实验室
遵义医科大学附属
医院
骨科
贵黔国际总医院骨科
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2021年第24期3113-3118,共6页
基金
国家自然科学基金项目(编号:81860322,81660362)
贵州省科技计划项目(编号:黔科合基础x⁃ZK[2021]重点007)。
文摘
目的针对软骨缺损难以自行修复的临床难题,探讨miR⁃30b调控兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨分化中的作用及潜在机制,为软骨修复提供新思路。方法密度梯度离心法分离BMSCs;流式细胞术和双向诱导分化实验鉴定细胞;CCK⁃8和Western blot检测细胞在不同CoCl_(2)浓度下增殖能力和HIF⁃1α表达变化情况;构建稳定表达miR⁃30b的细胞株,Western blot检测其靶基因SOX9和Wnt/β⁃catnein信号通路的表达;在低氧环境中成软骨诱导分化,21 d后Western blot和免疫组化染色检测CollagenⅡ与SOX9的表达。结果流式检测和双向分化实验结果显示细胞高表达CD29和CD34,低表达CD44和CD45,同时具有良好的分化能力。CCK⁃8结果表明CoCl2溶液诱导的低氧环境可促进BMSCs增殖(P<0.05),且低氧可促进细胞表达HIF⁃1α。稳定表达miR⁃30b的细胞在低氧环境中成软骨诱导21 d后,免疫组化和Western blot结果显示CollagenⅡ与SOX9的表达较对照组、空载组及低氧组均明显下调(P<0.01)。结论miR⁃30b能降低BMSCs在低氧环境中成软骨分化,为表观遗传学调控干细胞修复软骨缺损提供参考。
关键词
软骨缺损
miR⁃30b
骨髓间充质干细胞
成软骨分化
低氧
Keywords
cartilage defect
miR⁃30b
bone marrow⁃derived mesenchymal stem cells
chondrogenic differentiation
hypoxia
分类号
R68 [医药卫生—骨科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR⁃30b在低氧环境中调控兔骨髓间充质干细胞成软骨分化
汪仡骁
吴恒鹏
万雪
陈方
石超
瓦庆德
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2021
3
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