大型土壤动物对烟草品种和短期地膜覆盖的响应

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作者 王柳 邹勋晖 +4 位作者 杨茂发 于晓飞 黄纯杨 杨相 杨大星 《江苏农业科学》 北大核心 2025年第11期270-277,共8页

为研究烟草品种和短期地膜覆盖(返苗期)对大型土壤动物群落组成和多样性的影响,于2022年4月(返苗期)、5月(伸根期)、6月(旺长期)和7月(成熟期)采用手捡法对地膜覆盖和无地膜覆盖的云烟87、K326烟田的大型土壤动物群落进行调查,共获得大... 为研究烟草品种和短期地膜覆盖(返苗期)对大型土壤动物群落组成和多样性的影响,于2022年4月(返苗期)、5月(伸根期)、6月(旺长期)和7月(成熟期)采用手捡法对地膜覆盖和无地膜覆盖的云烟87、K326烟田的大型土壤动物群落进行调查,共获得大型土壤动物283个,隶属8纲17目44科,优势类群为蚁科。主成分分析(PCA)结果表明,烟草品种(云烟87和K326)和地膜覆盖处理均明显影响大型土壤动物群落组成。无地膜云烟87大型土壤动物类群数、密度和Shannon-Wiener指数显著高于地膜覆盖云烟87(P<0.05),地膜覆盖K326与无地膜K326间上述指数无显著差异;地膜覆盖云烟87大型土壤动物类群数和密度显著低于地膜覆盖K326,无地膜云烟87大型土壤动物类群数和Shannon-Wiener指数显著高于无地膜K326(P<0.05)。无地膜云烟87、地膜覆盖K326和无地膜K326的土壤动物类群数、密度和Shannon-Wiener指数在不同生长阶段差异显著(P<0.05),而地膜覆盖云烟87上述指标在不同生长阶段无显著差异。相关性分析表明,Shannon-Wiener指数与土壤有效磷含量呈显著正相关(P<0.05)。综上,短期地膜覆盖和烟草品种均能改变大型土壤动物群落组成,但对大型土壤动物密度和多样性的影响因烟草品种而异,短期地膜覆盖对云烟87烟田大型土壤动物密度和多样性的影响显著。 展开更多

关键词 大型土壤动物 群落 密度 多样性 烟草品种 短期地膜覆盖 响应

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喀斯特地区不同土地利用类型土壤节肢动物的群落结构:以贵阳市为例 被引量：4

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作者 杨大星 董逸夕 李灿 《贵州农业科学》 CAS 2023年第7期112-123,共12页

【目的】探明土壤节肢动物对喀斯特地区不同土地利用类型的响应,为城市土地规划利用及退化生态系统的恢复提供科学资料。【方法】2020年7—8月采用手捡法和干漏斗法对贵阳市南明区公路、校园绿地、农田和森林4种土地利用类型的土壤节肢... 【目的】探明土壤节肢动物对喀斯特地区不同土地利用类型的响应,为城市土地规划利用及退化生态系统的恢复提供科学资料。【方法】2020年7—8月采用手捡法和干漏斗法对贵阳市南明区公路、校园绿地、农田和森林4种土地利用类型的土壤节肢动物进行调查,再采用重复测量方差分析结合主成分分析(PCA)检验土地利用类型和采样时间及其交互作用对土壤节肢动物群落结构的影响。【结果】从调查区获得土壤节肢动物1223头,隶属10纲28目114科。优势类群为杆棱甲螨科(Mochlozetidae)和等节跳科(Isotomidae),分别占总密度的24.19%和13.42%。7月和8月公路的土壤节肢动物类群数(4.07个和4.33个)和Shannon-Wiener多样性指数(1.14和1.21)显著低于森林(7.80个和6.27个,1.76和1.60),但密度(4561.02 ind/m^(2)和7411.41 ind/m^(2))与森林(7233.21 ind/m^(2)和8025.58 ind/m^(2))无显著差异;校园绿地、农田的类群数(5.67个、5.80个和6.73个、4.40个)、密度(10508.55 ind/m^(2)、5810.75 ind/m^(2)和5072.45 ind/m^(2)、8800.87 ind/m^(2))和Shannon-Wiener多样性指数(1.43、1.43和1.78、1.22)与森林无显著差异。森林与农田、公路的土壤节肢动物优势类群物种组成差异明显,公路、校园绿地和农田土壤节肢动物常见类群和稀有类群组成与森林明显不同。【结论】农业耕作能明显改变土壤节肢动物群落组成,而交通活动不仅能改变群落组成,还能显著降低土壤节肢动物多样性。 展开更多

关键词 土壤节肢动物 土地利用类型 多样性 城市生态系统 喀斯特地区

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大鲵肝脏金属硫蛋白提取工艺优化及生物活性分析 被引量：1

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作者 郝林英 骆建林 +8 位作者 随坤宇 王明波 黄青青 华雪 叶婷 王开卓 商文聪 孟永禄 李灿 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第22期188-199,共12页

为提高大鲵加工副产物利用价值,探索两栖动物金属硫蛋白结构、活性和功能,本研究采用匀浆离心法从大鲵肝脏提取金属硫蛋白(AdMT),通过单因素和正交试验优化提取工艺,利用离子交换层析分离纯化,以自由基清除能力检测抗氧化活性,乳酸脱氢... 为提高大鲵加工副产物利用价值,探索两栖动物金属硫蛋白结构、活性和功能,本研究采用匀浆离心法从大鲵肝脏提取金属硫蛋白(AdMT),通过单因素和正交试验优化提取工艺,利用离子交换层析分离纯化,以自由基清除能力检测抗氧化活性,乳酸脱氢酶释放率测试细胞毒性,脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症模型评价抗炎活性,CCK-8法分析细胞增殖能力和免疫原性,流式细胞术检测细胞周期,划痕实验测试细胞迁移能力,CdCl_(2)诱导L929和HaCaT细胞中毒模型评价重金属解毒能力。结果表明:最佳提取工艺为液料比5:1、提取液浓度0.02 mol/L、提取温度40℃,提取时间1 h,提取含量为0.362 mg/g。AdMT对ABTS^(+)自由基的清除率达到95.01%,对L929和HaCaT细胞乳酸脱氢酶释放率及RAW264.7细胞存活率均无显著影响。AdMT处理48 h后,L929和HaCaT细胞存活率分别达到192.63%和207.92%,细胞增殖指数分别上升至0.56和0.53。同时,细胞迁移能力随着AdMT浓度增加不断增强,划痕愈合率分别为63.38%和76.23%。此外,AdMT能显著(P<0.05,P<0.01,P<0.001)降低细胞炎症模型中炎症因子的表达水平,将镉中毒细胞存活率恢复至对照组水平。研究结果为大鲵金属硫蛋白的进一步开发和大鲵副产物加工利用提供了参考。 展开更多

关键词 大鲵 金属硫蛋白 抗氧化 抗炎 细胞增殖 细胞迁移 重金属解毒能力

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烟草品种和垄作对土壤小型节肢动物多样性的影响

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作者 李治模 于晓飞 +5 位作者 杨茂发 杨相 吴慧子 温明霞 黄纯杨 杨大星 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第7期1450-1458,共9页

[目的]探明烟田小环境变化对小型土壤节肢动物群落组成和多样性的影响,为筛选喀斯特植烟区的适栽品种与种植模式提供科学依据。[方法]2022年7月使用干漏斗法对贵州省凤岗县云烟87和K326种植区的小型土壤节肢动物群落组成和多样性进行调... [目的]探明烟田小环境变化对小型土壤节肢动物群落组成和多样性的影响,为筛选喀斯特植烟区的适栽品种与种植模式提供科学依据。[方法]2022年7月使用干漏斗法对贵州省凤岗县云烟87和K326种植区的小型土壤节肢动物群落组成和多样性进行调查,分析小型土壤节肢动物与烟田小环境(品种、种植模式及其交互作用)之间的关联性。[结果]调查共获得小型土壤节肢动物6纲16目70科。云烟87与K326小型土壤节肢动物群落组成差异明显,其中,K326垄体与垄沟的小型土壤节肢动物群落组成存在极显著差异,但云烟87无显著差异;K326垄体与云烟87垄体小型土壤节肢动物群落组成差异极显著,而K326垄沟和云烟87垄沟小型土壤节肢动物群落组成无显著差异。K326小型土壤节肢动物类群数、密度和Shannon指数(H′)分别为4.18、5535.56和1.16,显著高于云烟87(2.12、1720.00和0.65),K326垄体小型土壤节肢动物类群数、密度和Shannon指数(H′)分别为5.47、10520.00和1.40,显著高于垄沟(2.90、551.11和0.92),云烟87垄体小型土壤节肢动物仅密度(3000.00)显著高于垄沟(400.00),类群数和Shannon指数(H′)无显著差异;云烟87垄体小型土壤节肢动物类群数、密度和Shannon指数(H′)分别为1.97、3000.00和0.61,显著低于K326垄体(5.47、10520.00和1.40),而云烟87和K326垄沟间小型土壤节肢动物类群数、密度和Shannon指数(H′)无显著差异。[结论]垄作引起的微地形变化对小型土壤节肢动物的影响受烟草品种调控,垄体小型土壤节肢动物对烟草品种变化较垄沟更为敏感。 展开更多

关键词 垄沟 垄体 烟田 小型土壤节肢动物 多样性

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肉及肉制品新鲜度影响因素及控制方法研究进展 被引量：2

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作者 罗丽 许粟 +1 位作者 扶胜 陶光灿 《肉类研究》 北大核心 2025年第2期55-66,共12页

为深入分析肉及肉制品新鲜度影响因素及控制方法研究进展,采用CiteSpace软件对2014—2023年肉及肉制品新鲜度研究进行文献计量分析,剖析肉及肉制品腐败变质原因,综述肉品保鲜控制技术。肉及肉制品新鲜度影响因素主要包括微生物、含氧量... 为深入分析肉及肉制品新鲜度影响因素及控制方法研究进展,采用CiteSpace软件对2014—2023年肉及肉制品新鲜度研究进行文献计量分析,剖析肉及肉制品腐败变质原因,综述肉品保鲜控制技术。肉及肉制品新鲜度影响因素主要包括微生物、含氧量、含水量、光照、脂肪氧化、蛋白质氧化等,其中以微生物和温度对其品质影响最大。当前肉品主流保鲜技术以天然抑菌剂、添加抗氧化剂的生物膜结合冷藏为主,综合多种保鲜技术的栅栏技术具有能耗低、无污染、抑菌效果好等特点;检测技术逐步转向以电子鼻、电子舌检测等为代表的无损检测;监测技术与大数据、人工智能结合,可为肉品新鲜度的管理提供新的思路。 展开更多

关键词 肉制品 新鲜度 CITESPACE 影响因素 保鲜效果

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中国大鲵骨胶原蛋白肽通过Gm26688/NF-κB路径抑制LPS诱导的炎症

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作者 苏淑贤 黎琴容 商文聪 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第8期1920-1927,共8页

目的:探究长链非编码RNA Gm26688对巨噬细胞RAW264.7的免疫调控功能,使用中国大鲵(CGS)胶原蛋白肽处理LPS诱导的巨噬细胞,探究Gm26688在CGS骨胶原蛋白肽调控炎症反应中的作用。方法:RT-PCR克隆Gm26688基因,RNA-FISH分析Gm26688在巨噬细... 目的:探究长链非编码RNA Gm26688对巨噬细胞RAW264.7的免疫调控功能,使用中国大鲵(CGS)胶原蛋白肽处理LPS诱导的巨噬细胞,探究Gm26688在CGS骨胶原蛋白肽调控炎症反应中的作用。方法:RT-PCR克隆Gm26688基因,RNA-FISH分析Gm26688在巨噬细胞中的定位;qRT-PCR检测LPS和CGS骨胶原蛋白肽处理后Gm26688和炎症因子表达;使用小干扰RNA(siRNA)沉默Gm26688表达,qRT-PCR检测Gm26688干扰后LPS和CGS骨胶原蛋白肽对炎症因子表达的影响;Western blot检测NF-κB p65表达及其磷酸化水平。结果:LPS显著促进Gm26688表达。RT-PCR扩增得到Gm26688序列,RNA-FISH显示Gm26688主要位于细胞核。CGS骨胶原蛋白肽抑制LPS诱导的Gm26688表达,且<3 kD的CGS骨胶原蛋白肽对Gm26688的抑制效果最显著。CGS骨胶原蛋白肽(<3 kD)显著抑制LPS诱导的炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α表达。Gm26688干扰显著下调LPS或LPS+CGS骨胶原蛋白肽刺激的RAW264.7细胞中炎症因子IL-6和TNF-α表达。Western blot结果显示,CGS骨胶原蛋白肽通过Gm26688抑制NF-κB p65磷酸化水平。结论:CGS骨胶原蛋白肽通过Gm26688/NF-κB路径抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症。 展开更多

关键词 Gm26688 LPS RAW264.7 大鲵骨胶原蛋白肽 NF-ΚB

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普定水库浮游植物群落及环境因子关系研究 被引量：4

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作者 张婷 王佳兵 +2 位作者 陈椽 向刚 龙胜兴 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2021年第S01期8-19,共12页

为了探讨普定水库浮游植物群落结构的分布特征及其水中的环境因子相关系,作者于2018年1-12月在普定水库进行样品采集,并测定相关水质参数及水体中的微量重金属因子(Hg、As、Cu、Ni和Pb)。通过冗余分析(RDA),结果表明:普定水库中的主要... 为了探讨普定水库浮游植物群落结构的分布特征及其水中的环境因子相关系,作者于2018年1-12月在普定水库进行样品采集,并测定相关水质参数及水体中的微量重金属因子(Hg、As、Cu、Ni和Pb)。通过冗余分析(RDA),结果表明:普定水库中的主要优势群落为蓝藻门、甲藻门、硅藻门浮游植物,且分布明显与总磷的逐年增加,总氮显著降低特征相关,浮游植物群落蓝藻门、甲藻门、硅藻门、绿藻门浮游植物与微量重金属元素Hg、As、Cu明显呈正相关关系,主要由于浮游植物胞外、胞内的化学官能团能与重金属离子发生相互作用,形成络合物,降低重金属对浮游植物的毒性,促进浮游植物的生长繁殖。通过主成分分析(PCA)表明,浮游植物群落甲藻门过度生长繁殖可对蓝藻门、硅藻门浮游植明显存在竞争排斥关系,促使绿藻门、金藻门、祼藻门浮游植物种类及其丰富度多样性特征增加。 展开更多

关键词 总磷 总氮 重金属 浮游植物群落结构 普定水库

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不同绿化树种树附生苔藓节肢动物群落特征

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作者 杨大星 董逸夕 李灿 《山地农业生物学报》 2023年第5期15-23,共9页

为掌握绿化树种变化对树附生苔藓节肢动物群落特征的影响,采用干漏斗法(Tullgren法)于2018年7月、9月至12月和2019年8月对响叶杨(Populus adenopoda)、香樟(Cinnamomum camphora)和日本晚樱(Prunus serrulata var.lannesiana)树附生苔... 为掌握绿化树种变化对树附生苔藓节肢动物群落特征的影响,采用干漏斗法(Tullgren法)于2018年7月、9月至12月和2019年8月对响叶杨(Populus adenopoda)、香樟(Cinnamomum camphora)和日本晚樱(Prunus serrulata var.lannesiana)树附生苔藓节肢动物进行了调查。本研究共获得附生苔藓节肢动物2276只,隶属5纲14目62科,优势类群为半翅目(Hemiptera)、单翼甲螨科(Haplozetidae)和棘跳科(Onychiuridae)。主成分(PCA)分析表明不同绿化树种间树附生苔藓节肢动物群落组成差异较小。香樟和响叶杨树附生苔藓节肢动物群落类群数和Shannon-wiener多样性指数(H′)显著高于日本晚樱(P<0.05),但不同树种间树附生苔藓节肢动物密度无显著差异。香樟和日本晚樱树附生苔藓节肢动物类群数、密度和Shannon-wiener多样性指数(H′)月份间差异显著(P<0.05),而响叶杨树附生苔藓节肢动物类群数、密度和Shannon-wiener多样性指数(H′)月份变化不明显。相关性分析显示,月均温、月相对湿度、月日照时数和月降水量与树附生苔藓节肢动物类群数、密度和Shannon-wiener多样性指数(H′)无显著相关性。结果说明树附生苔藓节肢动物多样性比密度和群落组成对树种变化更敏感。 展开更多

关键词 树附生苔藓 节肢动物 群落特征 绿化树种

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番茄潜叶蛾卵黄原蛋白受体基因TaVgR在生殖发育调控中的作用 被引量：3

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作者 闫欣 杨洪 +3 位作者 宋佳慧 李仁贵 张毅波 杨文佳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期675-683,共9页

【目的】本研究旨在明确卵黄原蛋白受体(vitellogenin receptor,VgR)在番茄潜叶蛾Tuta absoluta生殖发育过程中的功能,为潜叶类害虫的绿色防控提供候选靶标。【方法】基于番茄潜叶蛾转录组数据,采用RT-PCR扩增TaVgR基因cDNA全序列,并进... 【目的】本研究旨在明确卵黄原蛋白受体(vitellogenin receptor,VgR)在番茄潜叶蛾Tuta absoluta生殖发育过程中的功能,为潜叶类害虫的绿色防控提供候选靶标。【方法】基于番茄潜叶蛾转录组数据,采用RT-PCR扩增TaVgR基因cDNA全序列,并进行生物信息分析;通过RT-qPCR分析TaVgR在番茄潜叶蛾不同发育阶段(1-4龄幼虫、1-7日龄雌蛹和雌成虫)和雌成虫不同组织(头、体壁、前肠、中肠、后肠、卵巢、脂肪体和马氏管)中的表达模式;进一步利用RNAi抑制番茄潜叶蛾雌蛹体内TaVgR的表达,并观测沉默TaVgR基因后番茄潜叶蛾卵巢发育及繁殖力的变化。【结果】克隆获得番茄潜叶蛾TaVgR cDNA(GenBank登录号:MZ682118)序列,其开放阅读框序列长5496 bp,编码1831个氨基酸,推测的蛋白分子量约为206 kD,等电点为5.17,信号肽包含N-端前18个氨基酸残基,并具有典型LDLR家族蛋白保守功能域。RT-qPCR结果显示,TaVgR转录水平随着番茄潜叶蛾龄期的增加逐渐上升,雌成虫羽化后达到最高水平;TaVgR在番茄潜叶蛾雌成虫的卵巢中表达量最高。TaVgR RNAi对初期雌蛹中TaVgR的表达抑制率为62.04%~72.55%,导致卵黄蛋白在卵巢中的沉积受阻,卵巢管和卵粒长度缩短,成虫10日单雌总产卵量及后代卵孵化率降低,最终引起番茄潜叶蛾繁殖力下降。【结论】TaVgR基因在番茄潜叶蛾雌成虫和卵巢中高表达,且沉默该基因严重阻碍其卵巢发育和降低繁殖力。本研究为开发以VgR基因作为靶标的鳞翅目害虫防治新技术奠定了理论基础。 展开更多

关键词 番茄潜叶蛾 卵黄原蛋白受体 RNA干扰 卵巢发育 繁殖力

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DEHP和MEHP对H295R细胞类固醇激素合成基因表达的影响 被引量：2

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作者 叶婷 董四君 +3 位作者 王佳 杨丹 杨文佳 李灿 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期78-86,共9页

为探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)及其代谢产物邻苯二甲酸单-2-乙基己酯(mono-(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP)对H295R细胞类固醇激素合成关键基因表达的影响,本实验将H295R细胞分别暴露于DEHP(0、1... 为探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)及其代谢产物邻苯二甲酸单-2-乙基己酯(mono-(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP)对H295R细胞类固醇激素合成关键基因表达的影响,本实验将H295R细胞分别暴露于DEHP(0、1、10、100、1 000μmol·L-1)和MEHP(0、1、10、100、1 000μmol·L-1)24 h,用MTT法检测细胞活性,并应用荧光定量PCR法分析细胞类固醇激素合成过程中关键酶的基因表达水平。结果显示,1 000μmol·L-1DEHP和MEHP对H295R细胞染毒24 h显著降低H295R细胞活力,所以本研究采用了较低的染毒浓度(0、1、10和100μmol·L-1)对H295R细胞染毒24 h来评估DEHP和MEHP对H295R细胞类固醇激素合成通路的影响。1、10和100μmol·L-1DEHP显著增加醛固酮合成酶CYP11B2的基因表达水平。10μmol·L-1DEHP显著上调了3-β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD2)的基因表达水平。1、10和100μmol·L-1MEHP显著下调了3-β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD1和3β-HSD2)、17β羟基类固醇脱氢酶17β-HSD4、17α羟化酶/17,20裂解酶CYP17和芳香酶CYP19a的基因表达水平。10和100μmol·L-1MEHP染毒H295R 24 h显著下调了CYP21和STAR的基因表达水平,然而,10和100μmol·L-1MEHP显著上调了CYP11B2的基因表达水平。100μmol·L-1MEHP显著下调了17β-HSD1的基因表达水平。上述研究结果表明,DEHP、MEHP都可不同程度影响H295R细胞类固醇激素合成过程中关键基因的表达。MEHP可以通过抑制STAR基因的表达,从而将影响胆固醇在细胞内的转运;并能显著性抑制类固醇激素合成过程中CYP17、CYP19a、3β-HSD1、3β-HSD2、17β-HSD1、17β-HSD4、CYP21基因的表达,最终将抑制H295R细胞中类固醇激素的合成。与DEHP相比,MEHP对H295R细胞类固醇激素合成关键基因表达的影响较明显。 展开更多

关键词 邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP) 邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP) H295R 类固醇激素合成

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烟草甲clip丝氨酸蛋白酶基因的克隆及其对外源激素和免疫胁迫的表达响应（英文） 被引量：3

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作者 陈春旭 许抗抗 +4 位作者 杨洪 赵凤 严毅 胡大鸣 杨文佳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期535-546,共12页

【目的】作为细胞外信号级联通路的重要组成部分,含有clip结构域的丝氨酸蛋白酶(clip-domain serine proteases, CLIPs)在昆虫发育和先天免疫过程中起着重要作用。本研究旨在克隆烟草甲 Lasioderma serricorne CLIP基因,解析其在烟草甲... 【目的】作为细胞外信号级联通路的重要组成部分,含有clip结构域的丝氨酸蛋白酶(clip-domain serine proteases, CLIPs)在昆虫发育和先天免疫过程中起着重要作用。本研究旨在克隆烟草甲 Lasioderma serricorne CLIP基因,解析其在烟草甲不同发育阶段和幼虫不同组织中的表达模式,分析其在外源激素20-羟基蜕皮酮(20E)和免疫胁迫后的表达特征,为进一步研究其生理功能奠定基础。【方法】采用RT-PCR技术克隆获得烟草甲两个 CLIPs 基因( LsCLIP 1和 LsCLIP 2)全长cDNA序列,并利用生物信息学软件预测其编码蛋白的结构和特征,利用MEGA 6.06构建昆虫CLIPs系统发育树;利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qPCR)研究这两个基因在不同发育阶段[低龄幼虫(卵孵化后24 h内)、高龄幼虫(4龄以上)、蛹(化蛹后48 h以上)、早期成虫(化蛹后24 h内)和晚期成虫(化蛹后7 d)]、5龄幼虫不同组织(表皮、脂肪体、肠道和剩余组织)中以及注射20E(120 ng/幼虫)和来源于大肠杆菌 Escherichia coli 和金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 的肽聚糖(0.2 μL)后4龄幼虫中的表达模式。【结果】克隆获得烟草甲 LsCLIP 1和 LsCLIP 2基因的cDNA全序列,其开放阅读框长度均为1 194 bp,编码397个氨基酸。序列分析显示,其氨基酸序列各自具有一个clip结构域和胰蛋白酶结构域。系统发育分析表明,CLIP1和CLIP2都属于subfamily C CLIPs。qPCR结果表明, LsCLIP 1和 LsCLIP 2基因在所检测的各发育阶段和幼虫各组织中均有表达,分别尤以蛹期和表皮中表达量最高;经20E和肽聚糖诱导后,烟草甲幼虫体内 LsCLIP 1和 LsCLIP 2基因的表达量明显提高。【结论】推测 LsCLIP 1和 LsCLIP 2可能参与了烟草甲的蜕皮发育和对免疫胁迫的应激响应。本研究将为后续研究昆虫CLIPs的分子调控提供参考。 展开更多

关键词 烟草甲 clip丝氨酸蛋白酶 20-羟基蜕皮甾酮 免疫胁迫 表达模式

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烟草甲谷胱甘肽S-转移酶基因LsGSTe1的表达及其与甲酸乙酯耐受性的关系 被引量：3

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作者 严毅 许抗抗 +2 位作者 杨洪 胡大鸣 杨文佳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期1-10,共10页

【目的】探究烟草甲Lasioderma serricorne谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因LsGSTe 1的分子特性和生物学功能。【方法】在烟草甲转录组数据的基础上,利用RT-PCR技术扩增LsGSTe 1基因,并进行生物信息学分析;采用qPC... 【目的】探究烟草甲Lasioderma serricorne谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因LsGSTe 1的分子特性和生物学功能。【方法】在烟草甲转录组数据的基础上,利用RT-PCR技术扩增LsGSTe 1基因,并进行生物信息学分析;采用qPCR技术检测LsGSTe 1在烟草甲不同发育阶段(低龄幼虫、高龄幼虫、蛹、低龄成虫、高龄成虫)及高龄幼虫不同组织(表皮、中肠、脂肪体、马氏管)中的表达水平,以及在甲酸乙酯熏蒸胁迫后的5龄幼虫中的表达变化。进一步采用RNAi技术沉默烟草甲5龄幼虫LsGSTe 1基因,通过生物测定分析烟草甲对熏蒸剂甲酸乙酯的敏感性变化。【结果】获得LsGSTe 1基因的全长cDNA序列(GenBank登录号:MN480468),开放阅读框长684 bp,编码227个氨基酸,N端和C端均存在催化保守位点。系统发育分析表明该基因属于GSTs的Epsilon家族。qPCR结果表明,LsGSTe 1在烟草甲不同发育阶段均有表达,且在高龄幼虫期的表达量较高;表达部位主要在幼虫脂肪体,其次为中肠和表皮,而在马氏管中的表达量最低。LC 30(10μL/L)和LC 50(20μL/L)浓度的甲酸乙酯对烟草甲5龄幼虫熏蒸胁迫后,LsGSTe 1的表达水平显著升高,分别是对照组的2.96和5.80倍。RNAi结果发现,RNAi 48 h和72 h后,LsGSTe 1的表达量分别下降了79.9%和83.0%,沉默效率显著;RNAi 72 h后,ds LsGSTe1注射组与对照(ds GFP组)相比,LC 50浓度的甲酸乙酯处理5龄幼虫的死亡率明显提高了32.4%。【结论】推测LsGSTe 1基因可能参与了烟草甲对甲酸乙酯的代谢与解毒过程。 展开更多

关键词 烟草甲 谷胱甘肽S-转移酶 基因表达 甲酸乙酯 RNA干扰

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烟草甲两个羧酸酯酶基因的克隆及表达模式 被引量：2

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作者 朱晓晔 丁天波 +3 位作者 许抗抗 周江 李灿 杨文佳 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期136-144,共9页

为了深入了解羧酸酯酶(Carboxylesterase,Car E)基因在烟草甲Lasioderma serricorne生长发育及响应CO_2气调胁迫方面的作用,在转录组测序基础上,利用RT-PCR技术克隆了烟草甲2个Car E基因c DNA全序列,对其分子特性和系统发育进行分析,并... 为了深入了解羧酸酯酶(Carboxylesterase,Car E)基因在烟草甲Lasioderma serricorne生长发育及响应CO_2气调胁迫方面的作用,在转录组测序基础上,利用RT-PCR技术克隆了烟草甲2个Car E基因c DNA全序列,对其分子特性和系统发育进行分析,并利用实时定量PCR技术检测其在不同发育阶段及不同φ(CO_2)气调胁迫条件下的表达模式。获得了烟草甲2个Car E基因完整的开放阅读框,其长度为1 698 bp和1 695 bp,编码565和564个氨基酸。氨基酸同源性和系统进化树分析表明,它们均具有羧酸酯酶典型的保守结构域,且属于β家族,分别命名为Ls Car EB1和Ls Car EB2(Gen Bank登录号:MG189601和MG189602)。Ls Car EB1和Ls Car EB2在烟草甲的各发育阶段均有所表达,其中在高龄幼虫期的表达量较高,显著高于低龄幼虫、蛹和成虫期的表达水平。LC10、LC30和LC503种φ(CO_2)处理6 h后,Ls Car EB1和Ls Car EB2的mRNA表达量随胁迫φ(CO_2)升高而上调且显著高于对照组。推测Ls Car EB1和Ls Car EB2不仅对烟草甲的生长发育具有重要作用,而且是其响应CO_2气调胁迫的重要机制之一。 展开更多

关键词 烟草甲 羧酸酯酶 克隆 表达模式 CO2胁迫

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珠江广州虎门段鱼类脂肪酸组成及其食性研究 被引量：1

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作者 张婷 向刚 龙胜兴 《湖北农业科学》 2020年第14期125-132,共8页

通过调查珠江广州虎门段鱼种分布,并利用脂肪酸生物标记探究珠江广州虎门段鱼类脂肪酸组成及其食性。结果表明,奇氏罗非鱼(Tilapia zillii)、鲮(Cirrhinus molitorella)、下口鲶(Hypostomus plecostomus)、鲤(Cyprinus carpio)、鲢(Hypo... 通过调查珠江广州虎门段鱼种分布,并利用脂肪酸生物标记探究珠江广州虎门段鱼类脂肪酸组成及其食性。结果表明,奇氏罗非鱼(Tilapia zillii)、鲮(Cirrhinus molitorella)、下口鲶(Hypostomus plecostomus)、鲤(Cyprinus carpio)、鲢(Hypophthalmichthys molitrix)、赤眼鳟(Squliobarbus curriculus)、鲫(Carassius auratus)、鳊(Parabramis pekinensis)、红狼牙鰕虎鱼(Odontamblyopus rubicundus)、矛尾鰕虎鱼(Chaeturichthys stigmatias)、七丝鲚(Coilia grayi)和花鲈(Lateolabrax maculatus)是珠江广州虎门段水体中常见的鱼种,鱼体中主要脂肪酸由饱和脂肪酸C14∶0、C15∶0、C16∶0、C17∶0、C18∶0,单不饱和脂肪酸C16∶1ω7、C18∶1ω9、C20∶1ω11,多不饱和脂肪酸C18∶2ω6、C16∶3ω3、C20∶2ω6、C20∶4ω6、C20∶5ω3和C22∶6ω3组成,饱和脂肪酸含量为1001.49~97634.47μg/g,单不饱和脂肪酸含量为1161.09~170924.8μg/g,多不饱和脂肪酸含量为859.99~98269.52μg/g。脂肪酸生物标记表明,胡子鲶(Clarias fuscus)、海南红鲌(Erythroculter pseudobrevicauda)、革胡子鲶(Clarias lazera)、斑鳢(Channa maculate)、月鳢(Channa asiatica)、棘头梅童鱼(Collichthys lucidus)、花鲈、舌鳎(Cynoglossus joyneri)、赤眼鳟、鲫、鳙(Aristichthys nobilis)、七丝鲚、鲻(Mugil cephalus)、日本鳗鲡(Anguilla japonica)、鲢、泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)、奇氏罗非鱼等鱼类主要摄食附着生物、底栖生物、浮游动物及浮游植物,且肉食性特性随体重的增大而增强。 展开更多

关键词 鱼类 脂肪酸特征 珠江 食性

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CO_2气调胁迫下烟草甲谷胱甘肽S-转移酶基因的表达分析 被引量：5

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作者 许抗抗 丁天波 +2 位作者 严毅 李灿 杨文佳 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期599-607,共9页

根据烟草甲(Lasioderma serricorne)转录组数据信息,克隆获得3个谷胱甘肽S-转移酶(glutathione Stransferases,GSTs)基因的c DNA全长序列,同源性比对和系统进化分析表明,这3个基因分别属于GSTs基因Theta、Delta和Sigma家族,分别命名为Ls... 根据烟草甲(Lasioderma serricorne)转录组数据信息,克隆获得3个谷胱甘肽S-转移酶(glutathione Stransferases,GSTs)基因的c DNA全长序列,同源性比对和系统进化分析表明,这3个基因分别属于GSTs基因Theta、Delta和Sigma家族,分别命名为Ls GSTt1、Ls GSTd1和Ls GSTs1(Gen Bank登录号:KY549655、KY549656和KY549657),并分析了其在烟草甲不同发育阶段和CO_2气调胁迫后的表达特征,为研究烟草甲GSTs基因的生物学功能提供依据。实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)结果显示:烟草甲Ls GSTt1、Ls GSTd1和Ls GSTs1基因在不同发育阶段均有表达,且在低龄幼虫中表达量最高,显著高于其他时期;经LC10、LC30和LC503种CO_2浓度处理低龄幼虫6 h后,烟草甲Ls GSTd1表达量相对于对照组无明显变化,而Ls GSTt1和Ls GSTs1表达量显著高于对照组,推测这2个基因可能主要参与了烟草甲对CO_2气调胁迫的应激响应。 展开更多

关键词 谷胱甘肽S-转移酶 烟草甲 基因克隆 表达模式

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再生水景观利用对斑马鱼(Danio rerio)下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴相关基因转录水平的影响 被引量：3

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作者 叶婷 杨瑞泉 +4 位作者 李艳玲 田密 张翔 杨大星 李灿 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期227-238,共12页

再生水对水体生物具有潜在的危害。为了评估再生水对水体生物的早期分子毒理效应,采用荧光定量多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术分析再生水对斑马鱼下丘脑-垂体-性腺(hypothalamus-pituitary-gonadal,HPG)轴相关基因... 再生水对水体生物具有潜在的危害。为了评估再生水对水体生物的早期分子毒理效应,采用荧光定量多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术分析再生水对斑马鱼下丘脑-垂体-性腺(hypothalamus-pituitary-gonadal,HPG)轴相关基因转录水平的影响。再生水暴露后,斑马鱼体长、体质量、生长状况因子(condition factor,K)、脑指数(brain-somatic index,BSI)和性腺指数(gonadosomatic index,GSI)无显著改变。再生水暴露7 d引起雄性斑马鱼脑雄激素受体(androgen receptor,Ar)、雌激素受体1(estrogen receptor 1,Esr1)、卵泡刺激素β多肽(follicle stimulating hormone beta polypeptide,Fshb)、黄体生成素β多肽(luteinizing hormone beta polypeptide,Lhb)、促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone 2,Gnrh2)和促性腺激素释放激素(gonado-tropin-releasing hormone 3,Gnrh3)基因的转录水平显著下调(P<0.05),并引起雌性斑马鱼脑Gnrh3基因转录水平显著上调(P<0.05)。再生水暴露7 d导致类固醇激素合成通路下游基因如Ar、Esr1、卵巢芳香化酶(ovarian cytochrome P450 aromatase,cyp19ala)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,hsd3b)、17β-羟化类固醇脱氢酶3(17β-hydroxysteroid dehydro-genase type 3,hsd17b3)和20β-羟化类固醇脱氢酶(20β-hydroxysteroid dehydrogenase,hsd20b)在雄性斑马鱼睾丸中表达水平显著减少(P<0.05);相反,雌性斑马鱼卵巢Esr1和11β-羟化酶(11β-hydroxylase,cyp11b)基因转录水平显著增加(P<0.05)。再生水对斑马鱼暴露14 d后,雄性斑马鱼脑Esr1、Fshb和Lhb基因表达水平显著下调(P<0.05),睾丸Ar、Esr1、类固醇源性急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory,star)、cyp19a1a、11β-羟化类固醇脱氢酶2(11β-hydroxysteroid dehydrogenase 2,hsd11b2)、hsd20b和hsd17b3基因转录水平也显著降低(P<0.05)。然而再生水暴露14 d显著上调了雌性斑马鱼卵巢Esr1、孕激素受体(progesterone receptor,pgr)、cyp19a1a、hsd3b、hsd17b3和star基因转录水平(P<0.05),并且下调了脑Gnrh3和Fshb的转录水平(P<0.05)。综上所述,本研究结果表明再生水显著影响了斑马鱼HPG轴相关基因转录水平,具有性别和暴露时间差异性,为再生水对斑马鱼生殖系统的影响提供了新的见解。 展开更多

关键词 再生水 斑马鱼(Danio rerio) HPG轴 内分泌干扰效应

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烟草甲攻击素基因LsAttacin2的表达及其在抗细菌胁迫中的作用 被引量：1

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作者 夏鹏亮 严毅 +2 位作者 宋兴宜 黄勇 杨文佳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期501-509,共9页

【目的】本研究旨在阐明烟草甲Lasioderma serricorne幼虫体内攻击素(attacin)基因LsAttacin2在响应细菌侵染过程中的功能。【方法】利用RT-PCR扩增烟草甲LsAttacin2的cDNA全长序列;利用RT-qPCR检测LsAttacin2在烟草甲不同发育阶段(卵... 【目的】本研究旨在阐明烟草甲Lasioderma serricorne幼虫体内攻击素(attacin)基因LsAttacin2在响应细菌侵染过程中的功能。【方法】利用RT-PCR扩增烟草甲LsAttacin2的cDNA全长序列;利用RT-qPCR检测LsAttacin2在烟草甲不同发育阶段(卵、低龄幼虫、高龄幼虫、蛹、低龄成虫和高龄成虫)、4龄幼虫不同组织(头、表皮、前肠、中肠、后肠、脂肪体和马氏管)、大肠杆菌Escherichia coli和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus侵染及其肽聚糖处理4龄幼虫后的相对表达量;通过注射法利用RNAi沉默烟草甲4龄幼虫LsAttacin2的表达后,检测大肠杆菌和金黄色葡萄球菌侵染烟草甲4龄幼虫后的死亡率。【结果】克隆获得烟草甲LsAttacin2(GenBank登录号:MT635176)的cDNA全长序列,其开放阅读框长504 bp,编码167个氨基酸残基,LsAttacin2 N端存在信号肽,C端具有Attacin_C超家族的保守结构域。RT-qPCR结果表明,LsAttacin2在烟草甲测试的各发育阶段均有表达,且在高龄幼虫和蛹中高表达;LsAttacin2主要在4龄幼虫中肠、表皮和脂肪体等免疫组织中表达;大肠杆菌和金黄色葡萄球菌及其肽聚糖均诱导了烟草甲4龄幼虫体内LsAttacin2的上调表达。RNAi结合细菌生物测定结果表明,ds LsAttacin2注射组4龄幼虫中LsAttacin2的表达量在注射24和48 h时较对照组(注射ds GFP)分别显著下降了72.8%和80.4%;RNAi后48 h,与注射ds GFP的对照组相比,ds LsAttacin2注射组大肠杆菌和金黄色葡萄球菌侵染24 h时4龄幼虫的死亡率分别提高了21.1%和24.4%。【结论】本研究结果表明LsAttacin2可能在烟草甲抗细菌的免疫应答过程中起着重要作用。 展开更多

关键词 烟草甲 攻击素 基因表达 细菌侵染 免疫 RNA干扰

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超表达马尾松PmPT3基因提高拟南芥耐低磷能力

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作者 方丹丹 张婷 文晓鹏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1-8,共8页

旨在探讨马尾松PmPT3基因在低磷胁迫条件下对拟南芥磷吸收利用的影响,实现林木优良基因的利用。通过构建马尾松PmPT3基因超表达载体pBWA(V)HS-PmPT3,采用花序浸染法遗传转化拟南芥。经筛选和检测,共获得4株T3代纯合株系;磷处理结果表明... 旨在探讨马尾松PmPT3基因在低磷胁迫条件下对拟南芥磷吸收利用的影响,实现林木优良基因的利用。通过构建马尾松PmPT3基因超表达载体pBWA(V)HS-PmPT3,采用花序浸染法遗传转化拟南芥。经筛选和检测,共获得4株T3代纯合株系;磷处理结果表明:超表达马尾松PmPT3基因显著提高了转基因拟南芥超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性,分别是野生型植株的2.17倍、1.59倍、1.81倍;丙二醛(MDA)含量较野生型植株降低了47.58%。转基因拟南芥的地上部分和根部总磷含量及无机磷含量较野生型相比,分别提高了1.26倍和1.74倍及1.38倍和1.89倍。转基因植株较野生型地上部干重提高了45.46%,根干重提高了55.56%,总干重提高了46.15%。与正常供磷条件相比,处于低磷胁迫下的拟南芥转基因植株,其根部和地上部分中的PmPT3基因表达量显著上调,且在根部达到极显著水平。结果表明,超表达马尾松PmPT3基因可以提高低磷胁迫下拟南芥中保护酶活性、降低丙二醛产生,促进拟南芥对磷元素的吸收,从而提高拟南芥耐低磷胁迫的能力,为通过基因工程创制耐低磷新种质提供了科学依据。 展开更多

关键词 超表达 马尾松 PmPT3基因 拟南芥 低磷胁迫

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再生水对斑马鱼幼鱼内分泌相关基因转录水平的影响

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作者 叶婷 杨瑞泉 +3 位作者 田蜜 周梅 李冕 李灿 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期145-151,共7页

再生水对性别分化前的幼鱼HPA轴和HPG轴相关基因分子水平的影响鲜有报道。为探究再生水对斑马鱼幼鱼性别分化及HPG轴和HPA轴转录水平的影响,该研究将斑马鱼暴露于再生水中3 d和7 d,然后在洁净水体中恢复7 d。结果表明,再生水暴露3 d后,... 再生水对性别分化前的幼鱼HPA轴和HPG轴相关基因分子水平的影响鲜有报道。为探究再生水对斑马鱼幼鱼性别分化及HPG轴和HPA轴转录水平的影响,该研究将斑马鱼暴露于再生水中3 d和7 d,然后在洁净水体中恢复7 d。结果表明,再生水暴露3 d后,大多数基因尤其是斑马鱼幼鱼HPG和HPA轴上游基因Gnrh2、Crh以及皮质醇应激通路基因Mr上调。并且,再生水暴露诱导了幼鱼阶段类固醇激素通路紧密相关基因Vtg1的表达水平。相比之下,再生水暴露7 d后,斑马鱼幼鱼HPG轴相关基因(Gnrh2和Gnrh3)和HPA轴相关基因(Crh和Pomc)的转录表达被抑制,性别分化相关基因(Amh、Sox9a和Sox9b)和类固醇激素通路基因(Cyp11b和Hsd17b3)显著上调。更重要的是斑马鱼幼鱼在洁净水体中恢复7 d后,再生水暴露处理后的斑马鱼幼鱼Mr、Gr、Cyp11b、Amh、Sox9a和Sox9b转录水平仍然显著上调,说明再生水对斑马鱼幼鱼分子水平的影响是持续的。研究结果表明再生水会改变斑马鱼幼鱼HPG轴、HPA轴和性别分化相关基因转录水平。 展开更多

关键词 再生水 斑马鱼 HPG轴 HPA轴 性别分化

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氯化汞对中国大鲵皮肤CATH-BF基因及心脏和胰腺CATH-2、CATH-3基因表达的影响

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作者 叶婷 王兴香 +3 位作者 刘亚男 曹宇 许抗抗 李灿 《河南农业科学》 北大核心 2020年第1期148-156,共9页

为探讨氯化汞(HgCl 2)对大鲵皮肤CATH-BF基因及心脏和胰腺CATH-2、CATH-3基因表达的影响,将幼龄中国大鲵分别暴露于0(对照)、1、10、100 ng/L HgCl 2中24、48、72 h,采用实时定量RT-PCR方法分析HgCl 2处理不同时间后,大鲵皮肤CATH-BF、... 为探讨氯化汞(HgCl 2)对大鲵皮肤CATH-BF基因及心脏和胰腺CATH-2、CATH-3基因表达的影响,将幼龄中国大鲵分别暴露于0(对照)、1、10、100 ng/L HgCl 2中24、48、72 h,采用实时定量RT-PCR方法分析HgCl 2处理不同时间后,大鲵皮肤CATH-BF、心脏和胰腺中CATH-2、CATH-3基因的表达情况。结果显示,与对照组相比,大鲵暴露于HgCl 224 h后,大鲵皮肤CATH-BF基因表达水平均呈现下降变化趋势,即1、100 ng/L HgCl 2对大鲵暴露24 h极显著下调了大鲵皮肤CATH-BF基因表达水平(P<0.01),10 ng/L HgCl 2对大鲵暴露24 h显著下调了大鲵皮肤CATH-BF基因表达水平(P<0.05),10、100 ng/L HgCl 2对大鲵暴露48 h显著诱导了大鲵皮肤CATH-BF基因表达(P<0.05),大鲵暴露于HgCl 272 h后,HgCl 2对大鲵皮肤CATH-BF基因表达无显著影响;大鲵暴露于HgCl 224 h后,不同质量浓度HgCl 2对大鲵心脏CATH-2基因表达水平有不同的影响,即1、10 ng/L对大鲵暴露24 h极显著下调了心脏CATH-2基因表达水平(P<0.01),100 ng/L HgCl 2对大鲵暴露24 h极显著上调了心脏CATH-2基因表达水平(P<0.01),10、100 ng/L HgCl 2对大鲵暴露48 h后显著下调了大鲵心脏CATH-2基因表达水平(P<0.05);10、100 ng/L HgCl 2对大鲵暴露24 h显著下调了大鲵胰腺CATH-2基因表达水平(P<0.05);1、10 ng/L HgCl 2对大鲵暴露24 h极显著诱导了心脏CATH-3基因表达水平(P<0.01),大鲵暴露于HgCl 224、48、72 h后,HgCl 2对胰腺CATH-3基因表达均无显著性影响。可见,HgCl 2对大鲵皮肤CATH-BF基因及胰腺和心脏CATH-2、CATH-3基因表达的影响处于动态变化模式,并且HgCl 2对大鲵胰腺和心脏CATH-2、CATH-3基因表达影响存在组织特异性差异。 展开更多

关键词 中国大鲵 氯化汞 CATH-BF基因 CATH-2基因 CATH-3基因

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