特发性骨髓纤维化患者JAK2V617F突变研究 被引量：10

1

作者 李伟达 李建勇 +3 位作者 张苏江 仇海荣 徐卫 王季石 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期387-390,共4页

为了探讨特发性骨髓纤维化(IMF)JAK2V617F点突变发生率及其临床意义,运用等位基因特异性聚合酶链式反应(AS-PCR)检测12例IMF患者的JAK2V617F点突变,并探讨JAK2V617F变化与临床、血液学特征的相关性。结果显示:随访期2-15个月,12例患者JA... 为了探讨特发性骨髓纤维化(IMF)JAK2V617F点突变发生率及其临床意义,运用等位基因特异性聚合酶链式反应(AS-PCR)检测12例IMF患者的JAK2V617F点突变,并探讨JAK2V617F变化与临床、血液学特征的相关性。结果显示:随访期2-15个月,12例患者JAK2V617F点突变检测阳性率为50%,而半数患有血栓史,其血小板数目及骨髓巨核细胞数目相对增多。另6例JAK2V617F点突变阴性患者仅1例有血栓史,血小板数目及骨髓巨核细胞数目相对较低。结论:JAK2V617F点突变阳性IMF患者多数具有典型的临床表现及血液学特点,其血小板数目及骨髓巨核细胞数目相对增多。 展开更多

关键词 特发性骨髓纤维化 JAK2V617F点突变 血小板 骨髓巨核细胞

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急性髓系白血病FLT3基因突变研究 被引量：11

2

作者 韩阳利 张苏江 +7 位作者 乔纯 戴丹 孙雪梅 徐燕丽 钱思轩 徐卫 王季石 李建勇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期1135-1139,共5页

本研究探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因内部串联重复突变(ITD)及第二酪氨酸激酶结构域(TKD)点突变及其临床意义。采用基因组DNA-PCR方法检测131例初发AML患者骨髓单个核细胞FLT3基因... 本研究探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因内部串联重复突变(ITD)及第二酪氨酸激酶结构域(TKD)点突变及其临床意义。采用基因组DNA-PCR方法检测131例初发AML患者骨髓单个核细胞FLT3基因外显子14、15中ITD突变,采用基因组DNA-PCR结合限制性内切酶酶切方法检测FLT3基因外显子20中TKD点突变。结果表明:131例初治AML患者中,21例(16.0%)FLT3-ITD突变阳性,3例(2.3%)FLT3-TKD点突变阳性,无同一患者同时发生两种突变。FLT3-ITD阳性组初诊时白细胞计数(WBC)及骨髓原始细胞比例高于野生型FLT3(FLT3-wt)组。FLT3-ITD阳性组患者完全缓解(CR)率47.6%,显著低于FLT3-wt88.1%(p<0.05)。20例M3患者中,FLT3-ITD阳性组及阴性组患者缓解率差异无统计学意义;非M3FLT3-ITD阳性组患者CR率为37.5(6/16例),显著低于非M3FLT3-wt组患者CR率90.6%(48/53例)(p<0.05)。阳性组患者完全缓解后14个月(2-20个月)内复发3例,复发率为50%(3/6),高于FLT3-wt组29.2%(14/48例)。由于FLT3-TKD阳性患者仅3例,未单独进行统计学分析。结论:FLT3基因突变是AML患者中常见的突变,FLT3-ITD突变较FLT3-TKD点突变发生率高,FLT3-ITD有突变的AML患者预后差;FLT3-TKD点突变对预后的影响不明显。临床上早期FLT3基因突变检测对AML患者今后的靶向治疗及了解临床预后有重要意义。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 第二酪氨酸激酶结构域 FLT3基因突变

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贵州产天冬总皂苷清除氧自由基能力的研究 被引量：11

3

作者 李艳菊 丁文 +1 位作者 李琴山 刘洋 《医药导报》 CAS 北大核心 2012年第7期874-876,共3页

目的提取贵州产天冬中总皂苷,并观察其清除氧自由基作用。方法提取贵州产天冬总皂苷,选用菝葜皂苷元为对照品,采用分光光度法,高氯酸显色,310 nm波长处测定其吸光度,计算天冬中总皂苷的含量;采用连苯三酚法及邻二氮菲-Fe(Ⅱ)/H2O2体系,... 目的提取贵州产天冬中总皂苷,并观察其清除氧自由基作用。方法提取贵州产天冬总皂苷,选用菝葜皂苷元为对照品,采用分光光度法,高氯酸显色,310 nm波长处测定其吸光度,计算天冬中总皂苷的含量;采用连苯三酚法及邻二氮菲-Fe(Ⅱ)/H2O2体系,用分光光度法测定天冬总皂苷对O2-和.OH的影响。结果以菝葜皂苷元为对照品,贵州产天冬中天冬总皂苷的含量为2.390%,RSD=1.19%(含量均以干燥品计算);提取的天冬总皂苷在体外对O2-具有清除作用(P<0.01),其对O2-清除率及O2-的抑制率与天冬总皂苷含量成正相关;贵州产天冬中天冬总皂苷对.OH也有一定的清除作用,清除率为(29.1±0.17)%(P<0.05)。结论贵州产天冬中天冬总皂苷对O2-具有显著的清除及抑制作用,对.OH也有一定的清除作用。 展开更多

关键词 天冬 总皂苷 氧自由基 超氧阴离子自由基

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酪氨酸激酶突变与t(8;2急性髓系白血病 被引量：5

4

作者 韩阳利 张苏江 +7 位作者 乔纯 戴丹 孙雪梅 徐燕丽 钱思轩 徐卫 王季石 李建勇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期866-869,共4页

本研究探讨c-KIT、FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)、Janus激酶2(JAK2)在伴t(8;21)的急性髓系白血病(AML)患者的突变情况,及其与患者临床表现和预后的相关性。采用普通PCR扩增技术、等位基因PCR技术、酶切及序列测定等方法,分别检测8例初发、6... 本研究探讨c-KIT、FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)、Janus激酶2(JAK2)在伴t(8;21)的急性髓系白血病(AML)患者的突变情况,及其与患者临床表现和预后的相关性。采用普通PCR扩增技术、等位基因PCR技术、酶切及序列测定等方法,分别检测8例初发、6例复发t(8;21)AML患者FLT3、JAK2、c-KIT突变。结果表明:在2/14例(14.3%)伴t(8;21)的AML患者中检测到c-KIT突变,其中1例为c-KITD816V,另1例为c-KITD816Y突变;在1/14例(7.1%)患者中检测到FLT3-ITD突变。在14例标本中均未检测到JAK2突变。结论:酪氨酸激酶突变与t(8;21)AML具有相关性,可能提示有较高复发率及髓外浸润,预后不良。筛查c-KIT、FLT3突变等对t(8;21)AML预后判断和治疗指导可能具有重要意义。 展开更多

关键词 t(8 21) c—KIT基因 急性髓系白血病 突变

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贵州产天冬中多糖的提取及其抗氧化活性的研究 被引量：9

5

作者 李艳菊 李琴山 +1 位作者 田硕 刘洋 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第7期1436-1437,1463,共3页

沸水煮提贵州产天冬中的多糖成分并提纯;测定其对.O2-和.OH的清除作用。结果显示贵州产天冬中多糖的提取率为13.00%;一定剂量的天冬多糖在体外对.O2-和.OH具有显著的清除作用(P<0.05)。

关键词 天冬 多糖 提取 抗氧化

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成人急性淋巴细胞白血病中乳腺癌耐药蛋白基因表达及其临床意义 被引量：5

6

作者 江雪杰 王季石 方琴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期31-34,共4页

本研究探讨成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因表达与临床耐药及预后的关系。应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),以β2微球蛋白(β2-MG)作内对照,检测了97例初治敏感及难治耐药的ALL患者BCRP基因的表达,并检... 本研究探讨成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因表达与临床耐药及预后的关系。应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),以β2微球蛋白(β2-MG)作内对照,检测了97例初治敏感及难治耐药的ALL患者BCRP基因的表达,并检测30例正常人BCRP基因表达水平,将BCRP/β2-MG≥0.48定为BCRP阳性。结果显示:初治敏感ALL患者BCRP基因表达阳性率为28.7%,难治耐药BCRP基因表达阳性率为51.2%。BCRP阴性和阳性患者的首次完全缓解(CR1)率分别为71.7%和29.7%(p<0.01)。BCRP基因表达水平在ALL的FAB亚型间L3型明显高于L1、L2型;在免疫分型中B细胞性ALL患者BCRP基因表达较T细胞性高,存在着明显的统计学差异(p<0.01),尤其以成熟B细胞性ALL最高。结论:ALL患者的BCRP基因高表达可以导致临床耐药,是ALL患者不利的预后因素。 展开更多

关键词 急性淋巴细胞白血病 乳腺癌 乳腺癌耐药蛋白 基因表达 耐药

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AMN107联合血红素加氧酶-1抑制剂诱导慢性髓系白血病细胞凋亡 被引量：1

7

作者 陈珵 王季石 +4 位作者 杨畅 于艳艳 李燕 马丹 方琴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期867-871,共5页

运用AMN107(尼洛替尼)联合血红素加氧酶-1(HO-1)抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)作用于慢性髓系白血病(CML)细胞株K562细胞,研究其对CML细胞增殖的影响并探讨其作用机制。采用MTT法和台盼蓝染色法检测AMN107(10μmol/L)及ZnPPⅨ(10μmol/L)单... 运用AMN107(尼洛替尼)联合血红素加氧酶-1(HO-1)抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)作用于慢性髓系白血病(CML)细胞株K562细胞,研究其对CML细胞增殖的影响并探讨其作用机制。采用MTT法和台盼蓝染色法检测AMN107(10μmol/L)及ZnPPⅨ(10μmol/L)单独或联合处理不同时间的细胞增殖率;半定量RT-PCR法和Westernblot法检测空白对照组、ZnPPⅨ(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)联合ZnPPⅨ(10μmol/L)组48 h时细胞HO-1的表达;AnnexinⅤ/PI双染色法检测处理48 h时各组细胞凋亡情况。结果表明:联合用药对细胞的抑制作用最强,且呈时间依赖性;联合用药组HO-1的表达量最低;空白对照组、ZnPPⅨ(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)联合ZnPPⅨ(10μmol/L)组48 h时细胞凋亡率分别为(11.38±0.02)%、(17.44±0.08)%、(39.81±0.07)%和(56.46±0.19)%。结论:第二代酪氨酸激酶抑制剂AMN107具有诱导CML细胞凋亡的作用;抑制HO-1表达能加强AMN107对CML细胞的杀伤作用,这为临床进一步提高CML的疗效提供实验依据。 展开更多

关键词 AMN107 锌原卟啉Ⅸ 血红素加氧酶-1 K562细胞 慢性髓系白血病 细胞凋亡

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急性白血病患者胞苷脱氨酶活性改变的临床意义 被引量：1

8

作者 赵晓甦 孙志强 +1 位作者 江滨 王德炳 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期181-184,共4页

目的:探讨不同病期急性白血病(AL)患者骨髓细胞内胞苷脱氨酶(CDD)活性与临床疗效的关系。方法:应用放射性同位素法检测80例急性白血病患者骨髓单个核细胞内CDD活性,并分析其与临床疗效的关系。结果:初治及难治复发组患者的CDD活性明显... 目的:探讨不同病期急性白血病(AL)患者骨髓细胞内胞苷脱氨酶(CDD)活性与临床疗效的关系。方法:应用放射性同位素法检测80例急性白血病患者骨髓单个核细胞内CDD活性,并分析其与临床疗效的关系。结果:初治及难治复发组患者的CDD活性明显高于完全缓解(CR)组(P<0.05)。CDD活性与患者的年龄、性别、白血病分型及应用含有阿糖胞苷(Ara-C)方案的化疗效果等因素之间无明显相关性(P>0.05)。结论:AL患者细胞内CDD活性可能与疾病阶段相关,但它可能不是体外预测Ara-C疗效的独立指标。 展开更多

关键词 白血病 急性病 胞苷脱氨酶 阿糖胞苷 放射性同位素

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贵州产天冬水提液对氧自由基的作用 被引量：3

9

作者 李艳菊 李琴山 刘洋 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第28期17230-17231,共2页

[目的]研究贵州产天冬水提液的氧自由基清除能力。[方法]以贵州产天冬为研究对象,提取其水提液;采用连苯三酚法在碱性溶液中自氧化反应产生超氧阴离子自由基(O2-),采用邻二氮菲-Fe(Ⅱ)/H2O2体系产生羟自由基(·OH),用分光光度法测... [目的]研究贵州产天冬水提液的氧自由基清除能力。[方法]以贵州产天冬为研究对象,提取其水提液;采用连苯三酚法在碱性溶液中自氧化反应产生超氧阴离子自由基(O2-),采用邻二氮菲-Fe(Ⅱ)/H2O2体系产生羟自由基(·OH),用分光光度法测定天冬水提液对O2-和·OH的作用。[结果]高剂量组天冬水提液对O2-具有显著的清除及抑制作用,对·OH也有一定的清除作用,清除率为(22.80%±0.13%)。[结论]贵州产天冬水提液对O2-具有显著的清除及抑制作用,对·OH也有一定的清除作用。 展开更多

关键词 天冬 分光光度法 超氧阴离子自由基

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天冬总皂苷对衰老大鼠心脏P16基因表达的影响 被引量：2

10

作者 李艳菊 丁文 +1 位作者 刘洋 李琴山 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期511-513,共3页

目的:研究天冬总皂苷对衰老大鼠心脏的保护作用及其对P16基因表达的影响。方法:通过皮下注射D-半乳糖建立衰老大鼠模型的同时,以天冬总皂苷灌胃进行治疗;采用硫代巴比妥酸法和黄嘌呤氧化法分别测定血清和心脏组织中丙二醛(Malondialdehy... 目的:研究天冬总皂苷对衰老大鼠心脏的保护作用及其对P16基因表达的影响。方法:通过皮下注射D-半乳糖建立衰老大鼠模型的同时,以天冬总皂苷灌胃进行治疗;采用硫代巴比妥酸法和黄嘌呤氧化法分别测定血清和心脏组织中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性;采用光镜观察各组大鼠心脏形态学改变;应用Real-time PCR检测各组心脏组织P16 mRNA的表达。结果:天冬总皂苷给药组与模型组相比,血清与心脏中SOD活性均明显增高、MDA含量显著降低(P<0.05),并呈剂量依赖性;模型组心肌细胞嗜酸性染色增强,心肌细胞数量未见明显改变,但可见部分心肌细胞体积增大,心肌细胞间质内结缔组织增生,给药组能有效改善上述改变;与模型组相比,给药组能够使大鼠心脏组织内的P16 mRNA表达下降(P<0.05)。结论:天冬总皂苷增加自由基清除酶活力、降低P16 mRNA的表达可能是其改善衰老大鼠心脏的机制之一。 展开更多

关键词 天冬 衰老 心脏 P16

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异基因造血干细胞移植前后联合伊马替尼治疗Ph染色体阳性的白血病 被引量：1

11

作者 李梦醒 王季石 +2 位作者 张燕 赵鹏 李艳菊 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第18期3041-3042,共2页

目的：观察异基因造血干细胞移植前后联合伊马替尼治疗Ph＋白血病的临床疗效。方法：回顾性分析2011年1月至2013年2月采用亲缘异基因造血干细胞移植联合甲磺酸伊马替尼治疗的Ph染色体阳性白血病15例的临床资料，并随访生存期。结果：15... 目的：观察异基因造血干细胞移植前后联合伊马替尼治疗Ph＋白血病的临床疗效。方法：回顾性分析2011年1月至2013年2月采用亲缘异基因造血干细胞移植联合甲磺酸伊马替尼治疗的Ph染色体阳性白血病15例的临床资料，并随访生存期。结果：15例患者移植后均获得造血重建，患者输注单个核细胞的中位数为4．32×10^8／kg。输注CD34＋细胞中位数为3．15×10^6／kg。发生Ⅱ度急性移植物抗宿主病（aGVHD）9例．Ⅲ度aGVHD1例，局限型慢性移植物抗宿主病（cGVHD）10例，广泛型cGVHD3例；无白血病存活率为73-3％。行HLA匹配亲缘HSCT者的总体存活率为80％。结论：亲缘异基因造血干细胞造移植前、后联合伊马替尼治疗Ph（＋）白血病，具有降低移植前白血病细胞负荷，抑制残留白血病细胞增殖，促进供者完全嵌合状态的转变，是一种安全有效的治疗方法。 展开更多

关键词 Ph+白血病 造血干细胞移植 甲磺酸伊马替尼

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难治性白血病治疗进展 被引量：2

12

作者 王季石 卢英豪 《实用医学杂志》 CAS 2008年第12期2023-2025,共3页

虽然近年针对难治性白血病。临床应用加强分子靶向治疗、改进造血干细胞移植和开发新药、组成新的化疗方案等方法，取得了一定疗效，但难治性白血病因自身特性难达完全缓解（CR）和长期无病生存，仍是目前白血病研究的重点和难点。现就... 虽然近年针对难治性白血病。临床应用加强分子靶向治疗、改进造血干细胞移植和开发新药、组成新的化疗方案等方法，取得了一定疗效，但难治性白血病因自身特性难达完全缓解（CR）和长期无病生存，仍是目前白血病研究的重点和难点。现就难治性白血病治疗进展做综述如下。 展开更多

关键词 难治性白血病 分子靶向治疗 造血干细胞移植 长期无病生存 临床应用 化疗方案 完全缓解 自身特性

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自体造血干细胞移植治疗鼻腔NK/T细胞淋巴瘤并皮肤浸润1例

13

作者 孙志强 王季石 +2 位作者 卢英豪 谢润兰 龙正美 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期536-536,540,共2页

关键词 鼻腔NK/T细胞淋巴瘤 皮肤浸润 化疗 放疗 自体造血干细胞移植

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TRAIL基因原核表达载体的构建、表达与抗体制备

14

作者 方琴 孙等军 +6 位作者 张旭 任志娟 肖芸 刘丰丰 吴正宇 文小平 王季石 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第1期50-53,共4页

目的:获取抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抗体。方法:利用PCR技术和基因重组技术将TRAIL基因构建于原核表达载体pPreTMH-Tb中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导在大肠杆菌DH-5α中获得表达,并将TRAIL蛋白免疫家... 目的:获取抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抗体。方法:利用PCR技术和基因重组技术将TRAIL基因构建于原核表达载体pPreTMH-Tb中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导在大肠杆菌DH-5α中获得表达,并将TRAIL蛋白免疫家兔,通过Dot blot及Western blot检测抗TRAIL抗体的产生。结果:成功构建TRAIL基因原核表达载体,并在大肠杆菌DH-5α中获得表达,TRAIL蛋白表达量占菌体蛋白质总量的11.8％,Dot blot及Western blot检测证实获得了抗TRAIL抗体。结论:成功制备抗TRAIL抗体,这为TRAIL在真核细胞水平研究奠定了实验基础。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 基因表达 大肠杆菌

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六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶基因导入增强外周血单个核细胞抗药性

15

作者 李栋博 王季石 方琴 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期619-621,630,共4页

目的研究六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因导入后人外周血单个核细胞(PBMC)对烷化剂抗药性的改变。方法利用脂质体法将含人MGMT基因的真核表达载体导入体外培养的外周血单个核细胞,实时PCR及Western blot检测目的基因mRNA及蛋白... 目的研究六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因导入后人外周血单个核细胞(PBMC)对烷化剂抗药性的改变。方法利用脂质体法将含人MGMT基因的真核表达载体导入体外培养的外周血单个核细胞,实时PCR及Western blot检测目的基因mRNA及蛋白水平的表达。四氮唑蓝法(MTT)检测细胞对硝卡芥抗药性的改变。结果转染目的基因组在mRNA及蛋白水平与转空载体及对照相比均为高表达。MTT法结果显示转目的基因组对硝卡芥的IC50是转空载体组及对照组的两倍。结论MGMT基因导入能够增强外周血单个核细胞对烷化剂的抗性从而起到保护作用。 展开更多

关键词 基因转染 单个核细胞 耐药基因 烷化剂

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成人急性髓细胞性白血病NPM1突变预后相关性及与FLT3、CEBPA基因突变的相互关系的研究 被引量：4

16

作者 鲍丽彦 王季石 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期19-24,共6页

本研究旨在探讨成人急性髓系白血病(AML)患者npm1基因第12外显子突变与预后相关性及其与其他基因突变的相互关系。收集AML患者骨髓或外周血标本,按常规收集患者的病史、症状、体征、相关影象学检查、血常规检查、NAP、动脉血氧饱和度、... 本研究旨在探讨成人急性髓系白血病(AML)患者npm1基因第12外显子突变与预后相关性及其与其他基因突变的相互关系。收集AML患者骨髓或外周血标本,按常规收集患者的病史、症状、体征、相关影象学检查、血常规检查、NAP、动脉血氧饱和度、骨髓常规形态+活检+染色体+荧光原位杂交(FISH)检测bcr-abl融合基因、血清EPO等,按WHO标准诊断分型。抽提DNA,采用等位基因特异性PCR结合测序检测npm1突变。结果表明,150名细胞遗传学正常的白血病患者中72例发生npm1杂合子基因突变(48%,72/150)。48%的患者存在npm1C基末端的移码突变。npm1突变的患者有特定的临床、表型和遗传特点。统计分析显示,npm1和flt3ITDs有重要的相互作用。npm1突变对诱导治疗有更好的反应,没有flt3ITD突变的患者总存活率提高。多变量分析显示,npm1突变和cebpa突变与总存活率(OS)呈正相关,flt3突变与OS呈负相关。结论:npm1突变在没有flt3基因突变时,在具有成人正常细胞遗传学的AML患者中是一个良好的独立预后因素。 展开更多

关键词 急性髓性白血病 npml突变 npml基因突变 fit3基因突变

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急性淋巴细胞白血病患者免疫功能评价初步研究 被引量：2

17

作者 吴颖亚 王季石 方琴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期718-720,共3页

本研究旨在采用蛋白质芯片及酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的IL-2、IL-4、IL-12、IL-13、TNF-α、IFN-γ6种免疫相关细胞因子进行测定,以评价患者的免疫功能。制作人细胞因子蛋白质芯片,通过芯片及ELISA法... 本研究旨在采用蛋白质芯片及酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的IL-2、IL-4、IL-12、IL-13、TNF-α、IFN-γ6种免疫相关细胞因子进行测定,以评价患者的免疫功能。制作人细胞因子蛋白质芯片,通过芯片及ELISA法对收集的患者及正常人外周血的血清(其中患者28例,正常对照25例)进行测定。结果表明,ALL患者IL-4、IL-13、IL-12、IFN-γ及TNF-α表达水平均低于正常组,但ELISA检测显示,TNF-α表达在ALL和正常对照组中均为阴性。结论:ALL患者的细胞免疫与体液免疫均受到抑制,芯片比ELISA方法敏感。 展开更多

关键词 蛋白质芯片技术 急性淋巴细胞白血病 细胞因子 免疫功能

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细胞色素氧化酶P450 3A4基因联合环磷酰胺的体外抗肿瘤效应 被引量：1

18

作者 张巍 王季石 +1 位作者 杨远 方琴 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期384-388,共5页

目的克隆细胞色素氧化酶P4503A4(CYP3A4)基因,构建真核表达质粒并导入K562细胞进行表达,研究CYP3A4联合环磷酰胺(CPA)的体外抗肿瘤效应。方法利用RT-PCR从人肝细胞中克隆CYP3A4基因,构建重组真核表达载体。脂质体法导入K562细胞,RT-PCR... 目的克隆细胞色素氧化酶P4503A4(CYP3A4)基因,构建真核表达质粒并导入K562细胞进行表达,研究CYP3A4联合环磷酰胺(CPA)的体外抗肿瘤效应。方法利用RT-PCR从人肝细胞中克隆CYP3A4基因,构建重组真核表达载体。脂质体法导入K562细胞,RT-PCR和Western blot检测CYP3A4基因在K562细胞中的表达并筛选稳定转染的细胞克隆。MTT法检测CYP3A4联合CPA对肿瘤细胞的抑制作用。结果成功克隆CYP3A4基因并构建了真核表达质粒pcDNA3.1/myc-HisA(+)-CYP3A4。RT-PCR和Western blot分别显示转基因组的CYP3A4 mRNA和蛋白质表达水平均显著高于转空载体组和对照组。MTT示转基因组IC50值为1.09016mmol/L,明显低于转空载体组和对照组。酶诱导剂和抑制剂分别能够减低和增高转基因组IC50。结论CYP3A4体外具有联合CPA的抗肿瘤作用,这种作用能够被CYP3A4相应的诱导剂和抑制剂增强或减低。 展开更多

关键词 细胞色素氧化酶P450 3A4 环磷酰胺 基因介导的酶前药治疗 肿瘤治疗 基因转染

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环境激发吗啡条件性位置偏爱重现大鼠海马内脑源性神经营养因子及c-fos的表达 被引量：1

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作者 黄静 方琴 王季石 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第2期198-201,共4页

目的：观察吗啡条件性位置偏爱（CPP）重现大鼠海马内脑源性神经营养因子（BDNF）及即早基因c．fos的表达，探讨BDNF和c-fos对吗啡成瘾记忆的影响。方法：雄性SD大鼠36只，随机分为吗啡CPP激发组（MR组）、吗啡CPP消退组（ME组）及生理... 目的：观察吗啡条件性位置偏爱（CPP）重现大鼠海马内脑源性神经营养因子（BDNF）及即早基因c．fos的表达，探讨BDNF和c-fos对吗啡成瘾记忆的影响。方法：雄性SD大鼠36只，随机分为吗啡CPP激发组（MR组）、吗啡CPP消退组（ME组）及生理盐水对照组（Ns组），每组12只。实验第1～7天，MR组、ME组采用CPP实验，建立大鼠吗啡精神依赖动物模型，实验第8天进行训练后CPP测试，给予7d消退期，实验第16天进行消退后测试，实验第17天对MR组大鼠进行环境激发，第18天进行激发后CPP测试。记录CPP实验过程中15min内伴药箱停留时间；激发后CPP测试完毕后，应用免疫组化方法测定大鼠海马内BDNF和c—fos的表达。结果：3组不同时间点大鼠伴药箱停留时间差异有统计学意义（FH目=5．76，P=0．007；F组别=4．07，P=0．028）。MR组大鼠海马中BDNF、c—fos的阳性细胞数及平均光密度均高于NS组和ME组（P均〈0．01）。结论：BDNF、c-fos可能通过成瘾记忆的形成，参与环境激发的大鼠吗啡CPP重现。 展开更多

关键词 吗啡 条件性位置偏爱 环境激发 脑源性神经营养因子 C-FOS 大鼠 海马

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