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六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶基因导入增强外周血单个核细胞抗药性
1
作者
李栋博
王季石
方琴
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期619-621,630,共4页
目的研究六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因导入后人外周血单个核细胞(PBMC)对烷化剂抗药性的改变。方法利用脂质体法将含人MGMT基因的真核表达载体导入体外培养的外周血单个核细胞,实时PCR及Western blot检测目的基因mRNA及蛋白...
目的研究六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因导入后人外周血单个核细胞(PBMC)对烷化剂抗药性的改变。方法利用脂质体法将含人MGMT基因的真核表达载体导入体外培养的外周血单个核细胞,实时PCR及Western blot检测目的基因mRNA及蛋白水平的表达。四氮唑蓝法(MTT)检测细胞对硝卡芥抗药性的改变。结果转染目的基因组在mRNA及蛋白水平与转空载体及对照相比均为高表达。MTT法结果显示转目的基因组对硝卡芥的IC50是转空载体组及对照组的两倍。结论MGMT基因导入能够增强外周血单个核细胞对烷化剂的抗性从而起到保护作用。
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关键词
基因转染
单个核细胞
耐药基因
烷化剂
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职称材料
细胞色素氧化酶P450 3A4基因联合环磷酰胺的体外抗肿瘤效应
被引量：
1
2
作者
张巍
王季石
+1 位作者
杨远
方琴
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期384-388,共5页
目的克隆细胞色素氧化酶P4503A4(CYP3A4)基因,构建真核表达质粒并导入K562细胞进行表达,研究CYP3A4联合环磷酰胺(CPA)的体外抗肿瘤效应。方法利用RT-PCR从人肝细胞中克隆CYP3A4基因,构建重组真核表达载体。脂质体法导入K562细胞,RT-PCR...
目的克隆细胞色素氧化酶P4503A4(CYP3A4)基因,构建真核表达质粒并导入K562细胞进行表达,研究CYP3A4联合环磷酰胺(CPA)的体外抗肿瘤效应。方法利用RT-PCR从人肝细胞中克隆CYP3A4基因,构建重组真核表达载体。脂质体法导入K562细胞,RT-PCR和Western blot检测CYP3A4基因在K562细胞中的表达并筛选稳定转染的细胞克隆。MTT法检测CYP3A4联合CPA对肿瘤细胞的抑制作用。结果成功克隆CYP3A4基因并构建了真核表达质粒pcDNA3.1/myc-HisA(+)-CYP3A4。RT-PCR和Western blot分别显示转基因组的CYP3A4 mRNA和蛋白质表达水平均显著高于转空载体组和对照组。MTT示转基因组IC50值为1.09016mmol/L,明显低于转空载体组和对照组。酶诱导剂和抑制剂分别能够减低和增高转基因组IC50。结论CYP3A4体外具有联合CPA的抗肿瘤作用,这种作用能够被CYP3A4相应的诱导剂和抑制剂增强或减低。
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关键词
细胞色素氧化酶P450
3A4
环磷酰胺
基因介导的酶前药治疗
肿瘤治疗
基因转染
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职称材料
题名
六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶基因导入增强外周血单个核细胞抗药性
1
作者
李栋博
王季石
方琴
机构
贵阳医学院
第一
附属
医院
血液
科
贵阳医学院第一附属医院药剂科
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期619-621,630,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30460127)
贵州省科技基金项目(黔科合J字[2005]2045)资助
文摘
目的研究六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因导入后人外周血单个核细胞(PBMC)对烷化剂抗药性的改变。方法利用脂质体法将含人MGMT基因的真核表达载体导入体外培养的外周血单个核细胞,实时PCR及Western blot检测目的基因mRNA及蛋白水平的表达。四氮唑蓝法(MTT)检测细胞对硝卡芥抗药性的改变。结果转染目的基因组在mRNA及蛋白水平与转空载体及对照相比均为高表达。MTT法结果显示转目的基因组对硝卡芥的IC50是转空载体组及对照组的两倍。结论MGMT基因导入能够增强外周血单个核细胞对烷化剂的抗性从而起到保护作用。
关键词
基因转染
单个核细胞
耐药基因
烷化剂
Keywords
gene transfection
mononuclear cell
drug-resistant gene
alkylating agent
分类号
Q555 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
细胞色素氧化酶P450 3A4基因联合环磷酰胺的体外抗肿瘤效应
被引量：
1
2
作者
张巍
王季石
杨远
方琴
机构
贵阳医学院
第一
附属
医院
血液
科
贵阳医学院第一附属医院药剂科
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期384-388,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30760276)
文摘
目的克隆细胞色素氧化酶P4503A4(CYP3A4)基因,构建真核表达质粒并导入K562细胞进行表达,研究CYP3A4联合环磷酰胺(CPA)的体外抗肿瘤效应。方法利用RT-PCR从人肝细胞中克隆CYP3A4基因,构建重组真核表达载体。脂质体法导入K562细胞,RT-PCR和Western blot检测CYP3A4基因在K562细胞中的表达并筛选稳定转染的细胞克隆。MTT法检测CYP3A4联合CPA对肿瘤细胞的抑制作用。结果成功克隆CYP3A4基因并构建了真核表达质粒pcDNA3.1/myc-HisA(+)-CYP3A4。RT-PCR和Western blot分别显示转基因组的CYP3A4 mRNA和蛋白质表达水平均显著高于转空载体组和对照组。MTT示转基因组IC50值为1.09016mmol/L,明显低于转空载体组和对照组。酶诱导剂和抑制剂分别能够减低和增高转基因组IC50。结论CYP3A4体外具有联合CPA的抗肿瘤作用,这种作用能够被CYP3A4相应的诱导剂和抑制剂增强或减低。
关键词
细胞色素氧化酶P450
3A4
环磷酰胺
基因介导的酶前药治疗
肿瘤治疗
基因转染
Keywords
CYP3A4
cyclophosphamide
gene directed enzyme prodrug therapy
neoplasm therapy
gene transfection
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶基因导入增强外周血单个核细胞抗药性
李栋博
王季石
方琴
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
细胞色素氧化酶P450 3A4基因联合环磷酰胺的体外抗肿瘤效应
张巍
王季石
杨远
方琴
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
在线阅读
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职称材料
已选择
0
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